路子佳，張志飛，謝 瑤

（北京東方紅航天生物技術(shù)股份有限公司，北京 100190）

在不健康的飲食和生活習(xí)慣下，我國心腦血管疾病患者持續(xù)增加，患有高血壓、血脂異常和糖尿病的人數(shù)已高達(dá)數(shù)億[1]。導(dǎo)致心血管疾病發(fā)生的主要危險(xiǎn)因素之一的高血脂的并發(fā)癥很多，其中包括動(dòng)脈硬化、冠心病、心肌梗死和腦血栓等[2]。通常情況下高脂血癥（Hyperlipidemia，HPL）年齡多在55 歲以上，然而由于缺乏運(yùn)動(dòng)、暴飲暴食和工作壓力大等，HPL 越來越趨向年輕化[3]。長期服用降脂西藥會(huì)使身體產(chǎn)生強(qiáng)依賴性且過度服用會(huì)對(duì)人體其他器官造成不良影響，如肝毒性，膽石癥和胃炎等[4-5]。為了在降低HPL 的同時(shí)減少藥物對(duì)身體的損害，人們將目光轉(zhuǎn)向效果好、對(duì)人體傷害較小的天然產(chǎn)物。眾多研究者將關(guān)注的焦點(diǎn)聚集在尋找具有降血脂功效的天然產(chǎn)物的研究以及開發(fā)新型藥食同源降血脂藥品和食品等[6-7]。

功能性紅曲是指以大米為原料，接入紅曲霉菌進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)生的莫拉可林K（Monacolin K，MK）、紅曲色素、γ-氨基丁酸和麥角甾醇等生物活性物質(zhì)[8-9]。隨著國內(nèi)外研究人員對(duì)紅曲的研究日益深入，發(fā)現(xiàn)其具有調(diào)節(jié)血脂[10]、調(diào)節(jié)血糖[11]和調(diào)節(jié)血壓[12]等多種藥理作用，并被廣泛應(yīng)用到藥、食領(lǐng)域[13]?，F(xiàn)有研究還發(fā)現(xiàn)，將紅曲與其他具有降血脂和抗氧化等作用的物質(zhì)進(jìn)行合理配伍，不僅能提高其降血脂的能力，還能對(duì)高血脂引發(fā)的心血管疾病進(jìn)行預(yù)防和修復(fù)[14-15]。研究發(fā)現(xiàn)，茶的主要成分之一茶多酚具有改善大鼠糖脂代謝、預(yù)防心血管疾病、保肝護(hù)肝、抗炎、抗氧化和抗癌等作用[16-18]。而表沒食子兒茶素沒食子酸酯（Epigallocatechingallate，EGCG）則是從綠茶中提取的多酚物質(zhì)含量最高的一種水溶性活性成分，是茶多酚類中最具生理活性的物質(zhì)[19-20]，在降低低密度脂蛋白膽固醇（Low Density Lipoprotein Cholesterol，LDL-C）水平的同時(shí)，對(duì)肝臟損傷修復(fù)也有一定的作用[21-22]。據(jù)統(tǒng)計(jì)目前我國茶葉種植面積已達(dá)290 多萬hm2，占全球面積的61%左右；茶產(chǎn)量達(dá)到261 萬t，居世界第一，占全球產(chǎn)量的45%。因此，如何充分開發(fā)茶葉資源，對(duì)其功能成分進(jìn)行綜合利用，具有重要的意義。此外，硒作為生命系統(tǒng)中重要的必需微量元素之一，具有調(diào)節(jié)血脂的功能，機(jī)體中硒的失衡會(huì)導(dǎo)致血脂的異常[23-24]。相較于無機(jī)來源的硒，富硒酵母（有機(jī)硒源）則可通過腸壁的主動(dòng)運(yùn)輸，進(jìn)入體內(nèi)，更易被機(jī)體吸收[25-26]。

目前，關(guān)于紅曲、綠茶提取物和富硒酵母復(fù)配后的食用安全性和功能性等方面的研究較少。本文以紅曲、綠茶提取物和富硒酵母為主要原料復(fù)配制成復(fù)方制劑，并對(duì)其輔助降血脂的作用開展了人體試食研究，希望能為紅曲、綠茶提取物和富硒酵母復(fù)配進(jìn)一步研究與利用提供理論依據(jù)及實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)，為具有輔助降血脂作用的復(fù)方紅曲制劑的配伍提供借鑒。

1 材料與方法

1.1 受試樣品

復(fù)合制劑規(guī)格為0.5 g/片，其配制方法為將經(jīng)60Co輻照（5 kGy）滅菌后的富硒酵母（安琪酵母股份有限公司）與綠茶提取物（水提，陜西嘉禾生物科技股份有限公司）按等量遞增法混合均勻，再與經(jīng)60Co 輻照（5 kGy）滅菌后的紅曲（北京東方紅航天生物技術(shù)股份有限公司）、羥丙甲纖維素、淀粉和糊精（北京鳳禮精求醫(yī)藥股份有限公司）按配方比例混合，再經(jīng)質(zhì)軟材、干燥和壓片等工藝制成片劑。標(biāo)志性成分及含量分別為洛伐他汀1.525 mg/片、EGCG 24.25 mg/片、硒7.7 μg/片。

1.2 受試人群

選擇18～65 歲單純血脂異常的志愿受試者120 人，維持日常飲食，半年內(nèi)進(jìn)行2 次血清總膽固醇（Serum Total Cholesterol，TC）、甘油三酯（Triglyceride，TG）檢測(cè)，2 次血清TC 均≥5.2 mmol·L-1。需排除處于妊娠和哺乳期的女性以及近期內(nèi)服用過與調(diào)節(jié)血脂功能有關(guān)制品等人群，減少影響因素[27-28]。

1.3 主要儀器

X 線透視機(jī)、B 超掃描儀、生化分析儀、心電圖、血壓計(jì)和血球計(jì)數(shù)儀等。

1.4 試驗(yàn)方法

根據(jù)血脂水平將受試人群隨機(jī)分為兩組，每組60 人，實(shí)驗(yàn)終末每組有效統(tǒng)計(jì)人數(shù)需≥50 例。試食組服用受試樣品，服用量為2 片1 次，早晚各1 次，連續(xù)服用30 d，對(duì)照組服用安慰劑。

試食前，檢測(cè)腹部B 超、心電圖、胸透、血常規(guī)、大小便常規(guī)、血壓和肝腎功能等安全性指標(biāo)；試食期間兩組人群不改變?nèi)粘５纳詈惋嬍沉?xí)慣，每日記錄精神狀態(tài)、睡眠、飲食和大小便等一般情況；試食末檢測(cè)血常規(guī)、尿常規(guī)、便常規(guī)、血壓和肝腎功能等指標(biāo)。

統(tǒng)計(jì)受試者4 項(xiàng)功能指標(biāo)，即TC、TG、LDL-C以及高密度脂蛋白膽固醇（High Density Lipoprotein Cholesterol，HDL-C）的水平變化情況，計(jì)算變化百分率和總有效率。當(dāng)TC、TG 分別降低10%和15%以上，且HDL-C 與對(duì)照組相比P＞0.05 或HDL-C 上升0.104 mmol·L-1以上時(shí)，可判斷受試樣品具有輔助降血脂功能作用[28]。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

應(yīng)用SPSS 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行試驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 復(fù)合制劑對(duì)安全性指標(biāo)的影響

試驗(yàn)終末對(duì)照組和試食組分別為58 人和59 人進(jìn)入有效統(tǒng)計(jì)。試食前，兩組人群的年齡、精神狀態(tài)、睡眠情況和飲食情況等基本一致；兩組人群的腹部B超、心電圖和胸透檢測(cè)結(jié)果均未見明顯異常。由表1 可知，在試食前，對(duì)照組、試食組的血清TC、TG、LDL-C及HDL-C 的水平均無顯著性差異（P＞0.05）。

表1 試食前功效性指標(biāo)的基本情況表（）

表1 試食前功效性指標(biāo)的基本情況表（）

由表2 可知，在試食前后，兩組受試者的心率、血壓、血液、尿和便常規(guī)等安全性指標(biāo)的檢測(cè)結(jié)果均在正常范圍內(nèi)，且在試食期間，未出現(xiàn)惡心、脹氣、腹瀉和過敏等不良反應(yīng)，表明該紅曲綠茶提取物硒復(fù)合制劑對(duì)受試人群無不良影響。

表2 受試樣品對(duì)安全性指標(biāo)的影響表（）

表2 受試樣品對(duì)安全性指標(biāo)的影響表（）

2.2 復(fù)合制劑對(duì)高血脂人群功效性指標(biāo)的影響

目前，在臨床血脂檢測(cè)中，主要的常規(guī)指標(biāo)為TC、TG、LDL-C 和HDL-C，而血脂異常通常體現(xiàn)為TC、TG 和LDL-C 水平的升高，HDL-C 水平的降低[29]。其中，TC 是指血液中所有脂蛋白所含膽固醇（Cholesterol，CHOL）的總和，是人體內(nèi)不可或缺的，具有非常重要作用的一種物質(zhì)，同時(shí)也是血脂檢查的一個(gè)重要指標(biāo)[30]，如高甘油三酯血癥（Hypertriglyceridemia，HTG）是常見的血脂異常類型，我國HTG 的患病率尤其高[31]；低密度脂蛋白（Low Density Lipoprotein，LDL）具有致動(dòng)脈粥樣硬化（Atherosclerosis，AS）的作用，在AS 的發(fā)生和發(fā)展的過程中起著至關(guān)重要的作用，LDL 顆粒是血液中CHOL 含量最多的脂蛋白，其CHOL 的占比約為50%，因此血液中LDL-C 的水平可反映LDL 顆粒的水平[32]；高密度脂蛋白（High Density Lipoprotein，HDL）是顆粒最小的脂蛋白，其所含的CHOL 含量相對(duì)較為穩(wěn)定，因此多以檢測(cè)其所含CHOL 的水平來間接了解血液中HDL 的水平，通常情況下血清HDL-C水平與AS 性心血管疾病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)呈負(fù)相關(guān)[33-35]。

由圖1、圖2 和圖3 可知，試食30 d 后，試食組人群血清TC、TG 和LDL-C 含量分別平均下降11.09%、16.20%和12.42%，與對(duì)照組和自身試食前比較，均具有極顯著性差異（P＜0.01）；試食前后，對(duì)照組自身的TC、TG 值無顯著性差異（P＞0.05）。由圖4 可知，試食30 d 后，試食組的血清HDL-C 含量有所升高，但與對(duì)照組、自身試食前比較，均無顯著性差異（P＞0.05）。結(jié)果顯示，紅曲綠茶提取物硒復(fù)合制劑可以有效降低試食者血清TC、TG、LDL-C 的含量。

圖1 受試樣品對(duì)TC 水 平的影響圖

圖2 受試樣品對(duì)TG 水平的影響圖

圖3 受試樣品對(duì)LDL-C 水平的影響圖

圖4 受試樣品對(duì)HDL-C 水平的影響圖

2.3 TC、TG、HDL-C 有效率及總有效率

由表3可知，依據(jù)保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范[28]，當(dāng)TC 降低＞10%、TG 降低＞15%時(shí)HDL-C 指標(biāo)不顯著低于對(duì)照組或HDL-C 上升＞0.104 mmol·L-1時(shí)，可判定為有效。

表3 TC、TG、HDL-C 有效率及總有效率表

3 結(jié)論與討論

以AS 性心血管疾病為主的心血管疾病是我國城鄉(xiāng)居民第一大死亡因素，占死因構(gòu)成的40%以上[1]。據(jù)統(tǒng)計(jì)，自20 世紀(jì)80 年代以來，我國包括兒童、青少年在內(nèi)的各年齡段人群的血脂水平變化顯著，血脂異?；疾÷拭黠@增加，而遏制人群血脂平均水平的持續(xù)升高是我國AS 性心血管疾病預(yù)防的重要目標(biāo)，而CHOL 和TG 及其相關(guān)的脂蛋白（如LDL 和HDL等）等均為與血脂密切相關(guān)的臨床指標(biāo)；中國AS 性心血管疾病一級(jí)預(yù)防地位人群主要血脂指標(biāo)中TC ＜5.2 mmol·L-1和LDL-C ＜3.4 mmol·L-1[36]。

本研究以紅曲、綠茶提取物和富硒酵母為主要原料研制出的紅曲綠茶提取物硒復(fù)合制劑，可以顯著降低試食組人群TC、TG 和LDL-C 含量（P＜0.01），其中TC 由試食前的（5.41±0.13）mmol·L-1降低至（4.81±0.48）mmol·L-1，平均下降11.09%，下降幅度＞10%；TG 由試食前的（1.42±0.19）mmol·L-1降低至（1.19±0.13）mmol·L-1，平均下降16.20%，下降幅度＞15%；LDL-C 由試食前的（3.14±0.72）mmol·L-1降低至（2.75±0.61）mmol·L-1，下降12.42%；輔助降血脂的總有效率達(dá)50.9%，且在試食前后，受試人群的血常規(guī)、尿常規(guī)、便常規(guī)、腹部B 超、心電圖和胸透等安全性指標(biāo)均無異常，未出現(xiàn)脹氣、腹瀉、惡心及過敏等不良反應(yīng)。提示該紅曲綠茶提取物硒復(fù)合制劑可通過降低TC、TG 和LDL-C 水平起到輔助降血脂的作用，且對(duì)健康無損害作用。

本文為紅曲、綠茶提取物、富硒酵母三者復(fù)配功效性的研究提供了數(shù)據(jù)支持、為3 種資源的綜合利用提供借鑒以及為輔助降血脂功能復(fù)方制劑的研究開發(fā)提供理論依據(jù)，對(duì)大眾提供更加安全有效的和具有輔助降血脂功能的產(chǎn)品具有重要的意義。同時(shí)作為EGCG 應(yīng)用的深度研究，希望可以對(duì)茶資源的深度開發(fā)及利用起到較好的促進(jìn)作用。