周 青 劉帥妹 張瑞金 李孟蘭 林 寧 封 婕 吳玉璘

江蘇省衛(wèi)生健康發(fā)展研究中心，國(guó)家衛(wèi)生健康委計(jì)劃生育藥具不良反應(yīng)監(jiān)測(cè)中心(南京，210036)

妊娠期糖尿病(GDM)嚴(yán)重影響母嬰健康，造成不良妊娠結(jié)局[1-2]。雖然，GDM的發(fā)病機(jī)制尚不清楚，但遺傳因素和環(huán)境的互相作用都有利于GDM的發(fā)生。在全球范圍內(nèi)9.8%～25.5%的孕婦患GDM，孕前肥胖、孕期體重增加過(guò)多、糖尿病家族史和高齡可能在GDM的發(fā)生和發(fā)展中起重要作用。脂肪量和肥胖相關(guān)基因(FTO)位于染色體16q12.2，長(zhǎng)度為430kb，其編碼蛋白屬于2-氧戊二酸依賴(lài)性核酸脫甲基酶，維持能量代謝平衡[3-4]。FTO基因是攝食行為的關(guān)鍵介質(zhì)，且與抗動(dòng)脈粥硬化、抗高血糖、抗炎脂肪因子和血清脂聯(lián)素水平顯著相關(guān)[5-6]。脂聯(lián)素(APN)在機(jī)體的脂質(zhì)代謝以及血糖穩(wěn)定中起著重要的調(diào)節(jié)作用，能夠增強(qiáng)胰島素敏感性和胰島素分泌，參與胰島素抵抗發(fā)生的全過(guò)程[7]。FTO基因多態(tài)性發(fā)生，影響孕婦體內(nèi)脂聯(lián)素水平，從而導(dǎo)致GDM發(fā)生。目前FTO基因(rs9939609和rs8050136)多態(tài)性與GDM之間的關(guān)系的研究結(jié)果存在爭(zhēng)議。因此，為了全面評(píng)估FTO基因多態(tài)性與GDM之間的關(guān)系，基于之前數(shù)據(jù)采用meta分析方法，評(píng)估兩者的關(guān)系。

1 資料和方法

1.1 文獻(xiàn)檢索

在EMBASE、 Pubmed、 Web of science、CBM、萬(wàn)方和中國(guó)知網(wǎng)等數(shù)據(jù)庫(kù)檢索FTO基因多態(tài)性與GDM之間關(guān)系的病例對(duì)照研究，截止時(shí)間至2021年10月。檢索中文關(guān)鍵詞“脂肪量和肥胖相關(guān)基因” “FTO” “rs9939609” “rs8050136” “基因多態(tài)性”和“妊娠期糖尿病(GDM)”；英文檢索關(guān)鍵詞“Fat mass and obesity” “FTO” “rs9939609” “rs8050136” “gene polymorphisms” “gestational diabetes mellitus”和“GDM”。同時(shí)閱讀納入文獻(xiàn)的參考文獻(xiàn)進(jìn)行追溯，使得文獻(xiàn)能夠盡可能全面。文獻(xiàn)語(yǔ)種限為中文和英文。

1.2 納入和排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn):①關(guān)于FTO基因多態(tài)性與GDM之間關(guān)系的病例對(duì)照研究；②研究中包含F(xiàn)TO基因rs9939609和rs8050136多態(tài)位點(diǎn)，且可計(jì)算或包含各基因型在觀察組和對(duì)照組的分布頻數(shù)；③研究的類(lèi)型為病例對(duì)照研究，對(duì)照組納入對(duì)象是健康孕婦，觀察組納入對(duì)象是GDM患者。排除標(biāo)準(zhǔn)：①數(shù)據(jù)重復(fù)或NOS<5分文獻(xiàn)；②非中英文病例對(duì)照研究；③對(duì)照組基因型分布不符合哈迪溫伯格平衡定律，且影響meta分析結(jié)果的穩(wěn)定性。

1.3 文獻(xiàn)質(zhì)量評(píng)價(jià)

采用NOS量表對(duì)納入文獻(xiàn)的研究質(zhì)量進(jìn)行評(píng)價(jià)，根據(jù)病例組與對(duì)照組的可比性、病例的選擇和暴露程度，NOS≥5分為高質(zhì)量文獻(xiàn)[8]。

1.4 資料提取

兩位研究人員分別在數(shù)據(jù)庫(kù)檢索相關(guān)文獻(xiàn)，并根據(jù)納入和排除標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行文獻(xiàn)篩選，設(shè)計(jì)資料提取表格，內(nèi)容包括發(fā)表時(shí)間、國(guó)家、基因分型的方法、第一作者、種族、觀察組和對(duì)照組樣本量、基因型分布在觀察組和對(duì)照組中的具體頻數(shù)、對(duì)照組基因型分布Hardy-Weinberg平衡的P值和文獻(xiàn)質(zhì)量評(píng)價(jià)NOS得分。意見(jiàn)若有分歧可進(jìn)行討論或咨詢(xún)第三位研究者。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

本研究采用State軟件計(jì)算比值比(OR)和95%可信度區(qū)間(95%CI)，評(píng)估FTO基因多態(tài)性與GDM之間的關(guān)系。采用Q檢驗(yàn)合并I2定量評(píng)估納入文獻(xiàn)的異質(zhì)性，若I2<50%，說(shuō)明不存在異質(zhì)性，采用固定效應(yīng)模型計(jì)算合并效應(yīng)量，否則采用隨機(jī)效應(yīng)模型，并根據(jù)基因分型方法(RT-PCR，Taq-Man，其他包括熒光定量PCR、HRM和基因測(cè)序)和觀察組樣本量大小(n>150和n<150)進(jìn)行亞組分析，尋找異質(zhì)性來(lái)源[9]。采用敏感性分析檢測(cè)meta分析結(jié)果穩(wěn)定情況。最后，采用egger’s線(xiàn)性回歸檢驗(yàn)和begg’s漏斗圖檢測(cè)發(fā)表偏倚情況，若P>0.05，表明無(wú)發(fā)表偏倚[10]。

2 結(jié)果

2.1 文獻(xiàn)檢索

通過(guò)關(guān)鍵詞初步搜索到文獻(xiàn)共20篇。根據(jù)納入和排除標(biāo)準(zhǔn)，剔除3篇meta分析，3篇不包含F(xiàn)TO基因rs9939609和rs8050136位點(diǎn)，2篇缺少具體基因分型數(shù)據(jù)，1篇數(shù)據(jù)重復(fù)發(fā)表，最終納入11篇文獻(xiàn)[11-21]。研究發(fā)表于2009—2020年。除肖玲等[11]和Cho等[21]研究人群是亞洲人，其余研究人群均為高加索。對(duì)照組基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律。見(jiàn)表1。

表1 納入 FTO基因rs9939609、rs8050136多態(tài)性與妊娠期糖尿病關(guān)系文獻(xiàn)的基本情況

2.2 文獻(xiàn)質(zhì)量情況

文獻(xiàn)質(zhì)量評(píng)價(jià)NOS得分5～8，均為高質(zhì)量文獻(xiàn)。

2.3 分析

FTO(rs9939609)基因3種模型AA比TT、AA比TT+AT和AA+AT比TT，提示FTO(rs9939609)基因多態(tài)性與妊娠期糖尿病存在明顯相關(guān)性。根據(jù)基因分型方法進(jìn)行亞組分析，按照觀察組樣本量進(jìn)行亞組分析，結(jié)果不同基因分型方法和樣本量大小對(duì)結(jié)果均產(chǎn)生影響，見(jiàn)表2和圖1。FTO(rs8050136)基因5種模型與GDM之間均不相關(guān)。基于觀察組樣本量進(jìn)行亞組中也未發(fā)現(xiàn)顯著關(guān)聯(lián)。見(jiàn)表3和圖2。

表2 FTO(rs9939609)基因多態(tài)性與妊娠期糖尿病關(guān)系的meta分析

AT比TTOR(95% CI) Ph I2(%) AA+AT比TTOR(95% CI) Ph I2(%) AA比TT+ATOR(95% CI) Ph I2(%) 1.11(0.94～1.32)0.15334.501.22(1.04～1.44)0.05449.501.43(1.17～1.74)0.5000.000.75(0.50～1.13)0.11649.300.86(0.59～1.25)0.04961.901.44(0.85～2.44)0.4970.001.22(1.00～1.48)0.8780.001.32(1.10～1.58)0.4950.001.42(1.15～1.77)0.26424.500.70(0.43～1.14)0.05765.100.85(0.54～1.33)0.01974.601.46(0.86～2.50)0.31314.001.29(0.93～1.79)0.6280.001.49(1.10～2.01)0.3750.001.75(1.19～2.58)0.28114.001.14(0.91～1.44)0.6580.001.20(0.97～1.49)0.4710.001.27(0.98～1.66)0.5690.00

表3 FTO(rs8050136)基因多態(tài)性與妊娠期糖尿病關(guān)系的meta分析

AT比TTOR(95% CI) Ph I2(%) AA+AT比TTOR(95% CI) Ph I2(%) AA比TT+ATOR(95% CI) Ph I2(%) 1.17(0.98～1.38)0.9150.001.15(0.98～1.36)0.8420.001.01(0.77～1.33)0.795 0.001.17(0.96～1.42)0.9160.001.14(0.94～1.37)0.8430.000.92(0.66～1.27)0.8140.001.16(0.79～1.69)0.3740.001.20(0.84～1.72)0.3160.501.28(0.78～2.10)0.8580.00

圖1 FTO(rs9939609)基因多態(tài)性與妊娠期糖尿病之間關(guān)系的meta分析森林圖

圖2 FTO(rs8050136)基因多態(tài)性與妊娠期糖尿病關(guān)系的meta分析森林圖

2.4 異質(zhì)性分析

FTO(rs9939609)基因A比T存在高度異質(zhì)性，采用隨機(jī)效應(yīng)模型，其余4種模型均采用固定效應(yīng)模型。FTO基因rs8050136多態(tài)性無(wú)顯著異質(zhì)性，根據(jù)觀察組樣本量進(jìn)行亞組分析也無(wú)明顯異質(zhì)性，均采用固定效應(yīng)模型。FTO基因rs9939609位點(diǎn)根據(jù)基因分型方法和觀察組樣本量進(jìn)行亞組分析發(fā)現(xiàn)異質(zhì)性主要來(lái)自其他方法組和觀察組樣本量<150組。

2.5 敏感性分析

通過(guò)敏感性分析，對(duì)FTO(rs9939609)基因，剔除其他組文獻(xiàn)重新計(jì)算A比T模型合并效應(yīng)量，發(fā)現(xiàn)Pagán等[17]報(bào)道文獻(xiàn)是主要的異質(zhì)性來(lái)源，剔除后異質(zhì)性降低，I2=34.6%，且其他各模型合并效應(yīng)量無(wú)明顯改變，說(shuō)明結(jié)果穩(wěn)定。

2.6 發(fā)表偏倚評(píng)估

采用egger’s線(xiàn)性回歸檢驗(yàn)和begg’s漏斗圖檢測(cè)FTO 基因rs9939609和rs8050136位點(diǎn)發(fā)表偏倚均P>0.05，見(jiàn)表4和圖3、圖4。

表4 FTO基因多態(tài)位點(diǎn)Egger檢驗(yàn)結(jié)果

圖3 FTO(rs9939609)基因多態(tài)性與妊娠期糖尿病關(guān)系的meta分析漏斗圖

圖4 FTO(rs8050136)基因多態(tài)性與妊娠期糖尿病之間關(guān)系的meta分析漏斗圖

3 討論

目前已有多篇研究報(bào)道了FTO基因多態(tài)性與GDM的關(guān)系，但由于基因分型方法、樣本量、種族、生活方式和習(xí)慣等不同，研究結(jié)果尚存在爭(zhēng)議。因此，本研究基于之前研究進(jìn)行meta分析，評(píng)估兩者之間的關(guān)系。

本研究共包含11項(xiàng)病例對(duì)照研究，對(duì)于FTO基因位點(diǎn)rs9939609包含8項(xiàng)研究，共1170例病例和3109例對(duì)照。對(duì)于rs8050136位點(diǎn)包含5項(xiàng)研究，共1474例病例和1596例對(duì)照。FTO基因rs9939609位點(diǎn)3種模型結(jié)果表明rs9939609位點(diǎn)多態(tài)性與GDM存在關(guān)系，而FTO基因rs8050136位點(diǎn)5種模型結(jié)果表明rs8050136位點(diǎn)多態(tài)性與GDM的易感性無(wú)明顯關(guān)系。FTO基因rs9939609位點(diǎn)在A比T模型存在顯著異質(zhì)性，根據(jù)基因分型方法和觀察組樣本量進(jìn)行亞組分析，發(fā)現(xiàn)異質(zhì)性主要來(lái)自包括熒光定量PCR、HRM和基因測(cè)序的其他方法組和觀察組樣本量<150組，通過(guò)敏感性分析發(fā)現(xiàn)Pagán 等[17]報(bào)道文獻(xiàn)是主要的異質(zhì)性來(lái)源。亞組分析結(jié)果表明，F(xiàn)TO基因rs9939609多態(tài)性與GDM的易感性在>150的樣本組、RT-PCR組和Taq-Man組存在較強(qiáng)的關(guān)聯(lián)，說(shuō)明基因分型方法和病例樣本量大小不同對(duì)結(jié)果均產(chǎn)生影響。采用egger’s檢驗(yàn)和begg’s漏斗圖檢測(cè)發(fā)表偏倚情況，兩個(gè)位點(diǎn)均未發(fā)現(xiàn)顯著的發(fā)表偏倚，說(shuō)明meta分析結(jié)果可靠。

本研究綜合評(píng)價(jià)了FTO基因多態(tài)性與GDM之間的關(guān)系，但仍存在一些局限性。首先，納入的研究只有11項(xiàng)，病例數(shù)量較少，因此，尚需要大量不同種族的研究進(jìn)行評(píng)估。其次，由于年齡、吸煙、體重指數(shù)、飲酒習(xí)慣和其他生活方式因素不足，本研究不能考慮基因和環(huán)境交互作用。第三，本研究大多數(shù)研究為高加索人種，研究對(duì)象存在選擇偏差。

綜上所述，meta分析結(jié)果說(shuō)明FTO基因rs9939609位點(diǎn)多態(tài)性可能是GDM的易感相關(guān)多態(tài)位點(diǎn)，而FTO基因rs8050136多態(tài)性可能不是GDM的敏感位點(diǎn)。本研究結(jié)果尚需進(jìn)一步證實(shí)。