孫長(zhǎng)江，曹桂蓮，錢(qián)飛，丁偉峰***

(1 南通大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院，南通 226019；南通大學(xué)附屬醫(yī)院2 醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)科，3 胃腸外科)

結(jié)直腸癌(colorectal cancer,CRC)是居惡性腫瘤第3 位的消化道腫瘤[1]。目前，CRC 的輔助診斷標(biāo)志物糖類(lèi)抗原199(carbohydrate antigen199,CA199)、癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)等[2]靈敏性和特異性不高，特別是CRC 早期；且這些基于免疫學(xué)方法的腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)價(jià)格偏高，因此，迫切需要尋找性?xún)r(jià)比更高的輔助診斷標(biāo)志物。CRC 復(fù)發(fā)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移是影響預(yù)后的主要因素，而復(fù)發(fā)與轉(zhuǎn)移很難早期發(fā)現(xiàn)，故研究CRC 預(yù)后的有效判斷指標(biāo)極具臨床應(yīng)用價(jià)值[3]。研究[4]表明，炎癥特別是慢性炎癥在CRC 等實(shí)體瘤的炎癥-癌癥進(jìn)程及CRC 轉(zhuǎn)移過(guò)程中發(fā)揮關(guān)鍵作用。惡性腫瘤患者持續(xù)性的炎癥反應(yīng)性改變常伴有外周血中性粒細(xì)胞淋巴細(xì)胞比值(neutrophil to lymphocyte ratio,NLR)、血小板淋巴細(xì)胞比值(platelet to lymphocyte ratio,PLR)、血小板計(jì)數(shù)(platelet,PLT)和乳酸脫氫酶(lactic dehydrogenase,LDH)的異常變化，可實(shí)時(shí)反映腫瘤的發(fā)生發(fā)展與轉(zhuǎn)移過(guò)程中的病理變化[5]，可用于腫瘤的診斷與預(yù)后評(píng)估。基于此，本研究擬通過(guò)研究CRC 患者NLR、PLR 及LDH檢測(cè)結(jié)果與其臨床表型的關(guān)聯(lián)特點(diǎn)，為CRC 的臨床診斷和預(yù)后判斷提供新的思路。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2010 年7 月—2015 年12 月南通大學(xué)附屬醫(yī)院胃腸外科行手術(shù)治療的2 056 例CRC 患者為對(duì)象，入組標(biāo)準(zhǔn)參照《結(jié)直腸癌診療規(guī)范2010 版》。CRC 患者年齡28～91 歲，平均(64.6±11.6)歲，術(shù)前均未進(jìn)行化學(xué)藥物治療、放射治療及靶向治療的初發(fā)病例。其中男1 260 例，年齡28～89歲，平均(64.7±11.2)歲；女796 例，年齡31～91 歲，平均(63.9±12.3)歲。另選取201 例年齡、性別匹配的健康體檢人群作為健康對(duì)照組，年齡25～76 歲，平均(57.6±10.8)歲，其中男124 例，年齡25～74 歲，平均(57.5±10.6)歲；女77 例，年齡27～76 歲，平均(57.4±11.5)歲。該研究方案經(jīng)南通大學(xué)附屬醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)(2018-K008)。

1.2 儀器與試劑 XN-2000 全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀及配套試劑購(gòu)自日本希司美康公司，Beckman Coulter AU5800 全自動(dòng)生化分析儀及配套試劑購(gòu)自美國(guó)貝克曼公司。

1.3 觀察指標(biāo) CRC 患者于術(shù)前和術(shù)后1 周采集抗凝靜脈血各2 mL，利用全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀進(jìn)行中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞及PLT 計(jì)數(shù)，并計(jì)算NLR、PLR；采集非抗凝靜脈血2 mL，利用生化分析儀檢測(cè)血清LDH 含量，作為反映腫瘤負(fù)荷的指標(biāo)。同時(shí)檢測(cè)并計(jì)算健康體檢人群NLR、PLR。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用GraphPad Prism 8.0.1 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，數(shù)據(jù)以表示，兩組之間比較采用雙尾Students′t 檢驗(yàn)，多組間比較采用單因素方差分析。受試者工作特征曲線(receiver operating characteristic curve,ROC 曲線)采用GraphPad Prism8.0.1 軟件繪制。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 術(shù)前中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)和NLR 在CRC 中的臨床價(jià)值 健康對(duì)照組中性粒細(xì)胞數(shù)為(3.407±0.164)×109/L、NLR 為1.707±0.684，CRC 患者中性粒細(xì)胞數(shù)[(3.81±0.845)×109/L]和NLR(3.05±2.504)均顯著增高(均P＜0.000 1)；以健康對(duì)照人群及CRC 患者的外周血NLR 繪制ROC 曲線，發(fā)現(xiàn)曲線下面積(area under curve,AUC)為0.71、特異性為76.29%、靈敏性為59.62%，截?cái)嘀禐?.26(圖1)。

圖1 中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)和NLR 在健康對(duì)照組及CRC 組中的表達(dá)及臨床價(jià)值

2.2 術(shù)前NLR、PLR 與CRC 患者臨床病理因素的相關(guān)性 結(jié)果發(fā)現(xiàn)NLR 的表達(dá)水平在不同腫瘤部位、分級(jí)的CRC 患者之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P＜0.05)，而在不同分期CRC 患者間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)(表1,圖2)。CRC 患者的術(shù)前NLR 與腫瘤負(fù)荷指標(biāo)LDH 呈正相關(guān)(P=0.000 2,r=0.160 1)(圖2)。

圖2 術(shù)前NLR 與CRC 分級(jí)、LDH 的相關(guān)性

表1 術(shù)前外周血NLR、PLR 與CRC 患者臨床病理因素的相關(guān)性(n=2 056,)

表1 術(shù)前外周血NLR、PLR 與CRC 患者臨床病理因素的相關(guān)性(n=2 056,)

CRC 組患者的PLR(158.2±68.5)顯著高于健康對(duì)照組(111.0±52.3)(圖3)。術(shù)前PLR 的表達(dá)水平在不同腫瘤部位、分級(jí)的CRC 患者之間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P＜0.05)，但在Ⅰ/Ⅱ期與Ⅲ/Ⅳ期CRC 患者間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)(表1,圖3)。以健康對(duì)照人群及CRC 患者的外周血PLR 繪制ROC 曲線，發(fā)現(xiàn)AUC 為0.68、特異性為77.47%、靈敏性為58.56%，截?cái)嘀禐?54.3(圖3)。

圖3 術(shù)前PLR 在CRC 中的臨床價(jià)值

2.3 CRC 患者術(shù)前與術(shù)后1 周的PLT、PLR 和NLR比較 術(shù)后1 周PLT 顯著低于術(shù)前(P＜0.05)，提示手術(shù)影響了患者的造血與免疫功能；而PLR、NLR 均顯著高于術(shù)前(均P＜0.000 1)(表2)，提示術(shù)后1 周患者處于免疫與炎癥狀態(tài)。

表2 CRC 患者術(shù)前與術(shù)后1 周PLT、PLR 和NLR 的比較(n=2 056,)

表2 CRC 患者術(shù)前與術(shù)后1 周PLT、PLR 和NLR 的比較(n=2 056,)

2.4 NLR 與PLR 聯(lián)合診斷價(jià)值 單獨(dú)NLR 和PLR的CRC 診斷效能均不夠顯著，而聯(lián)合NLR 和PLR可提高診斷效能(表3)。

表3 單獨(dú)NLR、PLR 及兩種方式聯(lián)合診斷的價(jià)值 %

3 討 論

CRC 是第三大常見(jiàn)惡性腫瘤，且近年來(lái)其發(fā)病率和死亡率均高于世界平均水平[6]。由于腫瘤標(biāo)志物出現(xiàn)在外周循環(huán)中的時(shí)間較臨床癥狀早，故選擇靈敏性及特異性高的診斷標(biāo)志物可以提高CRC 診斷效率[7]。慢性炎癥與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，持續(xù)存在的慢性炎癥可激活免疫系統(tǒng)，進(jìn)而誘導(dǎo)大量的炎癥細(xì)胞激活和趨化，在損傷器官組織的局部造成炎癥細(xì)胞聚集，并分泌和釋放各種細(xì)胞因子，參與DNA 突變誘導(dǎo)、抗凋亡、細(xì)胞周期調(diào)節(jié)、血管生成誘導(dǎo)及參與腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移過(guò)程[8]。

NLR 和PLR 是機(jī)體炎癥系統(tǒng)的敏感指標(biāo)，可反映炎癥狀態(tài)，與胰腺癌、結(jié)直腸癌等惡性腫瘤的預(yù)后顯著相關(guān)[9]。目前關(guān)于反映慢性炎癥的指標(biāo)，如NLR的研究多集中在預(yù)測(cè)惡性腫瘤的預(yù)后方面[10]。研究[11]證實(shí)，腫瘤殺傷效應(yīng)過(guò)程中淋巴細(xì)胞是最重要的細(xì)胞，在抗腫瘤免疫中發(fā)揮重要作用，淋巴細(xì)胞相對(duì)或絕對(duì)減少，可引起腫瘤的免疫逃逸而致腫瘤發(fā)生發(fā)展。中性粒細(xì)胞和PLT 較高提示較強(qiáng)的炎癥反應(yīng)，而淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)較低表明機(jī)體免疫反應(yīng)較差[5]。同時(shí)研究[12]發(fā)現(xiàn)，LDH 可調(diào)節(jié)癌癥的進(jìn)展，促進(jìn)腫瘤炎癥和血管的形成，對(duì)轉(zhuǎn)移性CRC 的無(wú)進(jìn)展生存期有預(yù)測(cè)價(jià)值。

本研究顯示，與健康對(duì)照組相比，CRC 患者外周血NLR、PLR 明顯增高，進(jìn)一步印證了中性粒細(xì)胞、PLT、淋巴細(xì)胞與CRC 的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)[9]，且NLR 與CRC 患者分級(jí)呈負(fù)相關(guān)，高分化者平均NLR較低，且CRC 患者的術(shù)前NLR 與腫瘤負(fù)荷指標(biāo)LDH呈正相關(guān)，提示NLR 與LDH 可用于判斷CRC 患者預(yù)后。NLR 與PLR 聯(lián)合檢測(cè)較兩者單獨(dú)使用時(shí)靈敏性和特異性均顯著升高。綜上所述，CRC 患者外周血NLR、PLR 均顯著升高，且與CRC 惡性度呈負(fù)相關(guān)，因此，檢測(cè)外周血NLR、PLR 及LDH 水平對(duì)CRC 的診斷和預(yù)后評(píng)估及調(diào)整治療方案有重要的臨床價(jià)值。