張志明， 陳玉潔， 余秋凡， 管紅霞， 肖 勇， 張 琦

（無錫市疾病預防控制中心，江蘇 無錫 214023）

0 引言

自2019年新型冠狀病毒出現(xiàn)以來，疫情時有反復，不斷出現(xiàn)新型毒株，嚴重影響社會的正常秩序和人民生活，全球化增加大規(guī)模疫情暴發(fā)的不確定性，生物安全問題需要所有人予以重視。2021年4月15日，《中華人民共和國生物安全法》正式開始實施，其中明確規(guī)定進行感染性微生物操作或檢測等中高風險活動的實驗室需要依法進行生物安全實驗室備案，生物安全上升到國家戰(zhàn)略層面，社會各層面也積極推動完善生物安全工作。病原微生物實驗室的生物安全備案工作是保證感染性微生物相關的檢驗、生產活動合法合規(guī)的重中之重。通過備案能夠有效提升生物實驗室的基礎建設、管理水平和安全意識，強化主管部門的督查監(jiān)管作用。本文對無錫市2021年生物安全備案情況進行階段性總結，分析梳理備案過程中發(fā)現(xiàn)的常見問題，分析生物安全實驗室備案的下一步工作重點，為準備申請備案的單位提供借鑒。

1 對象與方法

1.1 對象

2021年無錫市轄區(qū)范圍內申請病原微生物實驗室生物安全備案的單位。

1.2 方法

（1）評審人員。備案工作由無錫市生物安全委員會組織開展，評審專家為長期工作于三級醫(yī)療機構和市疾病控制中心的實驗室生物安全領域的專家，且經(jīng)過培訓統(tǒng)一審查標準，保證了評審的一致性。

（2）評審標準?，F(xiàn)場評審標準征求生物安全委員會專家意見，依據(jù)《實驗室生物安全通用要求》（GB 19489—2008）及《病原微生物實驗室生物安全通用準則》（WS 233—2017）制定，包含硬件設施、運行管理和生物安全管理體系等內容。具體評估內容包括建筑設計設施裝飾（分區(qū)、標識、空間大小、門禁、門窗、送排風、氣流通風、給水排水、配電、照明、通信、墻壁、地面、實驗臺、櫥柜）、設備器材（消毒、廢棄物處置、應急設施、消防安全）和組織管理（人員機構、體系文件）。

（3）統(tǒng)計分析。使用Excel分析現(xiàn)場評審情況。

2 評審統(tǒng)計分析

2.1 申報備案機構基本情況

2021年無錫市共有40 家單位申請病原微生物實驗室備案，均為初次備案申請，實驗室的生物安全防護水平均為二級（BSL-2），包括醫(yī)療機構29 家，企業(yè)11家。其中醫(yī)療機構又包括6 個類別，分別是：綜合醫(yī)院、?？漆t(yī)院、社區(qū)衛(wèi)生服務中心、核酸檢測基地、疾病控制中心、療養(yǎng)院，具體數(shù)量分布見表1。3 家綜合醫(yī)院和4 家?？漆t(yī)院均為二級醫(yī)院，40 家單位中有19家進行了新冠核酸檢測工作的備案。

表1 病原微生物實驗室備案申報單位類別組成

無錫市生物安全備案活動已經(jīng)開展多年，主要的醫(yī)療機構已經(jīng)完成備案，總體備案工作穩(wěn)步進行，備案情況見表2（數(shù)據(jù)截至2021年12月31日）。因此，2021年申請備案的主要群體為相關企業(yè)、二級醫(yī)療機構、社區(qū)衛(wèi)生服務中心、核酸檢測基地。

表2 全市醫(yī)療衛(wèi)生機構病原微生物實驗室備案情況

2.2 現(xiàn)場評審情況

通過專家現(xiàn)場評審，對于硬件設施、運行管理和生物安全管理體系的具體方面進行檢查，發(fā)現(xiàn)不合規(guī)范較多的審查項目主要集中在分區(qū)布局、路線標識、門禁系統(tǒng)、儀器設備、廢棄物處置、消防設施、應急設備、氣流負壓、生物安全制度建設和人員培訓，每個審查項目不符合規(guī)范單位的數(shù)量見表3。

表3 實驗室現(xiàn)場評審不符合項情況分析

2.2.1 硬件設施

分區(qū)布局不規(guī)范的有11 家，其中?？漆t(yī)院4 家，社區(qū)衛(wèi)生服務中心2 家，核酸檢測基地5 家；主要常見問題有采樣區(qū)與檢驗區(qū)未分開、生活區(qū)與工作區(qū)未分開、物流人流與樣本運輸通道未分開、缺少清潔區(qū)；核酸檢測基地缺少輔助用房，接受樣品區(qū)大小與檢測能力不匹配，傳遞窗太小。門禁系統(tǒng)不符合規(guī)范的有17家，其中企業(yè)3 家，療養(yǎng)院1 家，?？漆t(yī)院2 家，社區(qū)衛(wèi)生服務中心6 家，核酸檢測基地5 家；主要問題有未設立門禁系統(tǒng)、不同分區(qū)緩沖間的門無互鎖功能、缺少自動閉門系統(tǒng)。儀器設備存在問題有17 家，其中包括?？漆t(yī)院2 家，綜合醫(yī)院3 家，社區(qū)衛(wèi)生服務中心2 家，核酸檢測基地10 家；主要問題有生物安全柜和高壓滅菌鍋安裝后未校驗、缺少儀器標準使用流程和使用記錄臺賬、核酸檢測基地收樣區(qū)域缺少生物安全柜、高壓滅菌鍋無法滿足檢測需要。氣流和負壓方面有2 家實驗室存在問題，均為企業(yè)，主要問題為負壓實驗室未進行壓力校驗或儀器運行后不滿足負壓條件。

2.2.2 運行管理

醫(yī)療廢棄物處理共有7 家單位不符合規(guī)范，其中企業(yè)4 家，社區(qū)衛(wèi)生服務中心2 家，檢測基地1 家；主要問題有消毒滅菌記錄不完整、沒有消毒效果指示帶、缺少消毒效果生物監(jiān)測記錄、缺少紫外消毒設備。消防設施存在問題的有13 家，其中企業(yè)2 家，疾控中心1 家，?？漆t(yī)院1 家，綜合醫(yī)院1 家，社區(qū)衛(wèi)生服務中心3 家，核酸檢測基地5 家；主要問題有缺少滅火器、滅火器類型不是適用于精密儀器的CO2滅火器。緊急撤離路線或生物危害標識不符合規(guī)范的有29 家，其中企業(yè)6 家，?？漆t(yī)院3 家，綜合醫(yī)院3 家，社區(qū)衛(wèi)生服務中心7 家，核酸檢測基地8 家，疾控中心和療養(yǎng)院各1 家；主要問題有缺少緊急撤離路線、緊急撤離路線設計不合理、缺少生物危害標識、生物危害標識未正確張貼。應急措施有問題的有19 家，其中企業(yè)3 家，疾控1 家，?？漆t(yī)院2 家，綜合醫(yī)院1 家，社區(qū)衛(wèi)生服務中心5 家，檢測基地7 家；主要問題包括無洗眼裝置、缺少應急照明、缺少急救箱。生物安全制度建設不規(guī)范的單位有21 家，其中企業(yè)6 家，療養(yǎng)院1 家，?？漆t(yī)院3 家，綜合醫(yī)院2 家，社區(qū)衛(wèi)生服務中心7 家，核酸檢測基地2 家；主要問題包括實驗室日常操作活動監(jiān)督制度不完善、生物安全風險評估不完善、未設立生物安全委員會、生物安全主要負責人不明確、沒有制定應急預案、無可行性高的安全手冊。人員培訓存在問題的有12 家單位，其中企業(yè)5 家，療養(yǎng)院1 家，專科醫(yī)院3 家，社區(qū)衛(wèi)生服務中心1 家，核酸檢測基地2 家；主要問題包括缺少實驗室人員生物安全培訓記錄、未進行應急預案演練、高壓滅菌鍋操作人員無上崗證。

3 提升生物安全實驗室備案水平的建議

隨著生物技術的發(fā)展和醫(yī)療機構服務水平的不斷提升，病原微生物相關操作的風險也有所增加。我國針對生物安全實驗室的立法建標逐步完善，病原微生物實驗室備案管理必將是一個長期工作［1］。無錫市備案工作整體穩(wěn)步推進，主要的醫(yī)療機構已經(jīng)完成備案，2021年申請備案的單位除了常規(guī)的醫(yī)療機構及企業(yè)，還有很多核酸檢測基地，新冠肺炎疫情的反復造成了核酸檢測基地的集中備案。社區(qū)衛(wèi)生服務中心、一二級醫(yī)療機構、各類企業(yè)和其他未定級醫(yī)療機構仍是接下來申報備案工作的重點對象。

生物安全實驗室備案工作應該嚴格要求，嚴防不符合要求的實驗室通過備案，現(xiàn)場評審可以有效發(fā)現(xiàn)問題，提高備案管理質量［2］。通過對現(xiàn)場評審結果分析，證實大部分申請備案的病原微生物實驗室符合備案基本要求，但是不符合規(guī)范方面也普遍存在。病原微生物實驗室建設存在問題是難以避免的，①由于建設單位缺乏相關經(jīng)驗，②實驗室建設過程缺少行業(yè)專家進行指導。由于實驗室備案工作的專業(yè)技術性，病原微生物實驗室的籌建需要更加科學合理的規(guī)劃［3］，并且在投入使用前的評審階段需要相關領域專家評估，及時整改不合規(guī)范的地方。申請備案的實驗室通過專家現(xiàn)場評審并經(jīng)過一定時間的整改后，不符合項的有效整改率達到100%，才能達到備案要求。不同類型的醫(yī)療機構存在的問題有很多共性，申請備案的相關責任人應該予以重視，籌建規(guī)劃階段就應當充分考慮這些問題，同時主管部門也需要將出現(xiàn)問題較多的方面作為評審和督察的重點。評審中出現(xiàn)的問題可以歸納為硬件設施建設不完善和運行管理機制不健全，下面進行具體情況分析，并且提出相應建議。

3.1 完善硬件設施建設

部分?？漆t(yī)院實驗室是由老舊的普通實驗室改建，缺乏整體規(guī)劃，因此存在布局分區(qū)不合理的問題，個別實驗室工作區(qū)和生活區(qū)、清潔區(qū)和污染區(qū)混亂，樣本運輸通道沒有與人員通道分離，如果操作人員的安全意識不強，很容易引起污染，造成嚴重后果。門禁系統(tǒng)和儀器設備合格率較低，均為57.5%。所有的二級病原微生物實驗室均需要加裝門禁系統(tǒng)及自動閉門系統(tǒng)［4］，切實發(fā)揮其作用，嚴格管理實驗室出入人員，減少病原潛在的外溢風險。關鍵儀器設備的定期校檢是整個實驗室安全運轉的保障，特別是生物安全柜和高壓滅菌鍋，必須要保證工作過程能發(fā)揮有效作用，安裝完成后就需要有CNAS／CMA 認證資質的第3 方檢驗機構進行校檢，使用過程中也需要定期校檢［5］，使用單位應當制定好校檢計劃，由專人負責執(zhí)行。二級實驗室中負壓條件不是必需的，可以采用自然通風，注意氣流的方向應該由清潔區(qū)流向污染區(qū)。當發(fā)生生物安全柜故障導致大量的污染因子外溢等事故時，機械通風的安全性遠高于自然通風［6］，為了提高安全性，目前備案的大部分二級實驗室采用負壓通風系統(tǒng)。負壓實驗室通風應采用全新風直流系統(tǒng)，使污染區(qū)到清潔區(qū)形成定向氣流，而不是循環(huán)空氣［7］，進行壓力校準，保證氣流穩(wěn)定。正確的負壓實驗室壓力校準應該提前開啟生物安全柜，待氣流穩(wěn)定后進行壓力校準，送風口不能位于生物安全柜等排風裝置的上方，避免形成縱向干擾和局部渦流。室內相鄰相通的區(qū)域之間應保持不小于-15 Pa的壓力梯度為宜［8］。2021年申請備案的核酸檢測基地建設時間通常較短，整體建設不夠完善，功能和布局存在一些問題。很大一部分檢測基地是移動式方艙改建，空間較小，噴灑消毒很不方便，執(zhí)行任務時標本量大，人員密集，因此生物安全風險較高［9］；缺少輔助性區(qū)域，如缺少存放試劑耗材的庫房、缺少處理醫(yī)療廢棄物的區(qū)域、樣品接收區(qū)域無法配備生物安全柜。對此，建議建設輔助用房來解決相關問題，同時注意輔助用房也要符合生物安全要求，有密封性，不可用簡易透風的集裝箱板房。

3.2 健全運行管理機制

要保證實驗室安全穩(wěn)定的運行，除了可靠的儀器設備，還要落實運行過程中的各方面安全措施。除了嚴格按照儀器操作規(guī)程進行試驗，比較關鍵的就是醫(yī)療廢物處理，滅菌效果不好會導致感染事故發(fā)生［10］。

廢棄物處置不規(guī)范主要為各類企業(yè)，缺少完整的可溯源滅菌記錄，缺少滅菌效果指示帶，難以監(jiān)測滅菌效果。高壓滅菌鍋的操作有一定危險性，需要特種設備上崗證，且需要定期校檢安全閥和壓力表，以免發(fā)生事故［11］。消防設施和應急設備是在緊急情況下必不可少，不同類型的機構均有相關問題，除了個別未配備消防設備，其他常見問題就是滅火器是干粉或水基類型，這類滅火器使用后對于儀器設備具有不可逆損傷。應急照明、急救箱、洗眼器等應急裝置的配備需要備案單位查缺補漏，切實整改到位。

現(xiàn)場評審中出現(xiàn)問題比較集中的是路線標識和生物安全管理體系建立，合格率分別為27. 5%和47.5%。緊急撤離路線和生物危害標識是備案單位最容易忽略的問題，標識系統(tǒng)能夠很好地完善生物安全管理體系，可一定程度避免生物安全事故的發(fā)生，標識系統(tǒng)應具備規(guī)范化、人性化、簡潔化的特點［12］。除了張貼相應的標識，也要加強相關培訓，提高實驗室工作人員的安全意識，確保從業(yè)人員對各種標識有正確的認識，做好相應的防護措施。生物管理體系的建立，不同類型機構之間存在較大差異，基層醫(yī)療機構和企業(yè)相對薄弱，主要原因可能是相關經(jīng)驗太少以及缺少這方面專門的負責人，生物安全管理體系文件應當包括管理手冊、程序文件和作業(yè)指導書（包括質量記錄）［13］，編寫單位應當仔細學習生物安全相關法規(guī)、標準及技術規(guī)范，做好管理體系自查工作［14］，詢問生物安全委員會的意見建議，確保建立完整的生物安全管理體系。管理制度建設還需要完善風險評估、應急預案、人員培訓；引起病原微生物實驗室生物安全事故的一個重要因素就是管理因素［15］，應避免生物實驗室的風險，進一步完善實驗室建設和生物安全管理體系，將風險降到最低。

4 結語

通過病原微生物實驗室的備案管理，可以有效減少生物安全方面的潛在風險，有助于提高實驗室建設的質量。本文重點分析了現(xiàn)場評審過程中發(fā)現(xiàn)的問題，從硬件設施建設和運行管理機制兩大方面總結了實驗室備案過程各個環(huán)節(jié)存在的常見問題，對于需要進行備案的單位具有借鑒意義。然而，病原微生物實驗室的備案過程也要結合各單位自身的實際情況，針對現(xiàn)有的設施設備進行改建改造，必須做到安全、高效。

病原微生物實驗室的管理涉及很多方面，申請單位應當對照相關要求和規(guī)定完善各方面的建設，主管部門進行備案管理時也應全面具體。對于需要備案而未完成備案的實驗室，由于不具備條件而沒有申請備案，這對于生物安全管理是一個巨大隱患，也是將來的工作重點和難點，需要不斷改進完善，應對好這方面的挑戰(zhàn)。