李蓉，趙麗丹

作者單位：100730 北京，中國醫(yī)學科學院 北京協(xié)和醫(yī)學院 北京協(xié)和醫(yī)院風濕免疫科

1 介紹

系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus，SLE)是一種經(jīng)典的慢性系統(tǒng)性自身免疫性疾病，病死率高且易復發(fā)，目前治療手段有限，無法根治，也無特異預防措施。T、B淋巴細胞在SLE的發(fā)病機制中起著至關重要的作用。糖基化是一種常見的翻譯后修飾，是在糖基轉(zhuǎn)移酶作用下將糖類轉(zhuǎn)移至蛋白質(zhì)和蛋白質(zhì)上特殊的氨基酸殘基形成糖苷鍵的過程。它對機體免疫系統(tǒng)多個過程均具有調(diào)節(jié)作用，如T、B細胞受體-配體相互作用[1]、免疫球蛋白重鏈恒定區(qū)糖基化改變，進而影響細胞活化閾值，調(diào)節(jié)促炎/抑炎平衡，參與自身免疫病發(fā)生發(fā)展。此外，免疫細胞中的糖基化可以被內(nèi)源性凝集素識別，介導細胞活化、分化和生存等。因此了解糖基化的改變對SLE發(fā)病機制的探索至關重要。

2 糖基化

在真核細胞中，主要有兩種類型的糖基化：N-糖基化和O-糖基化。N-糖基化始于粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，其特征是將N-乙酰葡糖胺(GlcNAc)結(jié)合至天冬酰胺-X-蘇氨酸共有序列中的天冬酰胺殘基。O-糖基化主要發(fā)生在高爾基體中，其特征是N-乙酰氨基半乳糖(GalNAc)結(jié)合至脯氨酸共有區(qū)的絲氨酸或蘇氨酸殘基，這被稱為Tn抗原。

3 糖基化在免疫系統(tǒng)中的作用

糖基化影響蛋白質(zhì)的空間構象、穩(wěn)定性、電荷、蛋白酶抗性以及對其他蛋白質(zhì)的親和力，它是配體-受體相互調(diào)節(jié)作用的一部分。炎癥過程中，參與的遷移、黏附和滲出的受體蛋白發(fā)生不同糖基化而被受體蛋白識別[2]。

T細胞的蛋白質(zhì)糖基化是一個動態(tài)過程。T細胞受體(Tcellreceptor，TCR)被激活時，T細胞糖蛋白上的Tn抗原增加。糖基化還通過影響T細胞受體復合物和主要組織相容性復合物(major histocompatibility complex，MHC)之間的親和力來調(diào)節(jié)T細胞的活化和成熟，參與其陽性和陰性選擇。糖基化和糖蛋白唾液酸化還影響T細胞分化，如CD25的糖基化減低可促進T細胞向Th17方向分化，而抑制其向Th2、Th2和Treg分化。用唾液酸酶去除活化CD4+T細胞中的唾液酸可減少Treg分化[3]。半乳糖凝集素與其配體的結(jié)合觸發(fā)了與靶細胞炎癥、活化和死亡相關的信號[4]。在B細胞中，聚糖和半乳糖凝集素的相互作用調(diào)節(jié)B細胞激活、漿細胞分化和存活等過程[5]。

免疫球蛋白G(IgG)在Fc片段的重鏈恒定區(qū)-2(CH2)中含有聚糖。Fc區(qū)聚糖的異質(zhì)性是調(diào)節(jié)其與Fc和C1q受體結(jié)合的機制之一。IgG中缺乏末端半乳糖的聚糖可激活補體和促進炎癥反應，而添加唾液酸至IgG聚糖可促進抗炎作用[6]。

4 系統(tǒng)性紅斑狼瘡糖基化的改變

質(zhì)譜技術和分子生物學技術發(fā)展使得鑒定SLE患者膜蛋白內(nèi)大量糖原的特征及參與糖原合成的酶的改變成為可能，而糖基化改變與免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié)和臨床表現(xiàn)的發(fā)展變化有關[7-8]，例如，在聚糖合成發(fā)生變化的小鼠及缺乏α-甘露糖苷酶Ⅱ(可導致復雜分支N-聚糖缺失)的小鼠會發(fā)生狼瘡樣疾病。這些小鼠表現(xiàn)為血清免疫球蛋白增加、出現(xiàn)狼瘡性腎炎以及抗組蛋白、抗Sm抗體和抗DNA的抗體[9]。此外還發(fā)現(xiàn)，這類小鼠腎臟中巖藻糖基化和半乳糖基化復合聚糖較少，但甘露糖末端寡糖表達增加[10]。與之相似，在狼瘡腎炎患者的腎活檢樣本中也發(fā)現(xiàn)富含甘露糖的聚糖增多，而復雜N-聚糖減少。而甘露糖殘基增多是免疫原性的標志，更易被抗原呈遞細胞識別。

4.1 SLE患者B細胞糖基化和抗體的變化

在B細胞中的糖基化研究主要集中于免疫球蛋白糖基化。有研究提出，在免疫球蛋白輕鏈或重鏈可變區(qū)獲得N-糖基化位點可能有利于B細胞在生發(fā)中心的選擇和存活，為B細胞產(chǎn)生自身反應細胞提供了補充機制[11-12]。SLE患者免疫球蛋白G的糖基化改變，其中抗雙鏈DNA的IgG的巖藻糖基化、半乳糖基化和唾液酸化與疾病活動度相關[13]。已發(fā)現(xiàn)Fc段巖藻糖基化減低的抗體與FcgRIIIa相互作用更強。IgG的甘露聚糖結(jié)合甘露糖凝集素可激活補體凝集素途徑，IgG甘露糖殘基暴露增加導致抗體介導的細胞毒作用增強。

4.2 SLE中T細胞糖基化的改變

SLE患者CD4+T細胞巖藻糖基化增加，可能與T細胞活化狀態(tài)相關。使用阿瑪珠白果凝集素(amaranthus leucocarpus lectin，ALL)可使SLE患者的T細胞O-糖基化減少?；顒有許LE患者的T細胞被ALL識別的程度低于非活動性SLE，并且ALL識別受體的表達與疾病活動呈負相關[8]。應用絨毛Vicia凝集素和單克隆抗體(CT1和CT2)可使T細胞中Tn抗原型O-聚糖的表達增加[14-15]。其他識別O-聚糖的凝集素，如花生凝集素(peanut agglutinin，PNA)和木菠蘿凝集素(artocarpus integrifolia)(Jacalin)，未顯示可改變SLE患者T細胞中O-糖基化[8]。

5 細胞質(zhì)O-GlcNA?；母淖?/h2>

O-連接的N-乙酰葡糖胺(O-GlcNAcylation)是一種發(fā)生在胞質(zhì)中的翻譯后修飾，這一過程中單糖N-乙酰葡糖胺(GlcNA)被添加到細胞質(zhì)或核蛋白的絲氨酸或蘇氨酸殘基中。將這種單糖添加到蛋白質(zhì)中會對蛋白質(zhì)的定位、穩(wěn)定性和相互作用產(chǎn)生影響[16]。O-GlcNAcylation調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)功能，如巨噬細胞的炎癥和抗病毒反應[17]，促進活化的中性粒細胞功能[18]，并抑制自然殺傷細胞活性[16，19]。

SLE患者中觀察到E74樣因子1(ELF-1)的O-GlcNA?；土姿峄瘻p少。ELF-1是一種轉(zhuǎn)錄因子，與編碼CD3分子ζ鏈的基因啟動子結(jié)合，從而增加其轉(zhuǎn)錄。ELF-1的糖基化和磷酸化減少導致其與DNA的結(jié)合減少和CD3ζ表達減少[20]。在SLE患者中，E74樣因子1(ELF-1)的O-GlcNA?；土姿峄臏p少與CD3ζmRNA及其蛋白的表達減少一致。

6 結(jié)論

綜上，SLE患者的B細胞和T細胞糖基化發(fā)生改變，影響其激活、分化、存活和效應功能，且部分糖基化與疾病活動度相關。目前，針對B細胞的研究主要集中在免疫球蛋白聚糖的改變。在T細胞中，糖基化的改變與TCR通路和T細胞活化、分化和功能有關。然而，關于SLE中糖基化的研究仍十分欠缺，仍需要對B細胞膜受體的糖基化、其他免疫細胞(如巨噬細胞和樹突狀細胞)的糖基化改變、糖基轉(zhuǎn)移酶和糖苷酶的細胞定位，以及對某些功能蛋白質(zhì)糖基化的調(diào)節(jié)作用進行深入研究。

(原文：The Role of B cell and T cell glycosylation in systemic lupus erythematosus[J]. Ivan Ramos-Martínez I，Edgar Ramos-Martínez E，Cerbón M，Int J Mol Sci，2023，24：863)