李春宇，袁 貞，佘春潔，畢建云

（山東中醫(yī)藥大學(xué)，山東 濟(jì)南 250355）

佛手是蕓香科植物佛手Citrus medicaL. var.sarcodactylisSwingle的干燥果實(shí)，收載于2020年版《中國藥典》（一部）[1]。佛手有多種別名，如佛手片、佛掌等?！侗静菥V目》中描述的古代枸櫞的產(chǎn)地、特征、生長環(huán)境均與現(xiàn)代所稱的中藥佛手相同，由此可知古代之枸櫞即今之佛手。佛手在世界各地廣泛種植。我國主要在南方沿海等地區(qū)栽培佛手，如廣佛手、金佛手、川佛手等[2-3]。成熟佛手具有燥濕化痰、疏肝理氣、和胃止痛的功效。佛手中含多種化學(xué)成分，包括黃酮類物質(zhì)、香豆素、氨基酸等，主要成分為黃酮、揮發(fā)油兩大類。本文整理近年佛手相關(guān)研究，對佛手化學(xué)成分、藥理活性兩方面內(nèi)容進(jìn)行系統(tǒng)性闡述。

1 化學(xué)成分

1.1 黃酮類

黃酮類化合物是指以C6-C3-C6為基本結(jié)構(gòu)的一類化合物[4]。吳學(xué)峰等[5]利用超高效液相色譜-四極桿-串聯(lián)飛行時間質(zhì)譜法（UPLC-Q-TOF MS）對蒸制廣佛手甲醇提取物進(jìn)行了研究，首次在佛手中發(fā)現(xiàn)了黃酮類物質(zhì)圣草次苷。目前對于黃酮類物質(zhì)的提取主要借助超聲波提取技術(shù)來完成[6]。

佛手中所含黃酮類化合物見表1。

表1 佛手中已分離鑒定的黃酮化合物

1.2 香豆素類

有研究從佛手醇提液中分離得到6, 7-二甲氧基香豆素、5, 7-二甲氧基香豆素、莨菪亭、傘形花內(nèi)酯等22個香豆素類化合物[11]。吳學(xué)峰等[5]首次從蒸制廣佛手中分離出莨菪亭。

部分佛手香豆素見表2。

表2 佛手中香豆素類化合物

1.3 多糖

李克杰[17]發(fā)現(xiàn)佛手中總多糖的含量隨儲存年限的增大而減??；廣佛手水溶性多糖由D-木糖、D-甘露糖、D-半乳糖、D-葡萄糖和L-鼠李糖組成[18]。

1.4 揮發(fā)油

佛手揮發(fā)油多采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（GCMS），GC指紋圖譜[19]，GC[20]、高效薄層色譜指紋圖譜[21]等多種技術(shù)來進(jìn)行含量測定。不同技術(shù)聯(lián)合應(yīng)用可更加全面高效地對佛手揮發(fā)油成分進(jìn)行分析研究。

研究者[22-24]采用GC-MS對佛手揮發(fā)油成分進(jìn)行分析，結(jié)果顯示佛手主要揮發(fā)油成分為D-檸檬烯、γ-松油烯等單萜烯類物質(zhì)。水蒸氣蒸餾油中醇類和醛類物質(zhì)的含量略高于壓榨油和超臨界油。

金曉玲等[25]采用超臨界流體萃取法（SFE）對干佛手和新鮮佛手進(jìn)行揮發(fā)油提取，GC-MS分析揮發(fā)油成分，發(fā)現(xiàn)新鮮佛手揮發(fā)油主成分為丁二醇；干佛手揮發(fā)油的主成分為5, 7-二甲氧基香豆素。羅朵生等[26]對生佛手和制佛手揮發(fā)油成分進(jìn)行提取，結(jié)果顯示生佛手的揮發(fā)油成分有23種，主要成分為3-羥基-2-丁酮、2, 3-丁二醇、2-乙氧基丁烷、α-蒎烯、異丙基鄰甲苯、檸檬烯等。制佛手的揮發(fā)油飽和有機(jī)化合物含量增多，不飽和有機(jī)化合物含量減少。

佛手中部分揮發(fā)油成分見表3。

表3 （續(xù)）

表3 佛手中部分揮發(fā)油成分

1.5 檸檬苦素

胡瀚文等[8]采用超高效液相色譜-四極桿-靜電場軌道阱高分辨質(zhì)譜（UPLC-Q-Orbitrap HRMS）技術(shù)對川佛手進(jìn)行化學(xué)成分分析鑒定，發(fā)現(xiàn)其中屬于檸檬苦素類的化合物有3種，分別為吳茱萸內(nèi)酯、諾米林、黃柏酮。

1.6 其他化學(xué)成分

佛手揮發(fā)油中還含核苷及堿基類化合物[8]、有機(jī)酸類化合物[5,8]、芳香醛類[8]、糖苷類[5]，在佛手化學(xué)成分中占比較少，但仍有一定的藥理活性。佛手中還有β-谷甾醇、諾米林、對羥基苯烯酸、檸檬烯琥珀酸、5, 22-豆甾烯醇及2個新環(huán)肽環(huán)[18]。目前對佛手中此類物質(zhì)的研究尚少，其具體藥理機(jī)制仍不明確，還需進(jìn)行深入。

2 藥理活性

2.1 抗炎作用

有學(xué)者發(fā)現(xiàn)檸檬烯具有抗炎作用[34-35]。日本學(xué)者發(fā)現(xiàn)佛手揮發(fā)油中的主要成分檸檬烯可抑制一種能刺激嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子的活性氧（ROS）的產(chǎn)生、核轉(zhuǎn)錄因子（NF-κB）的激活，減少單核細(xì)胞趨化蛋白（MCP-1）的產(chǎn)生。支氣管炎哮喘的發(fā)病與嗜酸性粒細(xì)胞在肺部的聚集有關(guān)[36]。因此可推測檸檬烯可阻斷支氣管炎哮喘發(fā)病。動物實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)D-檸檬烯在體內(nèi)體外均可發(fā)揮抗炎作用。D-檸檬烯還作為飲食補(bǔ)充劑發(fā)抗炎作用。佛手揮發(fā)油中另一種成分α-蒎烯同樣可通過抑制線粒體激活蛋白激酶（MAPK）和小鼠腹膜巨噬細(xì)胞中的NF-κB通路等抑制細(xì)菌脂多糖（LPS）刺激的炎癥，從而表現(xiàn)出抗炎活性[37]。

另有研究發(fā)現(xiàn)，佛手醇提液可提高嗜酸性粒細(xì)胞（EOS）及肥大細(xì)胞（MC）與白細(xì)胞的比例，具有抗炎、抗哮喘作用[38]。

2.2 抗腫瘤

近年，眾多學(xué)者發(fā)現(xiàn)，佛手具有明顯的抗腫瘤活性。馬艷芳等[39]研究發(fā)現(xiàn)佛手揮發(fā)油可抑制人乳腺癌細(xì)胞的生長。另有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)佛手揮發(fā)油中檸檬烯對于復(fù)發(fā)性原發(fā)性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤[40]、皮膚癌[41]、人惡性膠質(zhì)瘤[42-43]等具有突出治療功效。

佛手柑內(nèi)酯對人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞（U87MG）的生長具有明顯的抑制作用，它可使細(xì)胞出現(xiàn)自噬空泡，從而破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，其效果與給藥劑量呈正相關(guān)[44]。體外研究中，低濃度佛手柑內(nèi)酯能顯著抑制鼻咽癌的腫瘤干細(xì)胞特性，其原因可能與激活腫瘤細(xì)胞中Hippo信號通路相關(guān)[45]。對于人肝癌細(xì)胞，佛手柑內(nèi)酯同樣具有誘導(dǎo)其凋亡的作用[46-47]。佛手提取物對于人肝癌細(xì)胞生長具有顯著抑制效果[48]。

2.3 調(diào)節(jié)血糖

研究發(fā)現(xiàn)，結(jié)果表明，HepG2細(xì)胞與高濃度胰島素共同孵育可顯著降低葡萄糖消耗和糖原生成。佛手柑內(nèi)酯能逆轉(zhuǎn)此情形，并增加雌激素受體α（ERα）、Src、Akt、糖原合成酶激酶3β（GSK-3β）和磷脂酰肌醇3激酶p85（PI3Kp85）的p85調(diào)節(jié)亞基的磷酸化表達(dá)。根據(jù)以上結(jié)果判斷佛手柑內(nèi)酯可通過雌激素受體介導(dǎo)PI3K/Akt活化通路來提高胰島素抵抗力，這一發(fā)現(xiàn)對患有雌激素缺乏癥的患者治療II型糖尿病有重要意義[49]。

佛手提取物可通過激活G蛋白偶聯(lián)受體5（TGR5）通路來刺激胰高血糖素樣肽1的分泌，從而改善血糖代謝，對肥胖大鼠起到減肥效果[50]。

2.4 降血脂、抗動脈硬化

夏雨等[51]發(fā)現(xiàn)佛手中黃酮類、多糖等都可在體外與膽酸鹽結(jié)合，且佛手黃酮、佛手多酚的效果要好于佛手多糖。佛手提取物能上調(diào)人肝癌HepG-2細(xì)胞中過氧化物酶體增殖物激活受體α（PPARα）的表達(dá)，進(jìn)而提高膽固醇7α羥化酶的表達(dá)，從而表現(xiàn)出一定降血脂功效[52]。

龔正等[53]研究發(fā)現(xiàn)佛手黃酮類提取物可降低血清總膽固醇、丙二醛等物質(zhì)的含量，提高血清中NO含量、肝組織載脂蛋白E表達(dá)水平，從而阻斷動脈粥樣硬化進(jìn)程。佛手中槲皮素同樣具有抗動脈硬化活性[54]。

2.5 殺蟲抗螨活性

研究者采用觸殺和熏殺兩種毒理學(xué)模型評價以水蒸氣蒸餾法、壓榨法和超臨界流體萃取法提取的金佛手揮發(fā)油的除螨效果，研究結(jié)果顯示3種精油對朱砂葉螨均具有相似的致死毒性，水蒸氣蒸餾油的除螨活性最強(qiáng)。同種模式下對揮發(fā)油中D-檸檬烯、紅沒藥醇等進(jìn)行抗螨活性分析，結(jié)果表明D-檸檬烯有良好的抗螨效果，且在一定范圍內(nèi)與濃度呈正相關(guān)[23]。有研究證明金佛手精油對秀麗隱桿線蟲具有良好的殺蟲作用[55]。

2.6 抗抑郁

佛手揮發(fā)油還具有抗抑郁活性，但該方面的研究文獻(xiàn)較少。有學(xué)者推測其抗抑郁機(jī)制可能與海馬區(qū)外的γ-氨基丁酸水平增加使腎上腺酮水平降低和腎上腺皮質(zhì)軸活動減少有關(guān)[56]。蘆紅等[57]采用小鼠強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)和小鼠懸尾實(shí)驗(yàn)證明佛手水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油具有一定的抗抑郁活性。另有最新研究指出，吸入佛手揮發(fā)油可在一定程度上緩解全髖關(guān)節(jié)置換患者術(shù)后的焦慮與疼痛[58]。

2.7 抗氧化活性

體外抗氧化是佛手揮發(fā)油的重要活性之一。佛手總黃酮對羥基自由基、氧自由基、1, 1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）和2, 2’-聯(lián)氮-雙-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸（ABTS）自由基有明顯清除作用，其作用強(qiáng)弱與使用劑量具有一定關(guān)聯(lián)。加工后剩余建佛手皮渣提取多糖也具有一定的抗氧化性[59-61]。佛手揮發(fā)油經(jīng)過發(fā)酵等處理后其自由基清除能力有一定提高[62-63]。

2.8 抗菌活性

抑菌能力最強(qiáng)的佛手揮發(fā)油來源于果實(shí)，佛手枝中提取的揮發(fā)油沒有抑菌能力，佛手葉中的揮發(fā)油抗菌活性則在兩者之間。佛手提取物及主要成分對金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、銅綠假單胞菌和枯草芽孢桿菌4種常見菌種均具有優(yōu)異的抗菌活性[64]。佛手揮發(fā)油制備成納米乳后，其滅活金黃色葡萄球菌的作用顯著提高[65]。

3 總結(jié)與展望

多種研究表明，佛手中成分較為復(fù)雜，不同產(chǎn)地、不同采收期會對佛手的成分產(chǎn)生影響，對同種佛手成分的提取方法不同，成分及含量也存在較大差異。佛手有抗炎、抗腫瘤、調(diào)節(jié)血糖，調(diào)節(jié)血脂等藥理活性，目前針對佛手的成分含量與藥理作用機(jī)制的研究較淺顯，無法為佛手質(zhì)量控制提供科學(xué)依據(jù)。隨著研究逐步深入，越來越多的功效被發(fā)現(xiàn)，但現(xiàn)代研究結(jié)果與傳統(tǒng)功效并不相符?，F(xiàn)階段對其研究仍然存在較大不足與空白，宜進(jìn)一步深入研究。