付毓 邢彥彥 賈小超

1 復(fù)旦大學(xué)附屬金山醫(yī)院婦產(chǎn)科 （上海 201508）

2 復(fù)旦大學(xué)附屬金山醫(yī)院超聲醫(yī)學(xué)科 （上海 201508）

內(nèi)容提要： 目的：探討腎母細胞瘤基因（WT1）聯(lián)合二維超聲在卵巢癌患者中的輔助診斷效果及預(yù)后指導(dǎo)價值。方法：回顧性收集2017年4月～2020年12月術(shù)前疑似卵巢癌患者87例，收集患者已有二維超聲的阻力指數(shù)（RI）和搏動指數(shù)（PI），邊界、包膜、內(nèi)部回聲、盆腔積液及彩色血流情況。收集標本庫血液標本行PCR檢測WT1表達情況，以病理組織檢查結(jié)果作為“金標準”，分析WT1聯(lián)合二維超聲在卵巢癌中的輔助診斷效果；并完成24個月門診隨訪，繪制生存曲線，分析WT1不同表達下患者生存期差異。結(jié)果：87例患者經(jīng)“金標準”檢查確診52例，確診率為59.77%；二維超聲檢查陽性41例，血液WT1檢查44例陽性，二者聯(lián)合檢查50例陽性；WT1聯(lián)合二維超聲在卵巢癌患者中檢查準確度、靈敏度、特異度、陽性與陰性預(yù)測值均高于二維超聲和WT1（P＜0.05）；WT1聯(lián)合二維超聲檢查陽性患者生存期為（23.29±4.67）月短于WT1基因聯(lián)合二維超聲檢查陰性患者（P＜0.05）。結(jié)論：腎母細胞瘤基因（WT1）和二維超聲用于卵巢癌患者中具有較高檢出率，且二者聯(lián)合檢查能提高診斷效能，可為臨床診療提供指導(dǎo)依據(jù)。

卵巢癌是指發(fā)生在卵巢的惡性腫瘤性疾病，能發(fā)生在不同年齡段人群中，其組織學(xué)類型多樣，主要為上皮來源[1]。王冠結(jié)果表明[2]：卵巢癌好發(fā)于30～40歲女性人群中，居婦科惡性腫瘤第3位，患者發(fā)病多與遺傳、激素、婦科疾病及環(huán)境等因素有關(guān)。由于卵巢癌發(fā)病早期臨床癥狀缺乏典型性，晚期患者可表現(xiàn)為腹脹、下腹部不適及食欲下降等，導(dǎo)致臨床診療難度較大[3]。病理組織檢查是卵巢癌診斷“金標準”，雖然能幫助患者確診，但是該方法具有較高風(fēng)險性，部分患者可出現(xiàn)感染、針道腫瘤定植等，患者診斷耐受性及依從性較差[4]。超聲檢查是卵巢癌重要的篩查手段，具有操作簡單、價格低廉、無創(chuàng)傷等優(yōu)點，且借助超聲不僅能對中晚期卵巢癌的診斷、分期和轉(zhuǎn)移具有作用，亦可發(fā)現(xiàn)早期無癥狀的微小病灶。腎母細胞瘤基因是腎母細胞瘤家族成員之一，能直接參與、調(diào)節(jié)細胞的增殖、分化、血管形成等病理和生理過程，在腫瘤生長、炎性作用中發(fā)揮了重要的作用[5]。本研究以疑似卵巢癌患者為對象，探討腎母細胞瘤基因聯(lián)合二維超聲在卵巢癌患者中的輔助診斷效果及治療指導(dǎo)價值，報道如下。

1.資料與方法

1.1 臨床資料

回顧性收集2017年4月～2020年12月術(shù)前疑似卵巢癌患者87例為對象，年齡24～67歲，平均（43.63±6.39）歲；體重指數(shù)（BMI）18.5～29.8kg/m2，平均（21.63±3.29）kg/m2；臨床表現(xiàn)：腹脹25例，下腹部不適19例，食欲下降28例。其中術(shù)后病理診斷為卵巢癌患者為52例，術(shù)后病理診斷為卵巢良性腫瘤為35例。

納入標準：①本院2017年4月～2020年12月術(shù)前B超提示卵巢腫物＞8cm伴混合型回聲或CA125數(shù)值＞500U/mL的患者。參考《婦科學(xué)》[6]中卵巢癌診斷標準，具有完整的病理檢查結(jié)果；②病情尚穩(wěn)定，能進行溝通與交流。

排除標準：①認知障礙、其他部位惡性腫瘤者；②中途家屬要求放棄診療；③檢查前行放化療、生物免疫治療者。

1.2 方法

二維超聲檢查：收集本院2017年7月～2021年2月疑似卵巢癌患者術(shù)前B超影像。入組患者均使用了二維超聲檢查，儀器型號：SIEMENS ACUSON Sequoia，中文名西門子紅衫系列，探頭頻率為3.5MHz，常規(guī)完成腹部超聲掃描，對于腹部超聲圖像質(zhì)量不佳者，調(diào)取患者陰道超聲檢查報告，探頭頻率為6.5MHz。調(diào)取超聲血流動力學(xué)特征，包括阻力指數(shù)（RI）和搏動指數(shù)（PI）等二維超聲參數(shù)，并了解腫瘤邊界、包膜、內(nèi)部回聲、盆腔積液、彩色血流角度等情況[7]。

腎母細胞瘤基因檢測：收集本院標本庫所有符合該項目患者空腹靜脈血清（貯存溫度為-80°C），本研究經(jīng)復(fù)旦大學(xué)附屬金山醫(yī)院倫理委員會獲審批免除知情同意。采用實時熒光PCR法測定入組患者血液中WT1，按照TRIzol試劑操作說明書完成總RNA的提取，并利用紫外分光光度計檢測并記錄總RNA的濃度和純度。參考反轉(zhuǎn)錄試劑盒操作說明書完成cDNA的合成。根據(jù)qRT-PCT試劑盒說明書，精確吸取RNA 1μL提取液反轉(zhuǎn)錄，并將獲得大的cDNA建立反應(yīng)體系20μL，完成qRT-PCT檢測。設(shè)定qRT-PCT反應(yīng)條件：95°C下2min，1個循環(huán)；95°C下5s、60°C下30s（連續(xù)完成40個循環(huán)）、95°C下15s、60°C下1min、95°C下30s、60°C下15s，并以2-△△Ct表示目的mRNA與對照mRNA表達倍數(shù)[8]。

以病理組織檢查結(jié)果作為“金標準”，分析腎母細胞瘤基因聯(lián)合二維超聲（兩種檢查方法中任意一項陽性即為陽性）在卵巢癌中的輔助診斷效果（檢查準確度、靈敏度、特異度、陽性與陰性預(yù)測值）。

腎母細胞瘤基因和二維超聲預(yù)后指導(dǎo)價值：根據(jù)腎母細胞瘤基因聯(lián)合二維超聲診斷結(jié)果完成24個月門診隨訪，繪制生存曲線，分析腎母細胞瘤基因不同表達下患者生存期差異。

1.3 統(tǒng)計分析

采用SPSS26.0軟件處理，計數(shù)資料行χ2檢驗，采用[n(%)]表示，計量資料行t檢驗，采用±s表示，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1 腎母細胞瘤基因聯(lián)合二維超聲在卵巢癌中檢出率

87例疑似卵巢癌患者經(jīng)“金標準”檢查確診52例，確診率為59.77%；二維超聲檢查陽性41例，腎母細胞瘤基因檢測44例陽性，二者聯(lián)合檢查50例陽性，見表1。

表1.腎母細胞瘤基因聯(lián)合二維超聲在卵巢癌中檢出率

2.2 不同檢查方法在卵巢癌中的診斷效能比較

腎母細胞瘤基因聯(lián)合二維超聲在卵巢癌患者中檢查準確度、靈敏度、特異度、陽性與陰性預(yù)測值均高于二維超聲和腎母細胞瘤基因（P＜0.05），見表2。

表2.不同檢查方法在卵巢癌中的診斷效能比較

2.3 腎母細胞瘤基因聯(lián)合二維超聲在卵巢癌中的預(yù)后指導(dǎo)價值

對腎母細胞瘤基因聯(lián)合二維超聲陽性患者為陽性者，隨訪患者生存期。結(jié)果表明：腎母細胞瘤基因聯(lián)合二維超聲檢查陽性患者生存期為（23.29±4.67）月短于腎母細胞瘤基因聯(lián)合二維超聲檢查陰性患者（P＜0.05），見圖1。

圖1.腎母細胞瘤基因聯(lián)合二維超聲在卵巢癌中的治療指導(dǎo)價值

3.討論

卵巢癌是一種惡性程度較高的腫瘤，其發(fā)病率居生殖道惡性腫瘤首位。從人體解剖學(xué)角度看，卵巢位于盆腔深部，多數(shù)患者發(fā)病早期缺乏典型癥狀，發(fā)病隱匿，多數(shù)患者確診時已經(jīng)是中晚期，導(dǎo)致患者生存率低、預(yù)后較差。既往研究表明：加強卵巢癌患者早期準確診斷，有助于提高患者生存期，改善患者治療預(yù)后[9]。二維超聲檢查是卵巢癌患者中常用的方法，該方法操作相對簡單、價格低廉及無創(chuàng)等優(yōu)點，能幫助患者早期確診[10]。同時，借助二維超聲圖像特點，能判定腫瘤的形態(tài)、內(nèi)部結(jié)構(gòu)，從而實現(xiàn)卵巢腫瘤的區(qū)分和鑒別[11]。本研究中，87例患者經(jīng)“金標準”檢查確診52例，確診率為59.77%；二維超聲檢查陽性41例，腎母細胞瘤基因檢測44例陽性，二者聯(lián)合檢查50例陽性，從本研究結(jié)果看出，腎母細胞瘤基因和二維超聲用于卵巢癌患者中具有較高檢出率，能指導(dǎo)臨床診療。分析原因：二維超聲用于卵巢癌患者診斷中，由于腫瘤細胞生長速度相對較快，并出現(xiàn)新生血管；腫瘤的侵蝕作用能形成動靜脈痰，腫瘤實質(zhì)內(nèi)可見廣泛的血流信號，從而實現(xiàn)疾病的診斷。但是，二維超聲用于卵巢癌患者中特異度較低，導(dǎo)致單一使用二維超聲診斷效果不佳。

腎母細胞瘤基因包括半胱氨酸富集蛋白61、結(jié)締組織生長因子、腎母細胞瘤過度表達蛋白等。盡管腎母細胞瘤基因臨床上已經(jīng)發(fā)現(xiàn)十多年，但是其生物化學(xué)活性和生物功能研究仍相對較少[12]。本研究中，腎母細胞瘤基因聯(lián)合二維超聲在卵巢癌患者中檢查準確度、靈敏度、特異度、陽性與陰性預(yù)測值均高于二維超聲和腎母細胞瘤基因（P＜0.05），從本研究結(jié)果看出，腎母細胞瘤基因和二維超聲能提高卵巢癌診斷效能。從大的角度來說，腎母細胞瘤基因?qū)儆谡纤厥荏w的配體，與細胞外基質(zhì)存在緊密的聯(lián)系，能介導(dǎo)細胞的增殖和黏附功能。既往研究表明：卵巢癌患者腎母細胞瘤基因表達異常，能促進腫瘤細胞的增殖、抑制細胞凋亡，參與滋養(yǎng)層細胞的生長[13]。本研究中，腎母細胞瘤基因聯(lián)合二維超聲檢查陽性患者生存期為（23.29±4.67）月短于腎母細胞瘤基因聯(lián)合二維超聲檢查陰性患者（P＜0.05），從本研究結(jié)果看出，腎母細胞瘤基因聯(lián)合二維超聲能指導(dǎo)卵巢癌患者診療。因此，臨床上對于疑似卵巢癌患者，應(yīng)加強患者二維超聲檢查，必要時可聯(lián)合腎母細胞瘤基因測定，發(fā)揮不同檢測指標優(yōu)勢，幫助患者早期確診，并指導(dǎo)臨床診療[14,15]。

綜上所述，腎母細胞瘤基因和二維超聲用于卵巢癌患者中具有較高檢出率，且二者聯(lián)合檢查能提高診斷效能，可為臨床診療提供指導(dǎo)依據(jù)。