国产日韩欧美一区二区三区三州_亚洲少妇熟女av_久久久久亚洲av国产精品_波多野结衣网站一区二区_亚洲欧美色片在线91_国产亚洲精品精品国产优播av_日本一区二区三区波多野结衣 _久久国产av不卡

?

切花非洲菊不同外植體初代培養(yǎng)的比較研究

2022-06-08 06:17李學鈴張瑩瑩陳曉雯王麒麟錢晶晶張雪平安徽科技學院安徽合肥230041
現(xiàn)代園藝 2022年10期
關(guān)鍵詞:叢生外植體培養(yǎng)基

李學鈴,張瑩瑩,陳曉雯,王麒麟,錢晶晶,張雪平(安徽科技學院,安徽合肥 230041)

非洲菊(Gerbera jamesonii Bolus)又稱波斯花、千日菊,是一種多年生草本植物[1]。非洲菊來源于南非地區(qū),在陽光充足、通風環(huán)境下生長好,適合生長溫度為20~25℃[2]。非洲菊花大,花莖聳立,花的顏色多樣,切花率高,作為鮮切花材料,是世界各國常用的切花,盆栽或庭院栽培也深受人們的歡迎。非洲菊是一種異花授粉且自交不孕植物,幼苗不能保持母株的優(yōu)良特性,分株繁殖速度較慢,不能夠滿足市場需求。為了避免這些缺點,通過組培技術(shù),能加快非洲菊繁殖速度,從而提高經(jīng)濟效益。因此,組培技術(shù)是提高繁殖速度、滿足市場需求的有效途徑[3]。

非洲菊組培方面的研究報道,大多數(shù)以離體快繁方面的內(nèi)容為主[4];近年來,過聰[5]等用非洲菊的嫩葉誘導出愈傷組織。毛紅麗[6]于2011 年以非洲菊的芽作為外植體進行組織培養(yǎng),誘導成苗。高紹良[7]等以非洲菊的花托,通過不同激素配比培養(yǎng)基的組培試驗,誘導成苗。成晟[8]等以花托為外植體,通過組織培養(yǎng)獲得再生植株,建立了快速繁殖體系。Sina Khalili[9]等利用非洲菊離體多倍體誘導方法,對誘導的外植體進行處理,從而誘導生根。組織培養(yǎng)技術(shù)提高了繁殖速率,促進了非洲菊產(chǎn)業(yè)體系的發(fā)展[10]。本研究以非洲菊‘大雪橘’品種的莖尖、葉片和花托為外植體,探討了不同取材部位、不同激素濃度及配比的誘導比較研究,旨在為非洲菊組培快繁研究提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 不同外植體的選擇與處理

選取生長健壯的非洲菊‘大雪橘’品種的莖尖、葉片和花托為外植體,自來水沖洗3 次后,蒸餾水沖洗,然后放置超凈的工作臺上消毒;75%的酒精浸泡20 s,無菌水沖洗2 次;0.1%氯化汞溶液用力搖晃8 min,最后用無菌水沖洗4 次。莖尖留5 mm 長,葉片切為8 mm×8 mm 的小塊,花托切為5mm×5mm 的方塊,進行接種。

1.2 不同外植體的初代培養(yǎng)基

1.2.1 莖尖的叢生芽誘導培養(yǎng)。以MS 為基本培養(yǎng)基,瓊脂均為6.0 g/L,糖均為30 g/L,將莖尖接種在5 種不同培養(yǎng)基上,分別為:

表1 非洲菊叢生芽的5 種不同激素配比

接種30d 后,計算叢芽數(shù)和啟動率(出現(xiàn)叢生芽的莖尖數(shù)/接種莖尖總數(shù)),觀察叢生芽生長狀況,從以上5 種培養(yǎng)基中篩選出叢生芽誘導的最佳培養(yǎng)基。

1.2.2 葉片愈傷組織的誘導。將葉片接種在不同濃度的細胞分裂素和生長素的培養(yǎng)基上接種,其激素配比為:①6-BA 2.0 mg/L、NAA 1.0 mg/L;②6-BA 1.5 mg/L、NAA 0.5 mg/L;③6-BA 1.5 mg/L、NAA 0.2 mg/L;④6-BA 1.0 mg/L、NAA 0.5 mg/L;⑤6-BA 1.0 mg/L、NAA 0.2 mg/L;培養(yǎng)基pH 6.0,蔗糖30 g/L,瓊脂6.0 g/L。每瓶接種4 片。在5 種不同培養(yǎng)基中進行葉片促愈傷組織的培養(yǎng),接種26 d 后,統(tǒng)計愈傷率,觀察愈傷組織生長狀況,選擇最佳的培養(yǎng)基。

1.2.3 花托愈傷組織的誘導。將非洲菊花托接種在2 種不同處理的培養(yǎng)基上,以MS 為基本培養(yǎng)基,激素配比分別為A:6-BA 0.5 mg/L、NAA 0.5 mg/L;B:6-BA 0.5 mg/L、2,4-D 0.5 mg/L。培養(yǎng)基的pH 值6.0,蔗糖30 g/L,瓊脂6.0 g/L。每瓶培養(yǎng)基接種2 個。置于培養(yǎng)室內(nèi),經(jīng)過26 d 培養(yǎng),計算愈傷率,觀察愈傷組織生長狀況,確定最佳培養(yǎng)基。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

用Excel 進行數(shù)據(jù)整理和圖表繪制,用SPSS 19.0進行方差分析(ANOVA)和多重比較,檢驗差異顯著性,顯著水平均為P <0.05。

2 結(jié)果與分析

2.1 莖尖叢生芽誘導情況

由表2 可知,培養(yǎng)基中不添加NAA,可以獲得一定的叢生芽,但培養(yǎng)基中芽數(shù)較少,叢生芽生長較差(圖1)。適當添加生長素后,增殖芽的數(shù)量增加。在6-BA 濃度相同的情況下,隨著NAA 濃度的增加,增值的叢芽數(shù)降低。切花非洲菊在B 培養(yǎng)基中的啟動率分別比A、C、D、E 培養(yǎng)基中的高55.56%、55.56%、55.56%和75.02%,均差異顯著,可知叢生芽誘導階段的最適培養(yǎng)基為MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L。由圖1 可知,5 種培養(yǎng)基均能促進莖尖叢生芽的發(fā)生,但不同激素配比對芽增殖的影響不同。A 的非洲菊叢生芽生長狀態(tài)較弱,植株瘦弱矮??;B 的非洲菊幼苗色澤更健康,無枯死葉片,長勢更旺。C、D、E 的植株生長較差,幼苗色澤較黃,有枯萎和壞死的葉片,生長發(fā)育不良,成活率低。因此,MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L 是非洲菊莖尖誘導叢生芽較適合的培養(yǎng)基。

表2 不同處理對非洲菊組培叢生芽的影響

圖1 非洲菊叢生芽生長狀態(tài)

2.2 葉片的誘導培養(yǎng)效果

由圖2 可知,葉片誘導愈傷組織培養(yǎng)基配方①的愈傷率比配方⑤增高23.81%,達顯著差異;比配方②、③和④的愈傷率分別增高6.67%、11.11%和16.67%;培養(yǎng)基配方①和配方②差異較小。即MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L 和MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L 均可作為非洲菊葉片愈傷的培養(yǎng)基。結(jié)合非洲菊葉片愈傷的生長狀態(tài)圖(圖3)可知:培養(yǎng)基配方①非洲菊的愈傷量小、葉黃,生長較差,但愈傷率較高;配方②非洲菊的愈傷雖生長健壯,但褐化率較高,增殖率相對而言比配方①要低;配方③非洲菊的愈傷量較大、偏黃,生長不良;配方④非洲菊的愈傷生長瘦小,葉黃,容易產(chǎn)生褐化;配方⑤非洲菊的愈傷生長不良、葉黃。由愈傷組織生長狀況可知,6-BA 1.5 mg/L、NAA 0.5 mg/L 的激素配比對非洲菊葉片愈傷誘導效果相對較好。

圖2 不同處理對非洲菊愈傷率的影響

圖3 非洲菊愈傷增殖的狀態(tài)

2.3 花托的愈傷組織誘導情況

由表3 可知,非洲菊的花托培養(yǎng)在6-BA 濃度均為0.5 mg/L 的情況下,加入2,4-D 培養(yǎng)基的愈傷組織誘導率比加入NAA 的高23.91%,差異顯著。即MS+6-BA 0.5 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L 對非洲菊花托愈傷組織的誘導效果相對較好?;ㄍ姓T導的愈傷組織狀態(tài)圖4 所示,圖A 是在6-BA 0.5 mg/L、NAA 0.5 mg/L 激素配比上愈傷組織的生長狀態(tài),花托呈現(xiàn)繼續(xù)生長狀態(tài),表面愈傷組織疏松,顏色為白色,數(shù)量較少;圖B 愈傷組織是在MS+6-BA 0.5 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L 培養(yǎng)基上生長的狀態(tài),花托表面愈傷組織結(jié)構(gòu)較為緊密,顏色為綠色,外部組織較為疏松,顏色為乳黃色,愈傷組織量較多。即MS+6-BA 0.5 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L 誘導出的愈傷組織生長情況相對較好。

圖4 花托誘導的愈傷組織狀態(tài)

表3 不同培養(yǎng)基對非洲菊花托愈傷組織誘導的影響

3 討論

3.1 非洲菊的叢生芽誘導

從非洲菊莖尖誘導叢生芽的情況可知,在5 種不同培養(yǎng)基中,叢生芽長勢最好的培養(yǎng)基為MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L。試驗發(fā)現(xiàn),莖尖的芽基部有少量的愈傷組織能夠促進叢生芽生長。這與于非等[14]的試驗研究結(jié)果一致。非洲菊初代培養(yǎng)用莖尖作為外植體,篩選出適宜的增殖配方,可以直接獲得較多的組培苗,但是非洲菊植株叢生狀,能取用的莖尖較少。

3.2 愈傷組織誘導和增殖的影響因子

彭儒勝[15]等的試驗研究表明,不同培養(yǎng)基狀態(tài)對非洲菊愈傷組織誘導的影響不同,固體培養(yǎng)基有利于愈傷組織誘導培養(yǎng)。因此,本試驗直接采用固體培養(yǎng)基。

在葉片愈傷增殖誘導中可以看出,6-BA 2.0 mg/L、NAA 1.0 mg/L 的激素配比即細胞分裂素與生長素比例為2∶1 時,愈傷增殖率達到66.67%,但愈傷組織生長狀態(tài)不佳,在6-BA 1.5 mg/L、NAA 0.5 mg/L 的激素配比的培養(yǎng)基中,非洲菊葉片的愈傷率略低,而愈傷組織生長狀況更好,針對出現(xiàn)褐化的情況,可以在之后優(yōu)化配方的試驗中進行防褐化處理?;ㄍ杏鷤鲋痴T導的培養(yǎng)基配方中2,4-D 的效果優(yōu)于NAA,與梁俊香等[16]的研究結(jié)果一致。

非洲菊初代培養(yǎng)中,篩選出適宜的配方,葉片和花托均可誘導出量較多、生長狀態(tài)較好的愈傷組織,擬進一步比較2 種外植體的誘導效果,還需分別用誘導出的愈傷組織為外植體,比較葉片和花托誘導出的愈傷組織的分化誘導情況。

4 結(jié)語

非洲菊的組培苗初代培養(yǎng)階段,為了比較不同外植體的促生效果,對莖尖、葉片和花托3 種外植體進行了培養(yǎng)基配方對比試驗,結(jié)果表明,非洲菊莖尖誘導叢生芽的最佳激素配比為6-BA1.0 mg/L、NAA 0.05 mg/L,葉片愈傷組織誘導的最適宜培養(yǎng)基為MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L,花托愈傷誘導的最佳激素配比為6-BA 0.5 mg/L、2,4-D 0.5 mg/L,篩選出各外植體適宜的培養(yǎng)基。

猜你喜歡
叢生外植體培養(yǎng)基
反芻動物外植體的研究進展
不同水質(zhì)和培養(yǎng)基對紫金久紅草莓組培快繁的影響
疫情大考 移動辦公變局“叢生”
天梁河
春色
三種金黃色葡萄球菌選擇性分離培養(yǎng)基的檢測效果比較
生物教學中滲透壓對銀杏愈傷組織的影響研究
熱激處理對甜柿外植體活性氧代謝的影響
漫畫
安祖花的外植體選擇技術(shù)研究