蔡潔璇,孫夢(mèng)迪,劉 偉,謝浩銘,張旭鑾,萬(wàn)紹兵,戴靈苓,李河諭,石達(dá)友,4,陳義洲,4

(1. 華南農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院,廣東 廣州 510642 ; 2. 深圳市普羅醫(yī)學(xué)股份有限公司,廣東 深圳 518000 ;3. 深圳邁瑞動(dòng)物醫(yī)療科技股份有限公司,廣東 深圳 518110 ; 4. 廣東省獸醫(yī)臨床重大疾病綜合防控重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,廣東 廣州 510642)

高強(qiáng)度聚焦超聲(High intensity focused ultrasound,HIFU)消融是唯一一種無(wú)創(chuàng)性熱消融技術(shù)[1],國(guó)內(nèi)從1997年開(kāi)始將其應(yīng)用于臨床治療[2]。HIFU治療具有無(wú)創(chuàng)、無(wú)出血、疼痛低和恢復(fù)快的優(yōu)點(diǎn),目前已廣泛應(yīng)用于人類子宮、肝臟、胰腺、腎臟和前列腺等器官的實(shí)體腫瘤以及骨腫瘤的治療[3]。近年來(lái),HIFU也開(kāi)始用于動(dòng)物軟組織肉瘤、肝細(xì)胞癌和骨肉瘤等的治療[4-7]。人醫(yī)在消融治療過(guò)程中,常用增強(qiáng)核磁共振成像(Nuclear magnetic resonance imaging,MRI)、增強(qiáng)計(jì)算機(jī)斷層掃描(Computed tomography,CT)和超聲造影(Contrast-enhanced ultrasound)等方法對(duì)HIFU的治療效果進(jìn)行評(píng)估。消融后可用常規(guī)超聲(Ultrasound)進(jìn)行臨床復(fù)診檢查[3],以監(jiān)測(cè)病灶消融后的變化。在獸醫(yī)臨床上,由于MRI和CT的普及度較超聲低,更常用超聲對(duì)HIFU的消融效果進(jìn)行評(píng)估。與MRI和CT相比,超聲具有無(wú)輻射、不需麻醉、費(fèi)用低、操作簡(jiǎn)單和可實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)的優(yōu)點(diǎn),但其對(duì)消融病灶的顯示能力相對(duì)較差。超聲造影在人醫(yī)臨床上常用于對(duì)肝臟和脾臟等實(shí)質(zhì)器官腫瘤的診斷,有時(shí)也用于HIFU的消融效果評(píng)估,相對(duì)于常規(guī)超聲,超聲造影能更清楚的顯示腫瘤病灶和消融灶邊界[8]。目前,關(guān)于常規(guī)超聲和超聲造影對(duì)小動(dòng)物超聲消融效果的評(píng)估研究較少,為進(jìn)一步比較常規(guī)超聲和超聲造影對(duì)HIFU消融效果的評(píng)估價(jià)值,本試驗(yàn)對(duì)實(shí)驗(yàn)犬的脾臟進(jìn)行HIFU消融后,分別用常規(guī)超聲和超聲造影對(duì)消融病灶進(jìn)行檢查,評(píng)估2種方法對(duì)消融病灶的檢查效果,為今后HIFU治療提供高效、快捷、準(zhǔn)確、經(jīng)濟(jì)的評(píng)估方法和參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 主要試劑和儀器 Sonovue造影劑,博萊科信誼藥業(yè);Phygene實(shí)驗(yàn)動(dòng)物脫毛劑,福州飛凈生物科技有限公司。20G留置針,昆山永岳醫(yī)療科技有限公司;一次性無(wú)菌三通閥,臺(tái)州銘安康醫(yī)療器械有限公司;PRO VET200獸用聚焦超聲腫瘤治療系統(tǒng),深圳普羅醫(yī)學(xué)股份有限公司;Vetus E7獸用便攜式彩色多普勒超聲系統(tǒng),深圳邁瑞動(dòng)物醫(yī)療科技有限公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 6只成年未絕育中華田園犬,雌性4只,雄性2只,平均體重為11.5 kg,正常免疫和驅(qū)蟲(chóng)。消融前對(duì)實(shí)驗(yàn)犬進(jìn)行血常規(guī)、血生化和凝血功能等檢查,確定實(shí)驗(yàn)犬處于健康狀態(tài)。試驗(yàn)期間飼喂商品化犬糧,進(jìn)行常規(guī)飼養(yǎng)管理。

1.3 試驗(yàn)方法 在實(shí)驗(yàn)犬頭靜脈安置20G留置針并連接三通閥,用丙泊酚分別對(duì)6只實(shí)驗(yàn)犬進(jìn)行誘導(dǎo)麻醉,異氟烷維持麻醉。實(shí)驗(yàn)犬仰臥保定,腹部大范圍剃毛后,使用Phygene脫毛劑脫毛、酒精脫脂、真空脫氣完成備皮處理。用常規(guī)超聲對(duì)脾臟進(jìn)行全面掃查,在脾尾最厚的部位進(jìn)行HUFI消融,消融功率為350 W,消融時(shí)間為0.1 s,每次消融間隔時(shí)間為0.1 s,每個(gè)周期消融10次,按照從點(diǎn)到面、從面到體的順序進(jìn)行。每只實(shí)驗(yàn)犬消融總時(shí)間均為30 min,消融深度距離腹壁2～3 cm。消融過(guò)程中用常規(guī)超聲進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè),當(dāng)消融完成后,將超聲調(diào)到造影模式,顯示常規(guī)超聲和超聲造影雙實(shí)時(shí)同步模式,調(diào)節(jié)常規(guī)超聲總增益為80%,超聲造影總增益為50%,機(jī)械指數(shù)(Mechanical index,MI)值為0.06。儀器調(diào)節(jié)完成后立刻用5 mL 生理鹽水配置Sonovue造影劑,配置過(guò)程中用力振搖20 s以形成微泡混懸液。按0.5 mL/只的劑量,經(jīng)留置針注入Sonovue造影劑,再快速推注5 mL生理鹽水。注射造影劑的過(guò)程用超聲對(duì)消融灶進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè),并保存造影過(guò)程的超聲視頻。造影過(guò)程中完整掃查脾臟消融灶,評(píng)估消融灶的大小、回聲和邊界。在造影雙實(shí)時(shí)模式下,測(cè)量功能支持常規(guī)超聲和超聲造影畫面同步,可同步測(cè)量消融灶相同位置在常規(guī)超聲和超聲造影下的左右徑。為了比較2種檢查方法對(duì)消融灶的測(cè)量效果,消融灶左右徑采取隨機(jī)取樣的方式。消融結(jié)束后,分別在消融后即刻(第0天)和消融后第3、7、14、21、28天重復(fù)采用常規(guī)超聲和超聲造影方法檢查消融灶的變化情況,為了探究消融灶最大上下徑在不同時(shí)期的動(dòng)態(tài)變化,超聲探頭在脾臟的長(zhǎng)軸方向完整掃查消融灶后,測(cè)量消融灶在2種檢查方法中的最大上下徑。保存圖片和測(cè)量數(shù)據(jù),進(jìn)行分析。

2 結(jié)果

2.1 2種方法檢測(cè)HIFU消融后不同時(shí)期消融灶影像變化的比較 HIFU消融后即刻(第0天)和第3、7、14、21、28天的常規(guī)超聲和超聲造影觀察結(jié)果如圖1所示,在常規(guī)超聲模式下,消融灶表現(xiàn)為同時(shí)存在高回聲、等回聲和低回聲影像,是一種混合回聲結(jié)構(gòu),周圍未消融的脾臟呈中等回聲,消融灶與正常組織的邊界較模糊,隨著時(shí)間的推移,消融灶中的高回聲逐漸變成中低回聲,消融灶邊界區(qū)域表現(xiàn)為低回聲;在超聲造影模式下,消融灶表現(xiàn)為邊界清楚的均一低回聲區(qū)域,周圍未消融的脾臟表現(xiàn)為增強(qiáng)顯影的高回聲,消融后第3天開(kāi)始,消融灶的范圍逐漸變小,但回聲影像無(wú)變化。

圖1 不同時(shí)期HIFU消融灶的常規(guī)超聲和超聲造影雙實(shí)時(shí)同步模式影像比較Fig.1 Comparison of dual real-time synchronous mode images of HIFU ablation focus zones at different time points using conventional ultrasound and contrast-enhanced ultrasoundA:第0天; B:第3天; C:第7天; D:第14天; E:第21天; F:第28天 mt:常規(guī)超聲,mc:超聲造影A: Day 0; B: Day 3; C: Day 7; D: Day 14; E: Day 21; F: Day 28mt: Conventional ultrasound; mc: Contrast-enhanced ultrasound

2.2 2種方法檢測(cè)HIFU消融后不同時(shí)期消融灶左右徑的比較 在HIFU消融后即刻(第0天)和第3、7、14、21、28天進(jìn)行常規(guī)超聲和超聲造影檢查,在雙實(shí)時(shí)同步模式下測(cè)量相同位置消融灶的左右徑,結(jié)果如表1所示,超聲造影測(cè)量消融后即刻左右徑中位數(shù)1.29(1.02,2.12)cm和消融后第3天中位數(shù)1.17(0.91,1.52)cm,明顯大于常規(guī)超聲測(cè)量所得中位數(shù)0.91(0.59,1.83)cm和1.09(0.86,1.40)cm,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),而在消融后第7、14、21、28天測(cè)量的左右徑比較中,兩者無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。

表1 不同時(shí)期常規(guī)超聲和超聲造影對(duì)消融灶左右徑的測(cè)量結(jié)果Table 1 Measurements of ablation zone left-right diameter by conventional ultrasound and contrast-enhanced ultrasound at different time points [cm,M(P25,P75),n=24]

2.3 2種方法檢測(cè)HIFU消融后不同時(shí)期消融灶最大上下徑的比較 在HIFU消融后不同時(shí)期對(duì)消融灶最大上下徑測(cè)量的結(jié)果如表2所示,2種檢查方法消融后第3天測(cè)得的結(jié)果均明顯大于消融后即刻(第0天)(P<0.05);消融后第7天測(cè)得的消融灶最大上下徑與消融后即刻(第0天)相比無(wú)明顯區(qū)別(P>0.05)。消融后第14、21和28天,在超聲造影檢查中測(cè)得的消融灶最大上下徑與消融后即刻(第0天)相比明顯減小(P<0.05),且呈持續(xù)減小的趨勢(shì);而常規(guī)超聲檢查中測(cè)得的消融灶最大上下徑均比消融后即刻(第0天)小,但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

表2 不同時(shí)期常規(guī)超聲和超聲造影對(duì)消融灶最大上下徑的測(cè)量結(jié)果Table 2 Measurements of ablation zone maximum cranio-caudal diameter by conventional ultrasound and contrast-enhanced ultrasound at different time points

3 討論

超聲造影是在常規(guī)超聲的基礎(chǔ)上注射造影劑,利用造影劑氣體微泡非線性散射與正常組織的線性散射之間的差異,使用二次諧波成像、反脈沖諧波成像和超寬帶非線性成像等成像技術(shù)[9],通過(guò)抑制正常組織的信號(hào),使得血管與周圍組織、病灶與正常組織之間形成對(duì)比,能夠更好地顯示出組織細(xì)小的血流信號(hào),是當(dāng)前的前沿超聲技術(shù)。與常規(guī)超聲相比較,超聲造影對(duì)超聲機(jī)器的配置要求更高,且使用的造影劑較昂貴[9,10]。但與增強(qiáng)MRI和增強(qiáng)CT相比較,超聲造影具有費(fèi)用較低、操作簡(jiǎn)單、無(wú)輻射、檢查過(guò)程不需麻醉和可實(shí)時(shí)觀察的優(yōu)點(diǎn)[9,10],因此廣泛應(yīng)用于人類肝臟和乳腺等腫瘤疾病的診斷。本試驗(yàn)結(jié)果顯示,HIFU消融后,在常規(guī)超聲模式下,消融灶影像表現(xiàn)為同時(shí)存在高回聲、等回聲和低回聲的混合回聲影像,消融灶邊界較模糊;在超聲造影模式下,消融灶影像表現(xiàn)為無(wú)增強(qiáng)、邊界清楚的均一低回聲,周圍未消融的脾臟增強(qiáng)顯影,消融后隨著時(shí)間的推移,消融灶的范圍逐漸變小,但回聲影像無(wú)變化。結(jié)果表明,2種方法均能顯示出消融灶范圍,但超聲造影顯示的消融灶更清晰、邊界和范圍更明顯。

本試驗(yàn)分別對(duì)麻醉前、后實(shí)驗(yàn)犬的脾臟進(jìn)行測(cè)量,未觀察到麻醉前、后實(shí)驗(yàn)犬脾臟大小發(fā)生明顯的變化,且左右徑的比較是2種檢查方法在相同時(shí)間進(jìn)行的橫向比較,麻醉前、后脾臟大小差異對(duì)比較的結(jié)果沒(méi)有影響。在HIFU消融后對(duì)消融灶的監(jiān)測(cè)中發(fā)現(xiàn),消融后即刻(第0天)和第3天超聲造影測(cè)量的消融灶左右徑明顯大于常規(guī)超聲的測(cè)量結(jié)果,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),而在消融后第7、14、21和28天測(cè)量的左右徑比較中,兩者無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05),說(shuō)明超聲造影能更清楚地顯示消融灶的左右邊界,但在后續(xù)的觀察中超聲造影對(duì)左右邊界的顯示無(wú)明顯優(yōu)勢(shì),因此可用常規(guī)超聲代替超聲造影對(duì)消融灶進(jìn)行長(zhǎng)期觀察,從而簡(jiǎn)化檢查過(guò)程、降低檢查成本。

對(duì)HIFU消融后不同時(shí)期消融灶最大上下徑測(cè)量的結(jié)果顯示,2種檢查方法消融后第3天測(cè)得的結(jié)果均明顯大于消融后即刻(第0天),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),消融后第7天測(cè)得的消融灶最大上下徑與消融后即刻(第0天)相比無(wú)明顯區(qū)別(P>0.05),說(shuō)明HIFU消融后3 d,消融灶由于熱量蓄積的作用,靶區(qū)周圍的細(xì)胞因熱應(yīng)激在1～2 d內(nèi)發(fā)生細(xì)胞凋亡[11-13],實(shí)際的消融病變范圍會(huì)比消融時(shí)顯示的范圍大,因此在臨床實(shí)際工作中,必需充分考慮消融的后延效應(yīng),消融的范圍需要謹(jǐn)慎規(guī)劃,對(duì)周圍健康區(qū)域采取一定的保護(hù)措施,避免后延效應(yīng)導(dǎo)致周圍健康組織損傷。

綜上所述,在犬脾臟超聲消融效果評(píng)估以及術(shù)后對(duì)消融灶變化的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)中,超聲造影比常規(guī)超聲更加敏感、更能準(zhǔn)確真實(shí)地顯示消融灶的位置和范圍。但為簡(jiǎn)化檢查過(guò)程、降低檢查成本也可用常規(guī)超聲對(duì)消融灶進(jìn)行術(shù)后動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)。