陳文玉

5個(gè)真菌菌株對(duì)桐花樹毛顎小卷蛾幼蟲的生防試驗(yàn)

陳文玉

（福建省泉州森林公園服務(wù)中心，福建 泉州 362000）

【目的】研究旨在篩選出感染桐花樹毛顎小卷蛾幼蟲的高致病力菌株，為防治該蟲提供新的生物資源?！痉椒ā坷?株金龜子綠僵菌和3株球孢白僵通過(guò)孢子懸浮液浸漬法篩選高致病力菌株，林間采用人工投放真菌粉炮進(jìn)行防治。【結(jié)果】獲得對(duì)毛顎小卷蛾幼蟲致病力高的金龜子綠僵菌MaZPTR-01-01和MaFZ-12，其感染毛顎小卷蛾幼蟲后的校正死亡率分別為100%和94.5%，僵蟲率為91.7%和86.7%，致死中時(shí)（LT50）分別為1.52 d、3.04 d。對(duì)綠僵菌MaZPTR-01-01粉炮和白僵菌BbFZ-48粉炮進(jìn)行林間毛顎小卷蛾幼蟲的生防測(cè)試，施藥3 d后的校正防效分別為20.44%、6.51%，7 d后分別為29.74%、30.26%?！疽饬x】比較了金龜子綠僵菌和球孢白僵菌對(duì)桐花樹毛顎小卷蛾幼蟲的防治效果，對(duì)其在生物防治應(yīng)用上具有很好的參考價(jià)值。

桐花樹毛顎小卷蛾；幼蟲；綠僵菌；白僵菌；死亡率；生物防治

【研究意義】紅樹林生長(zhǎng)于海洋與陸地的動(dòng)態(tài)交界面，特殊的生長(zhǎng)環(huán)境賦予其獨(dú)特而強(qiáng)大的生態(tài)功能[1]。紅樹林還是當(dāng)今海岸濕地生態(tài)系統(tǒng)唯一的木本植物，具有造陸、護(hù)岸、護(hù)堤等功能，并能有效凈化海水，保護(hù)海洋生態(tài)系統(tǒng)，具有巨大的社會(huì)、生態(tài)和經(jīng)濟(jì)效益[2]。由于紅樹林濕地生態(tài)環(huán)境的衰退和人為破壞日益嚴(yán)重，局部地區(qū)正遭受各種害蟲的為害，威脅整個(gè)紅樹林生態(tài)系統(tǒng)的維持和發(fā)展[3]。桐花樹是福建省泉州灣河口濕地紅樹林生態(tài)系統(tǒng)中的前緣先鋒物種，近年來(lái)毛顎小卷蛾害蟲危害嚴(yán)重，其幼蟲卷葉取食葉肉和新梢，常導(dǎo)致林分連片枯黃，使紅樹林群落的正常生長(zhǎng)和繁衍受到嚴(yán)重影響[4-7]。【前人研究進(jìn)展】對(duì)于紅樹林害蟲的綜合治理，前人提出可通過(guò)營(yíng)林、物理、生物、化學(xué)等多種綜合治理措施控制害蟲大面積的發(fā)生[8-10]，但鮮見利用真菌開展毛顎小卷蛾生防試驗(yàn)的報(bào)道。【本研究切入點(diǎn)】通過(guò)對(duì)2株金龜子綠僵菌和3株球孢白僵室內(nèi)毒力測(cè)定，篩選出對(duì)毛顎小卷蛾具有較高致病力的菌株開展林間生防試驗(yàn)?！緮M解決的關(guān)鍵問(wèn)題】為生產(chǎn)上應(yīng)用生防真菌控制毛顎小卷蛾危害，減少化學(xué)藥劑使用和保護(hù)濕地生態(tài)系統(tǒng)提供參考。

1　材料與方法

1.1　生防真菌對(duì)毛顎小卷蛾的致病力測(cè)定

1.1.1供試蟲源和生防真菌菌株于2018年9月中旬毛顎小卷蛾危害期，采集有毛顎小卷蛾危害狀的桐花樹枝梢?guī)Щ厥覂?nèi)，挑選3齡左右幼蟲置于養(yǎng)蟲盒中飼養(yǎng)作為供試蟲源。供試菌株5株，分別為3株球孢白僵菌和2株金龜子綠僵菌（表1），菌株均保存于福建省林業(yè)科學(xué)研究院森林保護(hù)研究所。試驗(yàn)前將菌株轉(zhuǎn)入SDY液體培養(yǎng)基中，（25±1）℃振蕩培養(yǎng)72 h，再轉(zhuǎn)入PDA平板培養(yǎng)7～9 d，待產(chǎn)孢充分后保存?zhèn)溆?。供試菌株的孢子萌發(fā)率均在95%以上。

表1　供試生防真菌菌株來(lái)源

1.1.2不同菌株的致病力測(cè)定各菌株從平板上刮取一定量孢子，置于滅菌的0.03%吐溫-80 溶液中，均配制成107孢子/mL的孢懸液；將毛顎小卷蛾幼蟲小心取出，在孢懸液中浸漬10 s，然后置于無(wú)菌培養(yǎng)皿中并放入新鮮的桐花樹葉片，每個(gè)菌株處理20 頭毛顎小卷蛾幼蟲，重復(fù)3次；以浸漬0.03%吐溫-80 無(wú)菌水溶液處理作為對(duì)照。試驗(yàn)條件為室溫，溫度變幅為22～30 ℃，每天換新鮮葉片，觀察記載幼蟲死亡情況，死蟲保濕培養(yǎng)觀察菌絲生長(zhǎng)和產(chǎn)孢情況，若蟲尸上長(zhǎng)出肉眼可見的菌絲及孢子則計(jì)為被感染（僵蟲），統(tǒng)計(jì)死亡率及僵蟲率。毛顎小卷蛾幼蟲期為13～17 d，試蟲為3齡左右幼蟲，因此觀察期定為10 d，試驗(yàn)過(guò)程中化蛹的幼蟲不計(jì)入。試驗(yàn)在2018年9月16—25日進(jìn)行。

1.1.3致病力測(cè)定數(shù)據(jù)處理試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用DPS數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。采用死亡率—時(shí)間機(jī)率值分析法，以時(shí)間（）的對(duì)數(shù)值為，將死亡率轉(zhuǎn)換為機(jī)率值，并以機(jī)率值為，模擬致病力回歸方程并計(jì)算致死中時(shí)（LT50）[11]。

死亡率＝死亡蟲數(shù)／試蟲數(shù)×100%（1）

校正死亡率＝[（處理組死亡率-對(duì)照組死亡率）／（1-對(duì)照組死亡率）]×100%（2）

僵蟲率＝感染蟲數(shù)／試蟲數(shù)×100%（3）

1.2　生防真菌林間防治試驗(yàn)

1.2.1生防真菌來(lái)源綠僵菌粉炮由福建省林科院森林保護(hù)研究所提供，菌株號(hào)MaZPTR-01-01，含孢量80億孢子/g，每個(gè)粉炮125 g。白僵菌粉炮由南安市林業(yè)局白僵菌廠生產(chǎn)，菌株號(hào)BbFZ-48，含孢量100億孢子/g，每個(gè)粉炮125 g。

1.2.2試驗(yàn)地概況及防治方法研究地設(shè)在福建泉州灣洛陽(yáng)江東岸以桐花樹、秋茄為主的紅樹林區(qū)域，屬海洋性季風(fēng)氣候，多年平均氣溫為20.4 ℃，年均降水量為1 095.4 mm，年均相對(duì)濕度為78%。該區(qū)域桐花樹常年受毛顎小卷蛾害蟲危害明顯，嚴(yán)重時(shí)造成大面積桐花樹葉片枯黃脫落，顯著影響紅樹林生長(zhǎng)和景觀。試驗(yàn)設(shè)計(jì)1～6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)地，標(biāo)準(zhǔn)地面積0.2 hm2，其中1～3號(hào)用白僵菌防治，4～6號(hào)用綠僵菌防治。另設(shè)對(duì)照樣地(CK)。2019年5月8—9日，采用人工放粉炮法，選擇微風(fēng)時(shí)段，點(diǎn)燃生防真菌粉炮后，適時(shí)將菌炮拋出紅樹林樹冠上方，使菌炮在樹木上方約5～6 m爆炸，使孢子彌漫到樹林中，遇到標(biāo)靶害蟲后進(jìn)行侵染，致使被侵染害蟲死亡，以達(dá)到防治的目的。在每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)地施放白僵菌或綠僵菌粉炮9個(gè)。

1.2.3防治效果調(diào)查和數(shù)據(jù)處理施放生防真菌粉炮3、7 d后，每塊樣地分別隨機(jī)采集100枝桐花樹梢，統(tǒng)計(jì)枝梢上的活蟲及死蟲數(shù)量。試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用DPS數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

死亡率＝死蟲數(shù)量／（活蟲數(shù)量+死蟲數(shù)量）×100%（4）

校正防效＝[（藥劑處理組死亡率-對(duì)照組死亡率）／（1-對(duì)照組死亡率）]×100%（5）

2　結(jié)果與分析

2.1　不同生防真菌對(duì)毛顎小卷蛾的室內(nèi)致病力

從5個(gè)不同菌株對(duì)毛顎小卷蛾幼蟲的致死情況（表2）可以看出，不同菌株1×107個(gè)/mL孢子懸浮液浸漬處理的毛顎小卷蛾幼蟲，死亡率隨時(shí)間的增加而逐漸增高，且差異極顯著。綠僵菌MaZPTR-01-01和MaFZ-12等2個(gè)菌株感染毛顎小卷蛾幼蟲的死亡速度較快，3 d后的死亡率分別達(dá)到98.33%和56.67%，與其他處理差異極顯著；感染5 d后，綠僵菌MaZPTR-01-01處理的毛顎小卷蛾幼蟲死亡率達(dá)100%，與其他處理差異極顯著，MaFZ-12處理的死亡率也達(dá)到80.00%并在7 d后達(dá)到95.00%。白僵菌致死效果相對(duì)綠僵菌較差，感染9 d后，3個(gè)白僵菌菌株中BbFZ-48處理的毛顎小卷蛾幼蟲死亡率最高，達(dá)到83.33%，且與其他2個(gè)白僵菌菌株差異極顯著。由此可見，在5個(gè)真菌菌株中，綠僵菌菌株MaZPTR-01-01、MaFZ-12和白僵菌BbFZ-48對(duì)毛顎小卷蛾幼蟲具有較高的致病力。

表2　不同菌株1×107個(gè)/mL孢子懸浮液浸漬法感染毛顎小卷蛾幼蟲的死亡率

Duncan’s多重比較，同列數(shù)據(jù)后標(biāo)不同小寫字母者表示差異顯著（0.05），標(biāo)不同大寫字母者表示差異極顯著（0.01）。

經(jīng)檢驗(yàn)，不同菌株致病力回歸方程擬合程度顯著水平均大于0.05，表明所求回歸方程合適，各方程相關(guān)系數(shù)均高于0.9。表3可知，綠僵菌菌株MaZPTR-01-01、MaFZ-12和白僵菌BbFZ-48等3個(gè)菌株對(duì)毛顎小卷蛾幼蟲感染效果良好，LT50都在5 d以內(nèi)，校正死亡率均超過(guò)82%，僵蟲率在83%以上，與其他處理差異極顯著，其中綠僵菌MaZPTR-01-01效果最佳，LT50、校正死亡率和僵蟲率分別為1.52 d、100.00%和91.7%?？傮w上看來(lái)，綠僵菌對(duì)毛顎小卷蛾幼蟲的室內(nèi)感染效果優(yōu)于白僵菌，校正死亡率在94%以上，僵蟲率超過(guò)86%，且致死中時(shí)更短。

表3　不同菌株對(duì)毛顎小卷蛾幼蟲的致病力

同列數(shù)據(jù)后標(biāo)不同小寫字母者表示差異顯著（0.05），標(biāo)不同大寫字母者表示差異極顯著（0.01）。

2.2　林間應(yīng)用生防真菌防治毛顎小卷蛾效果

林間應(yīng)用高致病力綠僵菌MaZPTR-01-01粉炮和白僵菌BbFZ-48粉炮防治毛顎小卷蛾幼蟲，防治效果詳見表4、表5。綠僵菌林間防治毛顎小卷蛾幼蟲3 d后，3個(gè)樣地校正防效分別為17.58%、20.67%和23.08%，校正平均防效20.44%；7 d后3個(gè)樣地分別為28.89%、28.89%和31.43%，平均防效為29.74%。白僵菌林間防治毛顎小卷蛾幼蟲3 d后，3個(gè)樣地校正防效分別為5.59%、6.25%和7.69%，平均防效為6.51%；7 d后3個(gè)樣地分別為33.33%、25.33%和32.12%，平均防效為30.26%。由此表明，林間應(yīng)用這2種生防真菌防治毛顎小卷蛾可以取得一定的防治效果。生防真菌室內(nèi)、外防治效果的差異，可能與紅樹林特殊的生境及毛顎小卷蛾卷葉危害習(xí)性有關(guān)：一方面，氣候原因以及海水漲退潮，使得散落在桐花樹葉表面的孢子易被沖走，另一方面，由于毛顎小卷蛾卷葉危害，對(duì)孢子接觸蟲體造成一定阻礙，兩方面均會(huì)對(duì)林間防治效果產(chǎn)生一定的影響。

表4　綠僵菌MaZPTR-01-01林間防治毛顎小卷蛾效果

表5　白僵菌BbFZ-48林間防治毛顎小卷蛾效果

3　結(jié)論與討論

蟲生真菌制劑防治害蟲因具有安全、無(wú)污染、不易形成抗性等優(yōu)點(diǎn)，成為備受關(guān)注的防治手段[12]。平沙綠僵菌NJMP2103和球孢白僵菌NJBb2101對(duì)褐飛虱[13]、白僵菌BbAX-02和BbAX-04菌株對(duì)馬尾松毛蟲[14]，均具有較大的應(yīng)用潛力。本研究表明，綠僵菌菌株MaZPTR-01-01、MaFZ-12和白僵菌菌株BbFZ-48對(duì)毛顎小卷蛾幼蟲具有較高的致病力，致死中時(shí)LT50分別為1.52，3.04，4.77 d，致死率高，校正死亡率分別為100%、94.5%和82.4%，僵蟲率分別達(dá)到91.7%、86.7%和83.3%，其中綠僵菌MaZPTR-01-01效果最佳。綠僵菌菌株MaZPTR-01-01粉炮和白僵菌菌株BbFZ-48粉炮林間防治毛顎小卷蛾幼蟲3 d后校正防效分別為20.44%和6.51%，7 d后校正防效分別為29.74%和30.26%。由此說(shuō)明綠僵菌MaZPTR-01-01粉炮和白僵菌BbFZ-48在毛顎小卷蛾害蟲控制上具有較大的潛力。

毛顎小卷蛾有多種天敵，如腫腿蜂、絨繭蜂、赤眼蜂等寄生蜂，自然感染的白僵菌或綠僵菌，還有捕食性天敵如螞蟻、鳥類等[14]。應(yīng)用生防真菌林間防治桐花樹毛顎小卷蛾7 d后防治效果雖然不是很高，但與同樣防治幼蟲的各種化學(xué)農(nóng)藥相比，綠僵菌、白僵菌防治具有重復(fù)感染、擴(kuò)散蔓延的顯著優(yōu)點(diǎn)，同時(shí)使用靈活輕便、防治成本較低，而且對(duì)環(huán)境友好，對(duì)人畜無(wú)害。生產(chǎn)上一方面要采取適合的施菌方式，讓菌粉在林間均勻地分布，使之與害蟲最大限度地接觸以提高防治成效；另一方面要利用遠(yuǎn)程監(jiān)控、遙感監(jiān)測(cè)，結(jié)合人工監(jiān)測(cè)，準(zhǔn)確掌握害蟲的發(fā)生區(qū)域和發(fā)育期，選擇在害蟲低齡期間，結(jié)合氣候條件、海水漲退潮等因素，并根據(jù)蟲口密度大小，堅(jiān)持以生物防治為主，有效調(diào)控紅樹植物-害蟲-天敵三者相互關(guān)系，努力實(shí)現(xiàn)害蟲的生態(tài)控制。

[1] 生農(nóng), 辛琨, 廖寶文. 紅樹林濕地生態(tài)功能及其價(jià)值研究文獻(xiàn)學(xué)分析[J]. 濕地科學(xué)與管理, 2021, 17(1): 47-50.

[2] 林鵬. 中國(guó)紅樹林生態(tài)[M]. 北京: 科學(xué)出版社, 1997.

[3] 王伯蓀, 廖寶文, 王勇軍, 等. 深圳灣紅樹林生態(tài)系統(tǒng)及其持續(xù)發(fā)展[M]. 北京: 科學(xué)出版社, 2002: 277-288.

[4] 丁珌, 黃金水, 吳壽德, 等. 桐花樹毛顎小卷蛾生物學(xué)特性及發(fā)生規(guī)律[J]. 林業(yè)科學(xué), 2004, 40(6): 197-200.

[5] 陳文玉. 桐花樹毛顎小卷蛾幼蟲空間分布型及抽樣技術(shù)[J]. 防護(hù)林科技, 2019(10): 16-19.

[6] 李德偉, 吳耀軍, 羅基同, 等. 廣西北部灣桐花樹毛顎小卷蛾生物學(xué)特性及防治[J]. 中國(guó)森林病蟲, 2010, 29(2): 11-14.

[7] 葉思敏, 鐘景輝, 陳金章, 等. 桐花樹毛顎小卷蛾生活史及食性初步研究[J]. 生物災(zāi)害科學(xué), 2015, 38(2): 125-128.

[8] 蔡守平, 何學(xué)友, 曾麗瓊, 等. 白僵菌和綠僵菌不同菌株對(duì)馬尾松毛蟲的致病力[J]. 福建林業(yè)科技, 2018, 45(4): 1-4.

[9] 王林聰, 李志剛, 李軍, 等. 不同波長(zhǎng)誘蟲燈對(duì)紅樹林主要害蟲的誘集作用[J]. 環(huán)境昆蟲學(xué)報(bào), 2016, 38(5): 1028-1031.

[10] 韋江玲, 劉文愛(ài), 黃琦, 等. 廣西山口紅樹林保護(hù)區(qū)近15 a主要蟲害調(diào)查[J]. 福建林業(yè)科技, 2019, 46(4): 66-69.

[11] 王四寶, 黃勇平, 張心團(tuán), 等. 松褐天牛成蟲高毒力病原菌篩選及林間感染試驗(yàn)[J]. 中國(guó)森林病蟲, 2004, 23(6): 13-16.

[12] 馬竹炘. 黃曲條跳甲生防真菌篩選與分生孢子油劑研制[D]. 廣州: 華南農(nóng)業(yè)大學(xué), 2018.

[13] 褚夫華. 褐飛虱生防真菌平沙綠僵菌和球孢白僵菌的篩選與評(píng)價(jià)[D]. 南京: 南京農(nóng)業(yè)大學(xué), 2018.

[14] 楊盛昌, 彭建, 薛云紅, 等. 中國(guó)紅樹林的害蟲種類及其綜合防治[J]. 中國(guó)森林病蟲, 2020, 39(1): 32-41.

Biocontrol Experiments of 5 Fungus Strains Against Larvae of

CHEN Wenyu

（Service Center of Quanzhou Forest Park, Quanzhou, Fujian 362000, China）

This study aims to screen out high pathogenicity strains against larvae of, and provide strain resources for the biological control of this insect.The virulence of two strains ofand three strains ofwere tested by dipping larvae with spore suspensions in the laboratory, placing the powder in the field.The strains MaZPTR-01-01 and MaFZ-12 ofhad high pathogenicity to the larvae ofwith the corrected mortality rate of 100% and 94.5%, cadaver rate of 91.7% and 86.7%, after inoculation, and the LT50value were 1.52 d and 3.04 d, respectively. The corrected control effects were respectively 20.44% and 6.51% after 3 days, and 29.74% and 30.26% after 7 days, with the powder of the strain MaZPTR-01-01 ofand the strain BbFZ-48 ofThis study compared the control effect ofandagainst the larvae of, showing a great reference value in biological control.

; larva;;; mortality; biological control

S763.7

A

2095-3704（2022）03-0330-05

陳文玉. 5個(gè)真菌菌株對(duì)桐花樹毛顎小卷蛾幼蟲的生防試驗(yàn)[J]. 生物災(zāi)害科學(xué), 2022, 45(3): 330-334.

10.3969/j.issn.2095-3704.2022.03.54

2022-06-04

2022-06-15

中央財(cái)政林業(yè)科技推廣示范項(xiàng)目（閩[2022]TG05）和福建省林業(yè)科學(xué)研究項(xiàng)目（閩林科[2016]3號(hào)，閩林科[2017]3號(hào)）

陳文玉（1974—），女，高級(jí)工程師，主要從事森林景觀培育和保護(hù)工作，wychen888@163.com。