李 英，趙明川，冶有義，安志興，陳建軍，仲海順，馬玉春，趙 琰，康世花，吳振霞，李中余，趙 榮，胡曉宇，何永彩，張勤文，高小龍，王 穩(wěn)，李增魁

（1.青海大學(xué)農(nóng)牧學(xué)院，青海西寧 810016；2.青海省動物疾病病原診斷與綠色防控技術(shù)研究重點實驗室，青海西寧 810016；3.農(nóng)業(yè)農(nóng)村部高原冷水魚養(yǎng)殖與生態(tài)環(huán)境保護重點實驗室（部省共建），青海西寧 810016；4.河南科技學(xué)院，河南新鄉(xiāng) 453002；5.河南師范大學(xué)，河南新鄉(xiāng) 453002；6.循化縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村和科技局，青海循化 811100；7.青海大學(xué)省部共建三江源生態(tài)與高原農(nóng)業(yè)國家重點實驗室，青海西寧 810016）

發(fā)酵床養(yǎng)殖技術(shù)于20世紀(jì)60年代初發(fā)源于日本[1]，20世紀(jì)90年代被引入我國，因其污染物排放低，飼養(yǎng)效率高，還能消除糞便中的寄生蟲蟲卵等，最近幾年在國內(nèi)很多省份得到了廣泛應(yīng)用，并取得了較為理想的效果[2-4]。發(fā)酵床養(yǎng)殖模式的原理是利用墊料中大量的有益菌群來迅速分解排泄物及有害氣體，同時釋放出大量熱能，從而殺滅畜禽糞便和墊料中的大部分有害微生物和寄生蟲及蟲卵[5-7]。在發(fā)酵床養(yǎng)殖模式下，發(fā)酵床墊料中的微生物將畜禽糞尿發(fā)酵分解，使養(yǎng)殖環(huán)境得到快速改善，從而減輕了環(huán)境污染，減少了畜禽舍內(nèi)的蚊蠅數(shù)量，間接阻斷了寄生蟲感染途徑，避免了畜禽養(yǎng)殖場寄生蟲病大規(guī)模流行和寄生蟲反復(fù)感染問題[8-10]。

目前，發(fā)酵床養(yǎng)殖技術(shù)已被成功應(yīng)用于豬場、牛場以及家禽養(yǎng)殖場中，但用于牦牛養(yǎng)殖的相關(guān)報道較少?；诖?，本研究選取保育至育肥階段的牦牛作為試驗動物，分析墊料堆積發(fā)酵結(jié)合抗寄生蟲藥物定期驅(qū)蟲養(yǎng)殖模式對牦牛寄生蟲病防治效果和牦牛生長性能的影響，以期為牦牛發(fā)酵床養(yǎng)殖技術(shù)的推廣提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗動物及分組

選取青海省循化縣某牦牛場一批體況良好的牦牛120頭（未經(jīng)體內(nèi)驅(qū)蟲處理），平均分成3組（A、B、C組）：A組在牦牛進入前對圈舍墊料進行發(fā)酵處理，并且在試驗期內(nèi)對牦牛進行2次定期驅(qū)蟲；B組在牦牛進入前只對圈舍墊料進行發(fā)酵處理，不進行驅(qū)蟲；C組作為對照組，不進行任何處理。

1.2 試驗材料與設(shè)施

發(fā)酵床專用菌株，購自河南智寶生物科技有限公司（批號1122656）；伊維菌素注射液（0.05 g/5 mL），購自成都中牧生物藥業(yè)有限公司；光學(xué)顯微鏡（BM1000），購自南京江南永新有限公司；畜禽糞便發(fā)酵罐（FJG），購自山東中科貝特環(huán)保裝備股份有限公司；麥?zhǔn)舷x卵計數(shù)板（DXCL10），購自廈門登迅儀器設(shè)備有限公司；數(shù)顯溫度計（WS-311），購自江蘇美安特自動化儀表有限公司。

1.3 試驗方法

1.3.1 發(fā)酵菌液配置 將發(fā)酵床專用菌、蔗糖、面粉和水，按照3:1:2:5的質(zhì)量比進行混勻發(fā)酵。

1.3.2 發(fā)酵床制作 先對牦牛舍進行糞污清理、消毒等處理，然后將木屑和秸稈機械混勻作為墊底墊料均勻鋪在牦牛舍內(nèi)，厚度為20～30 cm；將配置好的發(fā)酵菌液用噴槍均勻噴灑在墊料上；最后將切短的碎秸稈均勻鋪平在墊料上，厚度為5～10 cm。將試驗牦牛飼養(yǎng)在各自發(fā)酵床上，其間對發(fā)酵床做翻耙處理，保持發(fā)酵床墊料中的濕度為45%～55%。

1.3.3 指標(biāo)測定與數(shù)據(jù)處理

1.3.3.1 蟲卵定性及定量檢測 在發(fā)酵處理前15 d（-15 d）、處理當(dāng)天（0 d），及進牦牛后45、90、120 d時，采集各層發(fā)酵床表層墊料，每次每組發(fā)酵床取5份樣品，采用飽和鹽水漂浮法、蟲卵沉淀法（蟲卵檢查）和麥克馬斯特氏法（蟲卵計數(shù)）進行寄生蟲蟲卵定性和定量檢測[11-12]，確定發(fā)酵床中寄生蟲蟲卵的種類和數(shù)量。

1.3.3.2 墊料溫度測定 墊料發(fā)酵期間，每天測量3組試驗牦牛發(fā)酵床墊料表層下20 cm處的溫度，連續(xù)測量15 d。

1.3.3.3 牦牛生產(chǎn)性能測定 在發(fā)酵處理前15 d（-15 d）、發(fā)酵處理當(dāng)天（0 d）及進牦牛后45、90、120 d時，測量牦牛的體長和體高，測定其生長性能。

1.3.4 數(shù)據(jù)分析 運用Excel軟件整理數(shù)據(jù)，采用Chi-Square Calculator（https://www.mathsisf un.com/data/chi-square-calculator.html）在線軟件進行統(tǒng)計分析。每克糞便蟲卵數(shù)（eggs per gram，EPG）計算公式為

EPG = 總蟲卵數(shù)（個）/被檢糞便質(zhì)量（g）

2 結(jié)果

2.1 溫度測定

由圖1可知，A 組和B組墊料表層下20 cm處，最高溫度均出現(xiàn)在墊料發(fā)酵后的第12天，溫度分別為（60.1 ± 0.2）℃和（60.1 ± 0.3）℃，極顯著高于C組（P＜0.01），在后續(xù)發(fā)酵過程中，A組和B組墊料表層下20 cm處的溫度均維持在50 ℃以上。

圖1 不同試驗組發(fā)酵床溫度變化趨勢

2.2 蟲卵定性及定量檢測

由表1可知，試驗組牦牛均不同程度感染了吸蟲、蛔蟲、絳蟲和球蟲等寄生蟲。A組墊料在進牦牛后45 d，蛔蟲卵和絳蟲卵轉(zhuǎn)陰；B組墊料在試驗期間始終能檢測到蟲卵，但數(shù)量有下降趨勢；C組墊料在整個試驗期間一直有蟲卵存在，且數(shù)量呈持續(xù)上升態(tài)勢。試驗結(jié)果說明，本研究建立的發(fā)酵方法能有效殺滅墊料中的蟲卵。

表1 不同試驗組墊料中寄生蟲蟲卵檢測結(jié)果（EPG） 單位：個/g

2.3 生產(chǎn)性能測定

由表2可知，A組牦牛的體高與體長在進牦牛后45 d時顯著高于B組（P＜0.05），極顯著高于C組（P＜0.01），說明發(fā)酵床養(yǎng)殖模式對牦牛的生產(chǎn)性能提高具有顯著作用。

表2 不同試驗組牦牛生產(chǎn)性能測定結(jié)果 單位：cm

3 討論

3.1 堆積發(fā)酵處理對發(fā)酵床溫度的影響

根據(jù)試驗結(jié)果，C組對照組未對墊料采取任何處理措施，其溫度雖然有短暫的升溫期，但很快呈下降趨勢，且最高溫度只達到了（21.0 ± 0.5）℃，而經(jīng)過堆積發(fā)酵的試驗組A、B兩個發(fā)酵床的溫度均呈持續(xù)升溫趨勢，且兩組無明顯差異，最高溫度分別達到（60.1 ± 0.2）℃和（60.1 ± 0.3）℃。在本試驗中，試驗組與對照組發(fā)酵床的溫度之所以有如此大的差異，是因為試驗組的發(fā)酵床在堆積過程中添加了發(fā)酵菌液，使得A、B兩組發(fā)酵床中的微生物數(shù)量遠(yuǎn)多于C組，在富含微生物的情況下，發(fā)酵床墊料中的有機物和牦牛排泄物被快速分解而釋放出大量的熱能。所以，經(jīng)過堆積發(fā)酵后的發(fā)酵床能夠達到理想的溫度，可起到良好的擴繁發(fā)酵菌群和提高牦牛養(yǎng)殖中寄生蟲病防治效果的作用。本研究中的發(fā)酵床屬于濕式發(fā)酵床，還有一種干撒式發(fā)酵床，其在制作過程中不需要添加水分，墊料核心溫度維持在17～28 ℃。相比之下，濕式發(fā)酵床具有良好的殺滅雜菌和寄生蟲蟲卵的效果，而干式發(fā)酵床操作簡單、便捷高效，更易于推廣應(yīng)用[8，13]。

3.2 堆積發(fā)酵處理對牦牛寄生蟲感染的影響

高溫能夠殺滅糞便中的蟲卵，尤其是當(dāng)溫度達到55 ℃時，寄生蟲蟲卵在15 min內(nèi)便會死亡[14]。發(fā)酵床內(nèi)部溫度一般維持在50 ℃以上，持續(xù)時間超過5 d。本試驗中，A、B兩組對墊料進行了發(fā)酵處理，墊料內(nèi)部的溫度明顯高于對照組C組。發(fā)酵后的墊料采樣寄生蟲蟲卵檢測結(jié)果與李健等[15]和李云霞[16]對不同處理方式發(fā)酵床模式下的豬主要寄生蟲病防治效果研究中的結(jié)果一致。李健等[15]的試驗結(jié)果表明，墊料堆積發(fā)酵組的墊料發(fā)酵溫度極顯著高于墊料翻耙組（P＜0.01），且堆積發(fā)酵后墊料中未檢出寄生蟲卵，試驗第45、90天在墊料和糞便中檢出的蛔蟲卵、鞭蟲卵、球蟲卵數(shù)量均處于低水平。李云霞[16]的試驗結(jié)果顯示，墊料堆積發(fā)酵組溫度高于翻耙組，且墊料中的寄生蟲數(shù)量遠(yuǎn)低于翻耙組（P＜0.05）。綜上試驗結(jié)果，說明墊料堆積發(fā)酵可致發(fā)酵床溫度升高，從而有效殺滅墊料中的寄生蟲蟲卵?？稍诿颗笈Ｈ撼鰴诤笾料屡笈Ｈ恨D(zhuǎn)入之前，采取上述的墊料堆積發(fā)酵方法，這樣可以有效殺滅發(fā)酵床中的寄生蟲蟲卵，從而提高牦牛群飼養(yǎng)過程中的寄生蟲病防治效果。

3.3 發(fā)酵床養(yǎng)殖模式對牦牛生產(chǎn)性能的影響

A組牦牛的體高與體長在不同發(fā)育階段均顯著高于B組（P＜0.05），極顯著高于C組（P＜0.01），說明A組牦牛的養(yǎng)殖收益最高，C組牦牛的養(yǎng)殖收益明顯低于2個試驗組。A組與B組牦牛的養(yǎng)殖收益之所以有明顯的差異，是因為對A組牦牛進行了定期驅(qū)蟲。通過對墊料中寄生蟲卵數(shù)量檢測發(fā)現(xiàn)，A組墊料在進牦牛后45 d時未檢測到蛔蟲卵和絳蟲卵，而B組和C組墊料中均檢測到蛔蟲卵和絳蟲卵，且C組墊料中的蛔蟲卵和絳蟲卵數(shù)量顯著高于B組。試驗結(jié)果說明，寄生蟲驅(qū)蟲能夠明顯提高牦牛的生產(chǎn)性能。通過堆積發(fā)酵后的A組和B組發(fā)酵床富含大量對牦牛腸道有益的微生物，這些微生物有利于保持牦牛腸道健康，提高牦牛生產(chǎn)性能。有研究[17-19]表明，舒適的養(yǎng)殖環(huán)境可以減少動物能量消耗，促進機體生長，采用秸稈、木屑等舒適性強、透氣性能好的材料制作的發(fā)酵床可以增加動物的躺臥行為，減少應(yīng)激。因此，舒適的養(yǎng)殖環(huán)境是提高牦牛生產(chǎn)性能的措施之一，所以對牦牛采取定期驅(qū)蟲下的發(fā)酵床養(yǎng)殖模式能夠明顯提高牦牛生產(chǎn)性能。

3.4 發(fā)酵床養(yǎng)殖模式在畜禽糞污資源化利用方面的意義

隨著畜禽飼養(yǎng)規(guī)模的擴大，多數(shù)省份和地區(qū)的禽畜糞污排放量已超過人們?nèi)粘Ｉ钆盼哿縖20-21]，畜禽養(yǎng)殖對環(huán)境帶來的污染影響著現(xiàn)代畜牧業(yè)的發(fā)展，而合理進行畜禽糞污資源化利用，是解決畜禽糞污污染問題的有效途徑。發(fā)酵床養(yǎng)殖技術(shù)作為一種利用微生物發(fā)酵處理糞污的無污染、零排放和循環(huán)利用的新型農(nóng)業(yè)技術(shù)，從源頭上解決了畜禽糞尿帶來的污染問題，而且使用后的墊料還可作為有機肥直接應(yīng)用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)。該技術(shù)在生豬養(yǎng)殖中得到了大面積推廣應(yīng)用，目前已被推廣應(yīng)用到家禽、牛、羊等畜禽養(yǎng)殖中，不僅改善了畜禽養(yǎng)殖環(huán)境，減少了疾病發(fā)生，還提高了動物福利，增加了養(yǎng)殖效益，為畜禽標(biāo)準(zhǔn)化養(yǎng)殖奠定了技術(shù)支持。

4 結(jié)論

試驗結(jié)果表明，牦牛發(fā)酵床養(yǎng)殖模式能有效防止寄生蟲蟲卵的發(fā)育和繁殖，結(jié)合定期驅(qū)蟲可對牦牛寄生蟲病起到非常有效的防治效果，同時可顯著提升牦牛生產(chǎn)性能，值得推廣應(yīng)用。