周永強,廖張蓉,葉洪波,殷鑫,魏鑫,周英(貴州中醫(yī)藥大學藥學院,貴陽 550025)
紫金牛屬Ardisia植物多為小喬木,具有消炎、消腫等功效,主要用于治療跌打損傷等病癥,其所含化學成分的類型主要有皂苷類、香豆素類、苯酚類、三萜類等[1-2]。其中,長葉紐子果Ardisia virensKurz var.annamensisPitard.作為紫金科紫金牛屬常見植物,其藥用部位為干燥的根,主要分布于貴州、廣西(上思)、云南等地[3]。在民間用藥中,長葉紐子果根主要用于治療風濕、跌打損傷以及各種炎癥,然而其功效成分尚不清楚,有關(guān)其化學成分的研究鮮有報道。本課題組前期開展了長葉紐子果根70%乙醇提取物正丁醇萃取部位的化學成分研究,發(fā)現(xiàn)該萃取部位中主要成分有巖白菜素類及三萜皂苷類化合物[4]。為豐富長葉紐子果根的化學物質(zhì)基礎(chǔ),本研究對其70%乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位進行分離、純化,并對所得到的化合物進行初步體外抗炎活性評價,以期為深入開展長葉紐子果根化學成分及藥理活性研究提供科學依據(jù)。
本研究所用的主要儀器包括Bruker-400型超導(dǎo)核磁共振(NMR)光譜儀(德國Bruker公司),SEP-LC52 MWD型紫外檢測器(賽譜銳思北京科技有限公司),LC-16D半制備型高效液相色譜(HPLC)儀、RID-20A型示差折光檢測器(日本Shimadzu公司),AAPI 3200型質(zhì)譜(MS)儀(美國Sciex公司),Multiskan GO型全波長酶標儀(美國Thermo Fisher Scientific公司)等。
長葉紐子果藥材于2019年8月采自云南省昌寧縣,由貴州中醫(yī)藥大學中藥資源教研室江維克教授鑒定為紫金牛屬植物長葉紐子果A.virensKurz var.annamensisPitard.的根(標本號20190813)。地塞米松對照品(批號D4902,純度98%)購自美國Sigma公司;C18反相柱填料ODS-A-HG購自日本YMC公司;MTT溶液及葡聚糖凝膠LH-20均購自北京索萊寶科技有限公司;柱層析硅膠購自青島海洋化工廠分廠;Gibco培養(yǎng)基購自賽默飛世爾生物化學制品(北京)有限公司;甲醇為色譜純,其余試劑均為分析純,水為屈臣氏飲用水或去離子水。
小鼠單核巨噬細胞白血病細胞RAW264.7(貨號CL-0190)購自武漢普諾賽生命科技有限公司。
取干燥的長葉紐子果根15.0 kg,粉碎,過20目篩,以70%乙醇加熱回流提取2次(150 L/次),每次2 h?;厥找掖?,濃縮得浸膏3.08 kg。將浸膏加去離子水9 L分散后,依次用等體積石油醚、乙酸乙酯以及水飽和正丁醇萃取,濃縮,分別得到各萃取物浸膏155.8、546.4、813.7 g。取乙酸乙酯萃取物浸膏(244 g)進行硅膠(200~300目)柱色譜分離,以二氯甲烷-甲醇(70∶1、40∶1、15∶1、5∶1、1∶1、0∶1,V/V)進行梯度洗脫,結(jié)合薄層色譜(TLC)檢測,合并極性相同的部分后得到9個組分(A1~A9),并對A1~A4這4個組分進行進一步分離純化。其中,對A1組分進一步用ODS柱進行色譜分離,采用TLC分析,合并相同成分后共得到8個組分(Aa1-1~Aa1-8)。對Aa1-3組分進行硅膠柱色譜純化,并采用石油醚-乙酸乙酯(20∶1、10∶1、8∶1、4∶1、2∶1、1∶1、0∶1,V/V)進行梯度洗脫,最終析出無色針狀結(jié)晶,得到化合物2(3 mg)。采用ODS柱對A2組分進行色譜分離,采用TLC分析,合并相同成分后共得到10個組分(Aa2-1~Aa2-10)。組分Aa2-3經(jīng)LC-16P半制備液相(47%甲醇-水)純化后得到化合物3(3 mg);組分Aa2-7經(jīng)LC-16P半制備液相(54%甲醇-水)純化后得到化合物4(6 mg),經(jīng)LC-16P半制備液相(85%甲醇-水)純化后得到化合物1(8 mg)。采用ODS柱對A3組分進行色譜分離,采用TLC分析,合并相同成分后共得到11個組分(Aa3-1~Aa3-11)。組分Aa3-4經(jīng)LC-16P半制備液相(67%甲醇-水)純化后得到化合物9(8 mg);組分Aa3-6經(jīng)聚苯乙烯基反相樹脂填料(MCI)柱色譜分離后得到化合物10(5 mg);組分Aa3-7經(jīng)硅膠柱純化后得到化合物11(3 mg);組分Aa3-8先用ODS柱進行色譜分離,采用TLC分析,合并相同成分后共得到8個組分(Aa3-8-1~Aa3-8-8),然后再利用LC-16P半制備液相(85%甲醇)純化Aa3-8-6后得到化合物7(4 mg);組分Aa3-8-3進一步利用硅膠柱進行分離,得到化合物5(8 mg)和化合物6(4 mg);將組分A4進一步用ODS柱進行色譜分離,得到10個組分(Aa4-1~Aa4-10),其中Aa4-7經(jīng)LC-16P半制備液相(80%甲醇-水)純化后得到化合物8(7 mg)。
2.2.1 化合物1 化合物1的分子式為C30H48O4,為白色無定形粉末;電噴霧電離質(zhì)譜(ESI-MS):m/z471.3[MH]-;1H-NMR(CD3OD,400 MHz)δH:9.41(1H,d,J=1.2 Hz,H-30),0.76(3H,s,H-25),0.89(3H,s,H-29),0.97(3H,s,H-24),0.98(3H,s,H-23),1.14(3H,s,H-26),1.28(3H,s,H-27),0.71(1H,dd,J=2.6、11.3 Hz,H-5)。13C-NMR(CD3OD,100 MHz)δC:16.0(C-24),16.7(C-25),18.9(C-27),20.1(C-26),23.3(C-29),28.6(C-23),207.3(C-30),38.0(C-1),28.0(C-2),79.7(C-3),40.3(C-4),56.6(C-5),18.2(C-6),33.2(C-7),44.8(C-8),54.0(C-9),43.4(C-10),19.8(C-11),31.0(C-12),88.2(C-13),45.3(C-14),34.0(C-15),77.8(C-16),49.1(C-17),51.4(C-18),24.3(C-19),38.1(C-20),37.0(C-21),32.8(C-22),78.5(C-28)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻[5]報道的已知化合物基本一致,故鑒定化合物1為西克拉敏皂苷元A。
2.2.2 化合物2 化合物2的分子式為C29H48O,為無色針狀結(jié)晶;ESI-MS:m/z411.3[M-H]-;1H-NMR(CDCl3,400 MHz)δH:5.14(1H,d,J=8.5 Hz,H-22),5.02(1H,dd,J=8.7、15.2 Hz,H-23),0.55(3H,s,H-18),0.79(3H,d,J=2.0 Hz,H-27),0.80(3H,s,H-19),0.82~0.87(3H,m,H-29),1.03(3H,d,J=6.7 Hz,H-21),0.95(3H,d,J=7.4 Hz,H-26),3.2~3.85(1H,m,H-3),5.15~5.17(1H,m,H-7)。13C-NMR(CDCl3,100 MHz)δC:117.6.3(C-7),129.6(C-23),139.7(C-8),138.3(C-22),12.2(C-29),12.4(C-18),13.2(C-19),19.1(C-27),21.2(C-26),21.7(C-21),37.3(C-1),31.7(C-2),71.2(C-3),38.2(C-4),40.4(C-5),29.8(C-6),49.6(C-9),34.4(C-10),21.7(C-11),39.6(C-12),43.4(C-13),55.3(C-14),23.2(C-15),28.7(C-16),56.1(C-17),40.1(C-20),51.4(C-24),32.0(C-25),25.6(C-28)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻[6]報道的已知化合物基本一致,故鑒定化合物2為α-菠甾醇。
2.2.3 化合物3 化合物3的分子式為C13H22O4,無色無定形粉末;ESI-MS:m/z241.1[M - H]-;1H-NMR(CD3OD,400 MHz)δH:7.16(1H,d,J=15.8 Hz,H-7),6.18(1H,d,J=15.8 Hz,H-8),3.76(1H,m,H-3),0.96(3H,s,H-11),1.18(3H,s,H-13),1.19(3H,s,H-12),2.29(3H,s,H-10),1.57(1H,dd,J=1.8、12.8 Hz,H-2eq),1.26(1H,d,J=2.4 Hz,H-2ax),2.31(1H,dd,J=1.8、4.9 Hz,H-4eq),1.65(1H,dd,J=9.2、14.3 Hz,H-4ax)。13C-NMR(CD3OD,100 MHz)δC:133.8(C-8),145.5(C-7),200.4(C-9),20.0(C-13),25.1(C-11),28.1(C-10),29.8(C-12),64.4(C-3),36.1(C-1),47.7(C-2),41.3(C-4),68.8(C-5),70.9(C-6)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻[7]報道的已知化合物基本一致,故鑒定化合物3為(3S,5R,6S,7E)-3,5,6-trihydroxy-7-megastigmen-9-one。
2.2.4 化合物4 化合物4的分子式為C10H18O2,為白色無定形粉末;ESI-MS:m/z169.1[M-H]-;1H-NMR(CD3OD,400 MHz)δH:0.85(3H,s,H-8),0.87(3H,s,H-9),1.08(3H,s,H-10)。13C-NMR(CD3OD,100 MHz)δC:13.3(C-10),20.2(C-9),21.8(C-8),76.0(C-2),75.8(C-5),36.7(C-3),39.2(C-6),51.5(C-1),53.8(C-4),48.8(C-7)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻[8]報道的已知化合物基本一致,故鑒定化合物4為(+)-angelicoidenol。
2.2.5 化合物5 化合物5的分子式為C21H38O4,為黃色油狀物;ESI-MS:m/z353.2[M-H]-;1H-NMR(CD3OD,400 MHz)δH:4.06(1H,dd,J=6.2、11.4 Hz,H-1a),4.15(1H,dd,J=4.4、11.4 Hz,H-1b),3.55(1H,dd,J=1.8、5.5 Hz,H-3a),3.80(1H,dd,J=4.2、5.8 Hz,H-3b),5.27~5.42(4H,m,H-9′,H-10′、H-12′和 H-13′),0.89~0.93(3H,m,H-18′),1.30~1.37(8H,m,H-5′、H-6′、H-16′和H-17′),1.62(2H,t,J=7.4 Hz,H-3′),2.03~2.10(4H,m,H-8′和 H-14′),2.35(2H,t,J=7.5 Hz,H-2′),2.78(2H,t,J=6.2 Hz,H-11′)。13C-NMR(CD3OD,100 MHz)δC:130.9(C-9′),129.1(C-10′),129.0(C-12′),130.8(C-13′),175.4(C-1′),23.7(C-17′),26.1(C-16′),26.6(C-11′),28.7(C-8′和 C-14′),30.2(C-3′),30.2(C-4′),66.4(C-3),64.0(C-1),71.2(C-2),14.6(C-18′),30.3(C-5′),30.5(C-6′),30.8(C-15′),32.7(C-7′),34.8(C-2′)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻[9]報道的已知化合物基本一致,故鑒定化合物5為十八碳癸二烯酸-2,3-二羥丙基酯。
2.2.6 化合物6 化合物6的分子式為C18H30O2,為無色油狀物;ESI-MS:m/z277.2[M-H]-;1H-NMR(CD3OD,400 MHz)δH:5.26~5.42(6H,m,H-9、H-10、H-12、H-13、H-15和H-16),0.98(3H,t,J=7.6 Hz,H-18),1.27~1.41(8H,m,4×CH2),1.60(2H,t,J=7.5 Hz,H-3),2.08(4H,qd,J=1.4、7.5 Hz,H-8 和 H-17),2.28(2H,t,J=7.5 Hz,H-2),2.78~2.86(4H,m,H-11和 H-14)。13C-NMR(CD3OD,100 MHz)δC:132.8(C-9),131.2(C-10),129.3(C-12),129.3(C-13),128.8(C-15),128.3(C-16),177.8(C-1),14.8(C-18),21.6(C-17),26.5(C-14),26.5(C-8),26.6(C-11),28.3(C-3),30.3(C-7),30.4(C-6),30.4(C-5),30.8(C-4),35.1(C-2)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻[10]報道的已知化合物基本一致,故鑒定化合物6為α-亞麻酸。
2.2.7 化合物7 化合物7的分子式為C21H40O4,為白色蠟質(zhì)固體;ESI-MS:m/z355.2[M-H]-;1H-NMR(CD3OD,400 MHz)δH:5.05~5.34(2H,m,H-9′和 H-10′),0.87(3H,t,J=7.1 Hz,H-18′),1.11~1.29(20H,m,H-4′~H-7′和 H-12′~H-17′),1.52(2H,m,H-3′),1.95~2.08(4H,m,H-8′和 H-11′),4.05(2H,dd,J=4.4、11.4 Hz,H-1),2.25(2H,t,J=7.5 Hz,H-2′),3.96(1H,dd,J=6.2、11.4 Hz,H-2),3.44(1H,d,J=1.7 Hz,H-3a),3.46(1H,d,J=1.3 Hz,H-3b)。13C-NMR(CD3OD,100 MHz)δC:130.9(C-9′),130.9(C-10′),175.59(C-1′),14.4(C-18′),23.7(C-17′),26.0(C-3′),28.1(C-11′),30.2(C-4′),30.5(C-12′),30.6(C-5′),30.6(C-13′),30.8(C-6′),30.8(C-7′),28.1(C-8′),30.8(C-14′),30.8(C-15′),33.1(C-16′),34.9(C-2′),64.1(C-3),66.5(C-1),71.2(C-2)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻[11]報道的已知化合物基本一致,故鑒定化合物7為glycerol monooleate。
2.2.8 化合物8 化合物8的分子式為C28H38O4,為白色粉末;ESI-MS:m/z437.1[M-H]-;1H-NMR(CD3OD,400 MHz)δH:6.07(2H,q,J=2.2 Hz,H-2 和 H-2′),6.12(4H,t,J=2.1 Hz,H-4、H-6 和 H-4′、H-6′),5.24~5.44(4H,m,H-4″、H-5″和H-7″、H-8″),1.23~1.41(10H,m,H-2″、H-10″、H-11″、H-12″和H-13″),1.48~1.63(4H,m,H-14″和H-15″),1.94~2.16(4H,m,H-3″和H-9″),2.43(4H,q,J=7.2 Hz,H-1″和H-16″),2.77(2H,t,J=5.7 Hz,H-6″)。13C-NMR(CD3OD,100 MHz)δC:101.0(C-2),101.0(C-2′),107.0(C-4,C-6),107.0(C-4′,C-6′),146.3(C-5),146.3(C-5′),159.3(C-1,C-3),159.3(C-1′,C-3′),129.1(C-4″),130.8(C-5″),129.0(C-8″),131.0(C-7″),26.6(C-6″),28.0(C-9″),28.2(C-3″),30.3(C-10″),30.3(C-11″),30.5(C-2″),30.6(C-12″),30.7(C-13″),32.0(C-14″),30.2(C-15″),36.7(C-1″),36.7(C-16″)。經(jīng)SciFinder在線數(shù)據(jù)庫(http://scifinder.cas.org/)檢索查詢,最終確定化合物8為新天然產(chǎn)物5,5′-(4,7-hexadecadlene-1,16-diyl)bisresorcinol。
2.2.9 化合物9 化合物9的分子式為C13H18O3,為黃色固體;ESI-MS:m/z221.1[M-H]-;1H-NMR(CD3OD,400 MHz)δH:6.46(1H,t,J=2.2 Hz,H-4),6.86(2H,d,J=2.2 Hz,H-3和H-5),0.85~0.96(3H,m,H-7′),1.23~1.43(6H,m,H-4′、H-5′和 H-6′),1.66(2H,dd,J=4.2、8.2,11.1 Hz,H-3′),2.89(2H,t,J=7.3 Hz,H-2′)。13C-NMR(CD3OD,100 MHz)δC:107.4(C-4),108.8(C-2和 C-6),140.4(C-1),160.0(C-3 和 C-5),203.3(C-1′),23.6(C-6′),23.8(C-5′),25.7(C-3′),30.1(C-4′),39.6(C-2′),14.4(C-7′)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻[12]報道的已知化合物基本一致,故鑒定化合物9為1-(3,5-dihydroxyphenyl)heptan-1-one。
2.2.10 化合物10 化合物10的分子式為C13H20O2,為紫 色粉末;ESI-MS:m/z207.1[M-H]-;1H-NMR(CD3OD,400 MHz)δH:6.08(1H,t,J=2.2 Hz,H-2),6.12(2H,d,J=2.2 Hz,H-4 和 H-6),0.83~0.97(3H,m,H-13),1.22~1.40(10H,m,H-8、H-9、H-10、H-11 和H-12),2.43(2H,dd,J=6.7、8.6 Hz,H-7)。13C-NMR(CD3OD,100 MHz)δC:101.1(C-2),146.4(C-5),108.1(C-4和 C-6),159.4(C-1和 C-3),14.5(C-13),23.8(C-12),30.4(C-9 和 C-10),32.5(C-8),33.1(C-11),37.1(C-7)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻[13]報道的已知化合物基本一致,故鑒定化合物10為5-heptylresorcinol。
2.2.11 化合物11 化合物11的分子式為C15H24O2,為白色粉末;ESI-MS:m/z235.1[M-H]-;1H-NMR(CDCl3,400 MHz)δH:6.07(1H,t,J=2.2 Hz,H-2),6.12(2H,d,J=2.2 Hz,H-4 和 H-6),0.88(3H,t,J=6.7 Hz,H-9′),1.25~1.37(12H,m,H-3′、H-4′、H-5′、H-6′、H-7′和H-8′),1.53~1.60(2H,m,H-2′),2.43(2H,dd,J=6.8、8.5 Hz,H-1′)。13C-NMR(CDCl3,100 MHz)δC:100.9(C-2),107.9(C-4 和 C-6),146.3(C-5),159.3(C-1 和C-3),14.4(C-9′),23.7(C-8′),30.3(C-3′),30.4(C-4′),30.5(C-5′),30.6(C-6′),32.4(C-2′),33.1(C-7′),37.0(C-1′)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻[14]報道的已知化合物基本一致,故鑒定化合物11為5-n-nonylresorcinol。
2.3.1 溶液的制備 (1)樣品溶液:精密稱取化合物1~11各2.0 mg,溶于10%二甲基亞砜(DMSO)中,配制成質(zhì)量濃度均為1 mg/mL的母液。根據(jù)預(yù)實驗結(jié)果,用DMEM培養(yǎng)基將各化合物的母液稀釋成質(zhì)量濃度分別為80、40、20、10、5 μg/mL的樣品溶液,備用。(2)陽性對照品溶液:精密稱取地塞米松對照品2.0 mg,根據(jù)預(yù)實驗結(jié)果,用10%DMSO溶解并配制成質(zhì)量濃度為40 μg/mL的溶液,備用。
2.3.2 細胞活力的檢測 采用MTT法進行檢測。將RAW264.7細胞用完全培養(yǎng)基制成細胞密度為1×105個/mL的細胞懸液,然后按4 000個/孔的細胞密度接種于96孔板中。常規(guī)培養(yǎng)12 h后,將細胞分為空白對照組(空白培養(yǎng)基)、脂多糖組(1μg/mL脂多糖[15])、陽性對照組(1μg/mL脂多糖+40 μg/mL地塞米松)和不同質(zhì)量濃度的化合物1~11組(1 μg/mL脂多糖+80、40、20、10、5 μg/mL的化合物1~11),每組設(shè)置4個復(fù)孔;另設(shè)不加細胞只加培養(yǎng)基的調(diào)零孔。各組細胞加入藥物/空白培養(yǎng)基后,繼續(xù)培養(yǎng)24 h,然后加入10μL MTT溶液(5 mg/mL)繼續(xù)培養(yǎng)4 h,采用全波長酶標儀在450 nm波長處檢測各孔的光密度(OD)值,并計算細胞存活率:細胞存活率(%)=(OD實驗組-OD調(diào)零孔)/(OD空白對照組-OD調(diào)零孔)×100%。實驗重復(fù)3次。采用GraphPad Prism 8軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。數(shù)據(jù)以±s表示,采用單因素方差分析和Dunnett檢驗進行組間比較;檢驗水準α=0.05。結(jié)果見表1(表1中僅展示活性較好的化合物的檢測結(jié)果)。
表1 化合物2、8~10對脂多糖誘導(dǎo)RAW264.7細胞活性的影響(±s,n=4,%%)
表1 化合物2、8~10對脂多糖誘導(dǎo)RAW264.7細胞活性的影響(±s,n=4,%%)
a:與空白對照組比較,P<0.01;b:與脂多糖組比較,P<0.01;c:與脂多糖組比較,P<0.05
組別空白對照組脂多糖組陽性對照組化合物2(80 μg/mL)組化合物2(40 μg/mL組)化合物2(20 μg/mL)組化合物2(10 μg/mL)組化合物2(5 μg/mL)組化合物8(80 μg/mL)組化合物8(40 μg/mL)組化合物8(20 μg/mL)組化合物8(10 μg/mL)組細胞存活率100 165.43±14.30a 118.67±9.49b 120.34±11.12b 131.09±7.40b 145.68±6.14c 158.23±8.43 162.82±13.20 118.98±13.14b 125.30±8.33b 135.66±10.46c 149.09±13.73c組別化合物 8(5 μg/mL)組化合物 9(80 μg/mL)組化合物 9(40 μg/mL)組化合物 9(20 μg/mL)組化合物 9(10 μg/mL)組化合物 9(5 μg/mL)組化合物 10(80 μg/mL)組化合物 10(40 μg/mL)組化合物 10(20 μg/mL)組化合物 10(10 μg/mL)組化合物 10(5 μg/mL)組細胞存活率156.99±14.87 118.18±10.94b 122.35±11.54b 130.25±8.70b 142.45±9.47c 150.41±9.74c 117.17±13.28b 119.18±8.51b 125.48±7.82b 137.24±7.05c 147.42±10.85c
由表1可知,與空白對照組比較,脂多糖組細胞的存活率顯著升高(P<0.01);與脂多糖組比較,除化合物2的10、5 μg/mL組和化合物8的5 μg/mL組細胞的存活率下降不顯著外(P>0.05),化合物2、8、9、10其余劑量組細胞存活率均顯著下降(P<0.05或P<0.01)。
紫金牛屬植物種類繁多且多具有藥用價值,是民間常用藥。目前,該屬植物化學成分研究比較多的為朱砂根,從中發(fā)現(xiàn)種類最多的成分為朱砂根皂苷類化合物[16]。已有研究對紐子果的化學成分進行了研究,從中發(fā)現(xiàn)了苯酚類化合物[12]。然而有關(guān)紐子果的變種長葉紐子果的化學成分及藥理活性研究卻鮮有報道。
研究表明,紫金牛屬藥用植物中所含的化學成分具有多種藥理活性:巖白菜素可抑制白細胞介素1β、腫瘤壞死因子α等炎癥因子的產(chǎn)生,具有一定的止痛、抗炎活性[17];醌類成分可通過抑制血管生成而發(fā)揮抗關(guān)節(jié)炎作用[18]。本研究從長葉紐子果根70%乙醇提取物乙酸乙酯萃取部位中共分離、鑒定出了11個化合物,包括4個酚類化合物(化合物8~11)、1個三萜類化合物(化合物2)、1個單萜醇類化合物(化合物4)、1個甾體類化合物(化合物1)、2個脂肪酸酯類化合物(化合物5、7)、1個脂肪酸類化合物(化合物6)和1個其他類化合物(化合物3)。且化合物1~11均首次從該植物中分離得到,其中化合物8為新天然產(chǎn)物。據(jù)已有研究報道,酚類化合物具有抗菌、抗氧化活性[12,19],三萜類化合物具有抗腫瘤活性[6],甾體類具有抗炎活性[7]。本研究以脂多糖誘導(dǎo)建立RAW264.7炎癥細胞模型,對分離、鑒定出的11個化合物進行了體外抗炎活性評價。結(jié)果發(fā)現(xiàn),化合物2、8~10具有較好的抗炎活性。
綜上,本研究從長葉紐子果根70%乙醇提取物乙酸乙酯萃取部位中共分離、鑒定出11個化合物,且主要以酚類化合物為主。其中,化合物8為新天然產(chǎn)物;化合物2、8~10均有一定抗炎活性。