季巧杰，張佳佳，李蘭蘭，王鎮(zhèn)鋒

(1.濮陽市第三人民醫(yī)院 醫(yī)學(xué)檢驗科，河南 濮陽 457000；2.洛陽市婦幼保健院 檢驗科，河南 洛陽 471000)

肺炎支原體(mycoplasma pneumonia，MP)感染為呼吸系統(tǒng)感染性疾病，發(fā)病率達(dá)10%～20%，隨病情加重可累及消化系統(tǒng)、皮膚、肝臟、血液系統(tǒng)、心肌等，威脅患兒生命健康[1]。目前，臨床認(rèn)為MP感染發(fā)生、進(jìn)展與免疫系統(tǒng)功能、炎癥反應(yīng)相關(guān)，以此為靶點(diǎn)可為MP感染診斷、治療、評估提供指導(dǎo)[2]。血小板分布寬度(platelet distribution width，PDW)為常見血小板參數(shù)，已用于多種疾病病情評估；CD40配體(CD40 ligand，CD40L)在呼吸系統(tǒng)炎癥反應(yīng)中發(fā)揮重要作用；輔助性17細(xì)胞(helper 17 cells，Th17)、調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(regulatory T cells，Treg)可維持機(jī)體內(nèi)免疫穩(wěn)態(tài)，Th17/Treg免疫失衡可能與MP感染相關(guān)[3-5]。但臨床尚缺乏關(guān)于PDW、CD40L、Th17/Treg聯(lián)合評估MP感染患兒病情轉(zhuǎn)歸的研究。鑒于此，本研究通過檢測MP感染患兒PDW、CD40L、Th17/Treg水平，分析三者水平與病情嚴(yán)重程度和預(yù)后轉(zhuǎn)歸的關(guān)系，旨在為臨床診斷、預(yù)后判斷提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料回顧性選取濮陽市第三人民醫(yī)院2019年3月至2021年10月收治的162例MP感染患兒，根據(jù)病情嚴(yán)重程度分為重癥組(96例)、輕癥組(66例)，另選取同期70例健康體檢兒童為健康組，其中重癥組男61例，女35例，年齡2～14(7.81±2.64)歲，病程5～13(9.14±1.88)d；68例伴心動過速，2例伴貧血。輕癥組男39例，女27例，年齡2～15(7.58±2.76)歲，病程6～13(9.37±1.68)d；43例伴心動過速，1例伴貧血。健康組男44例，女26例，年齡1～15(7.75±2.83)歲。3組一般資料(性別、年齡)均衡可比，重癥組與輕癥組病程、合并癥均衡可比(P>0.05)。本研究經(jīng)濮陽市第三人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會審批通過。

1.2 選取標(biāo)準(zhǔn)納入標(biāo)準(zhǔn)：患兒符合MP感染診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]；年齡<16歲；患兒及監(jiān)護(hù)人了解本研究并簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：近期存在其他感染；凝血功能異常；存在其他呼吸系統(tǒng)病變；伴有免疫功能障礙；存在變應(yīng)性疾??；呼吸道先天性畸形；存在肝、心等重要器官疾病。

1.3 血清PDW、CD40L、Th17/Treg檢測方法所有入選兒童，入組后抽取3 mL空腹靜脈血置于抗凝管，于2 h內(nèi)采用全自動血細(xì)胞分析儀(美國貝克曼庫爾特，Dx H8000)檢測PDW。采集3 mL空腹靜脈血，經(jīng)水浴(37 ℃)0.5 h后，以3 000 r·min-1離心15 min(離心半徑為10 cm)，取血清，以酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測血清CD40L水平。采集3 mL外周靜脈血，抗凝處理后加入CD127-PEmAb、CD3-FITC、CD8-APC-CY7、CD25-PE-CY7抗體各10 μL，孵育(室溫避光)20 min，溶解紅細(xì)胞后共固定50 min，加入白介素-17(IL-17)、IL-10 ALEXA647標(biāo)記抗體各10 μL，孵育50 min，PBS洗滌細(xì)胞并重懸；采用流式細(xì)胞儀(美國貝克曼庫爾特公司，F(xiàn)C-500)檢測Th17細(xì)胞、Treg細(xì)胞在CD4+T細(xì)胞中所占比率。

2 結(jié)果

2.1 3組PDW、CD40L、Th17/Treg水平對比重癥組PDW、CD40L、Th17/Treg水平均較輕癥組、健康組高，且輕癥組高于健康組(P<0.05)，見表1。

表1 3組PDW、CD40L、Th17/Treg的水平比較

2.2 不同預(yù)后的MP感染患兒PDW、CD40L、Th17/Treg水平對比162例MP感染患兒中，116例MP感染患兒預(yù)后良好，46例MP感染患兒預(yù)后不佳，預(yù)后良好MP感染患兒PDW、CD40L、Th17/Treg水平均較預(yù)后不佳患兒降低(P<0.05)，見表2。

表2 不同預(yù)后MP感染患兒PDW、CD40L、Th17/Treg的水平對比

2.3 PDW、CD40L、Th17/Treg水平對MP感染患兒預(yù)后不佳的預(yù)測價值PDW、CD40L、Th17/Treg聯(lián)合預(yù)測MP感染患兒預(yù)后不佳的敏感度、特異度高于PDW、CD40L、Th17/Treg單獨(dú)檢測(P<0.05)，見表3。

表3 PDW、CD40L、Th17/Treg水平對MP感染患兒預(yù)后不佳的預(yù)測價值

3 討論

PDW可反映血小板容積變異，反映MP感染患兒機(jī)體炎癥狀態(tài)及病情程度[7]。本文研究顯示，重癥組PDW水平較輕癥組升高，其原因在于：MP感染累及支氣管纖毛上皮，引發(fā)患兒的支氣管壁發(fā)生潰瘍、水腫，損傷肺間質(zhì)，影響肺部氧彌散，長期不愈可導(dǎo)致發(fā)生低氧血癥、高碳酸血癥等[8]。血小板活化因子受凝血酶、氧自由基作用高水平釋放，使血小板聚集于肺部炎癥局部并大量消耗，造成血小板減少，PDW升高[9]。

本研究中重癥組患兒PDW、CD40L、Th17/Treg水平均較輕癥組、健康組高，預(yù)后良好的MP感染患兒CD40L水平均較預(yù)后不佳MP感染患兒降低，提示CD40L與MP感染患兒預(yù)后聯(lián)系密切?？赡芤驗镸P感染患兒血清CD40L水平異常引發(fā)免疫系統(tǒng)障礙，肺部感染加重，進(jìn)而影響患兒預(yù)后[10]。Th17、Treg作為T細(xì)胞亞群在機(jī)體的免疫調(diào)節(jié)方面具有重要作用，Th17可釋放白介素IL-17，發(fā)揮抗病原體侵襲、抗感染功能；Treg可通過分泌IL-10發(fā)揮免疫抑制作用[11]。正常狀態(tài)下，Th17與Treg相互制約，參與自身抗原耐受，維持機(jī)體的免疫功能的動態(tài)平衡[12]。本文研究結(jié)果顯示，Th17/Treg水平與肺部感染評分呈正相關(guān)關(guān)系，其原因可能為MP感染患兒機(jī)體Th17、Treg平衡狀態(tài)被打破，免疫功能失調(diào)，進(jìn)而引發(fā)一系列癥狀[13]。本研究ROC預(yù)測結(jié)果顯示，PDW、CD40L、Th17/Treg聯(lián)合預(yù)測MP感染患兒預(yù)后不佳的敏感度、特異度均高于三者單獨(dú)檢測，提示三者聯(lián)合檢測對MP感染患兒預(yù)后評估具有更高價值，對促進(jìn)患兒病情轉(zhuǎn)歸具有積極意義。

綜上所述，MP感染患兒PDW、CD40L、Th17/Treg水平與其病情聯(lián)系密切，監(jiān)測PDW、CD40L、Th17/Treg水平變化有利于患兒病情轉(zhuǎn)歸。