王勇偉 陳劍 闕曉華

宮頸癌在臨床中比較常見(jiàn)。該疾病的好發(fā)年齡段為50～55 歲女性群體。應(yīng)用行之有效的癌前篩查方式,能夠盡早發(fā)現(xiàn)宮頸癌前病變以及宮頸癌疾病。其針對(duì)于宮頸癌疾病的二級(jí)預(yù)防來(lái)講,具有相當(dāng)重要的現(xiàn)實(shí)意義。雖然說(shuō)宮頸細(xì)胞學(xué)檢查為診斷宮頸癌以及癌前病變的首選方法,但不容忽視的是,這種檢查手段會(huì)受到基層醫(yī)院病理質(zhì)量等諸多條件的限制,因而有著比較高的誤診、漏診率。宮頸細(xì)胞學(xué)陽(yáng)性人乳頭瘤病毒(HPV)分流能夠在一定程度上降低疾病的漏診率。但這種檢查所花費(fèi)用比較高,難以作為疾病普查手段。另外值得說(shuō)明的是,這種檢查方法針對(duì)于雖HPV 結(jié)果為陰性、但存在宮頸病變患者的漏診風(fēng)險(xiǎn)幾率上升。有研究表明：可以把 DNA 倍體分析用于診斷宮頸癌疾病。這種方法也能夠有效判別宮頸癌惡性程度水平和具體疾病發(fā)展?fàn)顟B(tài)。但具體而言,迄今為止針對(duì)于宮頸癌篩查的有關(guān)研究還比較少。另外相關(guān)研究也沒(méi)有把細(xì)胞DNA 倍體分析視為宮頸癌篩查的首選方式。相關(guān)研究證實(shí)［1］,DNA 倍體異常細(xì)胞數(shù)目改變情況和宮頸病變程度水平有著極大的關(guān)聯(lián)性。實(shí)施細(xì)胞DNA 倍體分析能夠以全面節(jié)約經(jīng)費(fèi)的基礎(chǔ)之上,彌補(bǔ)既往手段篩查宮頸癌前病變漏診率高的不足之處。結(jié)合實(shí)際情況,本文全面探討細(xì)胞DNA 倍體分析聯(lián)合 TCT 檢查針對(duì)于提升宮頸癌篩查準(zhǔn)確率的臨床效果,現(xiàn)作出如下匯報(bào)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2018年1月12 日～2021年6月30 日松陽(yáng)縣人民醫(yī)院內(nèi)7000 例進(jìn)行宮頸癌篩查的女性為研究對(duì)象,年齡16～90 歲,平均年齡(44.28±1.24)歲。所有受試者均接受TCT 檢查以及motic 宮頸細(xì)胞DNA 倍體分析檢查。本實(shí)驗(yàn)經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn),同意實(shí)施。相關(guān)精神符合《赫爾辛基宣言》中的有關(guān)內(nèi)容。納入標(biāo)準(zhǔn)：自愿參加相關(guān)檢查項(xiàng)目者；知情同意者；臨床資料完整者。排除標(biāo)準(zhǔn)：拒絕參加實(shí)驗(yàn)調(diào)查者；妊娠哺乳期婦女；精神疾患；臨床資料缺失者。

1.2 方法

1.2.1 宮頸DNA 倍體分析和結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn) 所有受試者取膀胱截石位接受檢查。工作人員應(yīng)用無(wú)菌棉簽插入到患者陰道內(nèi),收集宮頸分泌物。并應(yīng)用宮頸拭子在受試者的宮頸位置以順時(shí)針?lè)较蛐D(zhuǎn)共計(jì)5 圈,用于收集宮頸脫落細(xì)胞。開(kāi)展 TCT 檢查以及 DNA 倍體分析。

收集完畢宮頸脫落細(xì)胞樣本之后,將其放入到離心機(jī)內(nèi),以2000 r/min 的速度離心處理5 min,后去掉上清液以及黏液。再次懸浮下層細(xì)胞。完成上述工作以后,制備好細(xì)胞薄片。應(yīng)用福爾根染色法完成分片以及染色工作。使用DNA 倍體定量分析系統(tǒng),針對(duì)于細(xì)胞薄片開(kāi)展掃描。具體參照物為細(xì)胞薄片中正常細(xì)胞。系統(tǒng)會(huì)依照所收集到的細(xì)胞染色體分布情況、形態(tài)、局部特定特征等諸多參數(shù),自動(dòng)的對(duì)于受檢細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)以及分類。應(yīng)用DNA 指數(shù)代表細(xì)胞內(nèi)的DNA 含量水平。如果 DNA 指數(shù)在0.75～1.25,則判定為正常細(xì)胞；若DNA 指數(shù)在1.25～2.50,則判定為增生細(xì)胞或者疑似病變；如果DNA 指數(shù)＞2.50,則判定其為病變細(xì)胞。

開(kāi)展宮頸DNA 倍體分析確定宮頸癌的具體標(biāo)準(zhǔn)：①正常者：樣本細(xì)胞薄片之內(nèi)主要為正常細(xì)胞、未發(fā)現(xiàn)病變細(xì)胞,并且增生細(xì)胞以及疑似病變細(xì)胞比例＜5%；②可疑者：樣本內(nèi)共計(jì)觀察到2 個(gè)以下病變細(xì)胞,或者受試者的增生細(xì)胞以及疑似病變細(xì)胞比例達(dá)到5%～10%；③陽(yáng)性案例。

樣本內(nèi)觀察到3 個(gè)以上病變細(xì)胞,或者正常細(xì)胞以及疑似病變細(xì)胞比例＞10%。本實(shí)驗(yàn)中將可疑受試者以及正常者判定為 DNA 倍體結(jié)果陰性；針對(duì)于所有DNA 指數(shù)＞2.50 的病變細(xì)胞樣本,均指派工作年限高的病理科醫(yī)生反復(fù)性確認(rèn),如果最終認(rèn)定其確實(shí)存在病變,將該結(jié)果視為陽(yáng)性。

1.2.2 TCT 檢查和結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn) 針對(duì)于宮頸脫落細(xì)胞的TCT 結(jié)果具體判定標(biāo)準(zhǔn)為：依照最新出版的《國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)巴氏分級(jí)系統(tǒng)》完成相關(guān)判定工作。

1.3 觀察指標(biāo) 觀察宮頸DNA 倍體分析及TCT 結(jié)果,比較宮頸 DNA 倍體分析、TCT 單獨(dú)診斷與聯(lián)合診斷的敏感度與特異度。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS21.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 宮頸DNA 倍體分析及TCT 結(jié)果 在7000 例受試者中,經(jīng)活檢操作顯示：陽(yáng)性84 例,陰性6916 例；陽(yáng)性中CINⅠ42 例,CINⅡ20 例,CINⅢ22 例。DNA 倍體分析顯示：陽(yáng)性609 例,陰性6391 例。TCT 檢查顯示：陽(yáng)性543 例,陰性6457 例。陽(yáng)性中LSIL 137 例、HSIL 43 例、ASC-US 304 例、ASC-H 59 例。

2.2 宮頸 DNA 倍體分析、TCT 單獨(dú)診斷與聯(lián)合診斷的效果比較 聯(lián)合診斷的敏感度與特異度均高于DNA倍體分析、TCT 單獨(dú)診斷,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見(jiàn)表1。

表1 宮頸 DNA 倍體分析、TCT 單獨(dú)診斷與聯(lián)合診斷的效果比較(%)

3 討論

在正常情況下,人體細(xì)胞會(huì)經(jīng)過(guò)有絲分裂過(guò)程維持相對(duì)恒定的DNA 倍體含量水平,共計(jì)23 對(duì)染色體。當(dāng)細(xì)胞受到某些致癌因素影響以后,染色體的基因?qū)?huì)發(fā)生突變。就此引發(fā)染色體數(shù)目以及結(jié)構(gòu)異常,出現(xiàn) DNA 異倍體細(xì)胞［2］。從本質(zhì)上來(lái)看,癌變指的是癌細(xì)胞自身的增長(zhǎng)機(jī)制異常,擁有無(wú)限增殖能力。而染色體復(fù)制為細(xì)胞增殖本質(zhì),經(jīng)過(guò)合成核酸的方式,用以滿足細(xì)胞自身生長(zhǎng)需求,具體會(huì)表現(xiàn)為DNA 的合成速率增快,含量激增,引發(fā)DNA 大批量堆積,繼而出現(xiàn)了非整倍體細(xì)胞以及異倍體。由此能夠看出,細(xì)胞核DNA 變化能夠被視為反映腫瘤細(xì)胞增殖能力的重要生物學(xué)指標(biāo)。當(dāng)前國(guó)外已有很多應(yīng)用DNA 定量分析系統(tǒng)開(kāi)展宮頸癌和癌前病變的診斷案例。早在2005年,美國(guó)學(xué)者于權(quán)威醫(yī)學(xué)期刊中所發(fā)表的文章就明確指出：腫瘤發(fā)生的重要原因?yàn)榉钦扼w出現(xiàn),而腫瘤的出現(xiàn)則為非整倍體自我催化所產(chǎn)生的后果。當(dāng)前諸多腫瘤病理研究工作證實(shí)：腫瘤的惡性程度和細(xì)胞異位體之間存在極大關(guān)聯(lián)性。應(yīng)用細(xì)胞DNA 定量分析技術(shù)能夠有效檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的DNA 含量水平,用以分析其內(nèi)部染色體倍體改變情況［3］,可幫助醫(yī)生有效了解細(xì)胞的惡變程度。

從細(xì)胞DNA 定量分析技術(shù)的基本原理來(lái)看,這種技術(shù)能夠?qū)θ梭w細(xì)胞核內(nèi)的DNA 水平或者染色體倍數(shù)進(jìn)行預(yù)測(cè)。通過(guò)此法全面判定細(xì)胞是否發(fā)生了病理改變。其為一類病理學(xué)經(jīng)由既往形態(tài)描述朝向定量分析發(fā)展而來(lái)的產(chǎn)物［4］。在癌細(xì)胞和正常細(xì)胞增殖生長(zhǎng)過(guò)程中,細(xì)胞核中的DNA 結(jié)構(gòu)和含量都會(huì)發(fā)生一定改變［5］。在正常情況下,人類組織內(nèi)細(xì)胞染色體共計(jì)23 對(duì),其也被稱之為二倍體。將正常細(xì)胞含量視為參照物后,把需要測(cè)定的每個(gè)目標(biāo)細(xì)胞DNA 含量和正常DNA 含量加以對(duì)比,能夠取得DNA 值。倘若該值為1,則代表其屬于正常細(xì)胞；如果 DNA 值為2,則代表該細(xì)胞處于分裂期；如果 DNA 值在1～2,則代表細(xì)胞正處于染色體復(fù)制期內(nèi)。DNA 的含量水平異常上升,則代表機(jī)體存在異變可能。由此能夠看出：積極測(cè)定細(xì)胞核的DNA 含量水平,能夠被視為判斷機(jī)體細(xì)胞正常與否和癌細(xì)胞的重要指標(biāo)［6］。

隨著當(dāng)前我國(guó)醫(yī)學(xué)技術(shù)的進(jìn)展,TCT 于制片以及取材方面有了很大進(jìn)步。這也在一定程度上提升了對(duì)于宮頸癌前病變以及宮頸癌的診斷有效率［7］。但不容忽視的是,因?yàn)閺氖麻喥ぷ鞯娜藛T工作年限存在差異,進(jìn)而引發(fā)TCT 檢查結(jié)果可重復(fù)性不佳。通過(guò)該項(xiàng)檢查所出具的結(jié)果仍具有一定的假陰性和假陽(yáng)性率。對(duì)樣本實(shí)施細(xì)胞DNA 倍體定量分析測(cè)定 DNA 含量水平,能夠在極大程度上彌補(bǔ)單純TCT 檢查的不足。使用以上兩種方法完成篩查工作,能夠在極大程度上提升宮頸癌和癌前病變的診斷有效率［8,9］。

相關(guān)文獻(xiàn)指出［5］,在沒(méi)有發(fā)生病變的情況下,人體的宮頸細(xì)胞會(huì)停滯在靜止期內(nèi)。而在病理?xiàng)l件影響下,宮頸細(xì)胞會(huì)表現(xiàn)出異常增殖的現(xiàn)象［10］。其能夠在細(xì)胞核中合成,導(dǎo)致大批量核酸染色體片段丟失或者增多,出現(xiàn)基因重組的情況,就此引發(fā)細(xì)胞核中的DNA 含量改變。以此為基礎(chǔ),進(jìn)一步引起 DNA 數(shù)量改變,生成非整倍體的腫瘤細(xì)胞株。另有文獻(xiàn)表明［11,12］,宮頸DNA 倍體非正常細(xì)胞數(shù)目和CIN、宮頸癌發(fā)生發(fā)展存在極大關(guān)聯(lián)性。開(kāi)展此項(xiàng)檢查對(duì)于盡早診斷宮頸癌疾病來(lái)講意義重大。

TCT 檢查能夠令宮頸涂片的平整度更高,同時(shí)也能夠有效規(guī)避炎性碎片、宮頸黏液以及血細(xì)胞的影響,就此減少 TCT 結(jié)果的假陰性率,當(dāng)前已然被廣泛應(yīng)用于篩查宮頸病變。本實(shí)驗(yàn)內(nèi),將宮頸活組織病理學(xué)檢查結(jié)果視為診斷疾病的金標(biāo)準(zhǔn),全面分析TCT、宮頸DNA 倍體分析和兩類方法聯(lián)合檢查宮頸病變的價(jià)值,結(jié)果表明：聯(lián)合診斷的敏感度與特異度均高于DNA 倍體分析、TCT 單獨(dú)診斷,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)果表明兩類方式聯(lián)合檢查能夠在極大程度上降低疾病誤診、漏診率。

總之,應(yīng)用TCT 聯(lián)合宮頸DNA 倍體分析聯(lián)合篩查宮頸癌有著良好的價(jià)值,該法值得進(jìn)一步在臨床內(nèi)推廣以及應(yīng)用。