譚珍妮，呂春美，鄒海林

摘要 目的：探討丹曲林對心房顫動大鼠心肌纖維化及轉(zhuǎn)化生長因子-β1（TGF-β1）/Smad2信號通路的影響。方法：72只SD大鼠采用隨機(jī)數(shù)字表法分為空白對照組、模型組、丹曲林低劑量組、丹曲林高劑量組、陽性對照組、丹曲林高劑量＋SRI-011381（TGF-β激動劑）組，每組12只。丹曲林低劑量組、丹曲林高劑量組大鼠分別腹腔注射5、10 mg/kg丹曲林；陽性對照組大鼠灌胃20 mg/kg 維拉帕米；丹曲林高劑量＋SRI-011381組大鼠腹腔注射10 mg/kg丹曲林和30 mg/kg SRI-011381；空白對照組、模型組大鼠腹腔注射等體積生理鹽水，每日1次，持續(xù)4周。4周后，除空白對照組外，其余各組大鼠均按1 mL/kg尾靜脈注射乙酰膽堿-氯化鈣混合液（乙酰膽堿66 μg/mL＋氯化鈣10 mg/mL）構(gòu)建心房顫動模型，空白對照組大鼠尾靜脈注射等體積生理鹽水，每日1次，持續(xù)1周，1周后采集心電圖數(shù)據(jù)并記錄心房顫動誘發(fā)時(shí)間；彩色多普勒超聲儀檢測左室舒張末期內(nèi)徑（LVEDD）、左室縮短分?jǐn)?shù)（LVFS）、左室射血分?jǐn)?shù)（LVEF）、左室收縮末期內(nèi)徑（LVESD）的變化；蘇木精-伊紅（HE）染色檢測大鼠心肌組織病理損傷；Masson染色檢測大鼠心肌纖維化；免疫組化法檢測心肌組織中Ⅰ型膠原蛋白（COL-Ⅰ）、Ⅲ型膠原蛋白（COL-Ⅲ）表達(dá)；酶聯(lián)免疫吸附測定法（ELISA）法檢測心肌組織中腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）水平；蛋白質(zhì)免疫印跡法（Western Blot）檢測TGF-β1、p-Smad2、α平滑肌肌動蛋白（α-SMA）蛋白表達(dá)。結(jié)果：與空白對照組比較，模型組大鼠心律不齊，心肌組織病理損傷及纖維化嚴(yán)重，LVEDD、LVESD、COL-Ⅰ、COL-Ⅲ陽性表達(dá)及IL-1β、TNF-α水平以及TGF-β1、p-Smad2、α-SMA蛋白表達(dá)升高，LVFS、LVEF降低（P＜0.05）；與模型組比較，丹曲林低劑量組、丹曲林高劑量組、陽性對照組對應(yīng)指標(biāo)變化趨勢與上述相反，且丹曲林濃度越高，對應(yīng)的變化趨勢越明顯（P＜0.05）；SRI-011381減弱了高劑量丹曲林對心房顫動大鼠心肌纖維化及炎癥反應(yīng)的抑制作用。結(jié)論：丹曲林可能通過抑制TGF-β1/Smad2信號通路減輕心房顫動大鼠心肌纖維化及炎癥反應(yīng)。

關(guān)鍵詞心房顫動；心肌纖維化；丹曲林；轉(zhuǎn)化生長因子-β1/Smad2信號通路

doi：10.12102/j.issn.1672-1349.2024.04.009

Effects of Dantrolene on Myocardial Fibrosis and TGF-β1/Smad2 Signaling Pathway in Rats with Atrial Fibrillation

TAN Zhenni， LYU Chunmei， ZOU Hailin

The First Affiliated Hospital of Shaoyang College， Shaoyang 422000， Hunan， China， E-mail： a13827232348@126.com

AbstractObjective：To investigate the effects of dantrolene on myocardial fibrosis and transforming growth factor-β1（TGF-β1）/Smad2 signaling pathway in atrial fibrillation rats.Methods：Seventy-two SD rats were randomly divided into blank control group，model group，dantrolene low-dose group，dantrolene high-dose group，positive control group，dantrolene high-dose＋SRI-011381（TGF-β agonist） group，with 12 rats in each group.Dantrolene low-dose group and dantrolene high-dose group were intraperitoneally injected with 5 and 10 mg/kg dantrolene，respectively;rats in positive control group were given 20 mg/kg verapamil;rats in dantrolene high-dose＋SRI-011381 group were intraperitoneally injected with 10 mg/kg dantrolene and 30 mg/kg SRI-011381，respectively;rats in blank control group and model group were intraperitoneally injected with equal volume of normal saline once a day for 4 weeks.After 4 weeks，except for the blank control group，the rats in the other groups were injected 1 mL/kg of acetylcholine-calcium chloride mixed solution（acetylcholine 66 μg /mL＋calcium chloride 10 mg/mL） through the tail vein to construct the atrial fibrillation model.The rats in the blank control group were injected with equal volume of normal saline through the tail vein once a day for 1 week.One week later，ECG data were collected and the onset time of atrial fibrillation was recorded.The changes of left ventricular end-diastolic diameter（LVEDD），left ventricular shortening fraction（LVFS），left ventricular ejection fraction（LVEF），and left ventricular end-systolic diameter（LVESD） were detected by color Doppler ultrasound.Hematoxylin-eosin（HE） staining was used to detect pathological injury of myocardium in rats.Masson staining was used to detect myocardial fibrosis in rats.The expressions of type Ⅰ collagen（COL-Ⅰ） and type Ⅲ collagen（COL-Ⅲ） were detected by immunohistochemistry.The levels of tumor necrosis factor-α（TNF-α） and interleukin-1β（IL-1β） in myocardial tissue were detected by enzyme-linked immunosorbent assay（ELISA）.The protein expression of TGF-β1，p-Smad2 and α-smooth muscle actin（α-SMA） were detected by Western Blot.Results：Compared with the blank control group，the model group rats showed arrhythmia，serious myocardial tissue pathological damage and fibrosis，positive expression of LVEDD，LVESD，COL-Ⅰ，COL-Ⅲ，IL-1β，TNF-α，and TGF-β1，p-Smad2，α-SMA protein expression increased，LVFS，LVEF decreased（P＜0.05）.Compared with model group，the change trend of corresponding indicators in dantrolene low-dose group，dantrolene high-dose group and positive control group were opposite to the above data，and the higher the concentration of dantrolene，the more obvious the corresponding change trend（P＜0.05）.SRI-011381 attenuated the inhibitory effect of high-dose dantrolene on myocardial fibrosis and inflammation in rats with atrial fibrillation.Conclusion：Dantrolene may reduce myocardial fibrosis and inflammation in rats with atrial fibrillation by inhibiting TGF-β1/Smad2 signaling pathway.

Keywordsatrial fibrillation; myocardial fibrosis; dantrolene; transforming growth factor-β1/Smad2 signaling pathway

心房顫動（atrial fibrillation，AF）是臨床上最常見的心律失常之一，是腦卒中、心力衰竭、猝死和心血管疾病的主要原因之一，具有較高的致殘率和死亡率［1］。隨著人口老齡化的加劇，心房顫動的發(fā)病率和患病率持續(xù)上升，社會負(fù)擔(dān)不斷增加［2］。研究表明，心房顫動的主要病理基礎(chǔ)是心房重構(gòu)，包括心房電重構(gòu)、結(jié)構(gòu)重構(gòu)和神經(jīng)重構(gòu)，其中，心肌纖維化在心房結(jié)構(gòu)重構(gòu)的發(fā)生和發(fā)展中起關(guān)鍵作用［3］。丹曲林（dantrolene，DA）是一種蘭尼堿受體拮抗劑，研究顯示，丹曲林可降低心肌梗死心力衰竭大鼠心房顫動誘導(dǎo)率，并減少心房肌纖維化［4］。而關(guān)于丹曲林減輕心房顫動大鼠心肌纖維化的具體機(jī)制尚未明確。轉(zhuǎn)化生長因子-β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）/Smad2信號通路作為調(diào)控組織纖維化的通路之一，已有研究顯示，抑制TGF-β1/Smad2信號通路可以抑制血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)的心房纖維化［5］。而丹曲林能否通過調(diào)控TGF-β1/Smad2信號通路影響心房顫動中的心肌纖維化尚不清楚。因此，本研究探究丹曲林對心房顫動大鼠心肌纖維化及TGF-β1/Smad2信號通路的影響及其作用機(jī)制。

1材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)動物

8周齡無特定病原體（SPF）級雄性SD大鼠72只，體質(zhì)量210～230 g，購自吉林大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心，許可證號為SYXK（吉）2021-0006。所有動物的使用獲得本院動物護(hù)理和使用委員會的批準(zhǔn)，并符合實(shí)驗(yàn)動物護(hù)理和使用指南。

1.2主要試劑

丹曲林（貨號：MBS5759247）、TGF-β激動劑SRI-011381（貨號：MBS5750430-C）購自艾美捷科技公司；乙酰膽堿（貨號：sl8799）購自北京康瑞納生物公司；氯化鈣（貨號：L13191）購自北京澤平生物公司；維拉帕米（verapamil，VEP）（貨號：CS-O-30814）購自深圳海思安生物公司；腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）試劑盒（貨號：EK-R38696）購自博輝生物科技（廣州）公司；白細(xì)胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）試劑盒（貨號：F15810）購自上海西唐生物公司；Masson染色試劑盒（貨號：00177B）購自上海圻明生物公司；兔源一抗Ⅰ型膠原蛋白（collagen Ⅰ，COL-Ⅰ）（貨號：ab270993）、Ⅲ型膠原蛋白（collagen Ⅲ，COL-Ⅲ）（貨號：ab6310）、TGF-β1（貨號：ab215715）、p-Smad2（貨號：ab280888）、Smad2（貨號：ab40855）、β-actin（貨號：ab8226）、辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的山羊抗兔二抗（貨號：ab205718）均購自Abcam公司；兔源一抗α平滑肌肌動蛋白（alpha smooth muscle actin，α-SMA）（貨號：YM-H0645）購自上海遠(yuǎn)慕生物公司。

1.3心房顫動大鼠模型的構(gòu)建及分組

采用隨機(jī)數(shù)字表法將72只SD大鼠分為空白對照組、模型組、丹曲林低劑量組、丹曲林高劑量組、陽性對照組、丹曲林高劑量＋SRI-011381（TGF-β激動劑）組，每組12只。丹曲林低劑量組、丹曲林高劑量組大鼠分別腹腔注射5、10 mg/kg丹曲林［4］；陽性對照組大鼠灌胃20 mg/kg 維拉帕米［6］；丹曲林高劑量＋SRI-011381組大鼠腹腔注射10 mg/kg丹曲林和30 mg/kg的SRI-011381［7］；空白對照組、模型組大鼠腹腔注射等體積生理鹽水，每日1次，持續(xù)4周。4周后，除空白對照組外，其余各組大鼠均按1 mL/kg尾靜脈注射乙酰膽堿-氯化鈣混合液（乙酰膽堿66 μg/mL＋氯化鈣10 mg/mL）構(gòu)建心房顫動模型［8-10］，空白對照組大鼠尾靜脈注射等體積生理鹽水，每日1次，持續(xù)1周，1周后進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

1.4心電圖數(shù)據(jù)的采集

應(yīng)用1%戊巴比妥鈉麻醉大鼠后，利用電子心電圖機(jī)進(jìn)行肢體導(dǎo)聯(lián)，采集心電圖數(shù)據(jù)并記錄心房顫動誘發(fā)時(shí)間。

1.5心功能指標(biāo)的檢測

利用彩色多普勒超聲儀檢測大鼠左室舒張末期內(nèi)徑（left ventricular end diastolic diameter，LVEDD）、左室收縮末期內(nèi)徑（left ventricular end systolic diameter，LVESD）、左室縮短分?jǐn)?shù)（left ventricular fractional shortening，LVFS）、左室射血分?jǐn)?shù)（left ventricular ejection fractions，LVEF）。

1.6蘇木精-伊紅（HE）染色檢測大鼠心肌組織病理學(xué)變化

每組選取6只大鼠，麻醉并處死大鼠，收集心肌組織并在4%多聚甲醛中固定24 h，經(jīng)脫水、石蠟包埋、切片后，用HE染色。在光學(xué)顯微鏡下觀察組織切片的病理變化。

1.7Masson染色檢測大鼠心肌纖維化

取1.6中的心肌組織切片，按照Masson染色試劑盒步驟進(jìn)行Masson染色，每張切片隨機(jī)選取6個(gè)視野，用光學(xué)顯微鏡觀察心肌組織纖維化情況，Image J軟件用于分析膠原面積。膠原面積百分?jǐn)?shù)（%）＝藍(lán)染區(qū)域面積/整個(gè)視野面積×100%。

1.8免疫組化法檢測心肌組織中COL-Ⅰ、COL-Ⅲ表達(dá)

取1.6中的心肌組織切片，將切片脫蠟、水化、抗原修復(fù)后，加入一抗COL-Ⅰ（1∶1000）、COL-Ⅲ（1∶2 000）在4 ℃下過夜孵育，再將切片與山羊抗兔二抗（1∶1 000）一起溫育1 h，再進(jìn)行DAB顯色、蘇木精復(fù)染，最后在光學(xué)顯微鏡下觀察心肌組織中COL-Ⅰ、COL-Ⅲ的表達(dá)。

1.9酶聯(lián)免疫吸附測定法（ELISA）檢測心肌組織中TNF-α、IL-1β水平

每組選取剩余的6只大鼠，麻醉并處死大鼠，收集心肌組織，嚴(yán)格按照試劑盒操作步驟檢測心肌組織勻漿中IL-1β、TNF-α水平。

1.10蛋白免疫印跡法（Western Blot）檢測TGF-β1、p-Smad2、α-SMA蛋白表達(dá)

取1.9中的心肌組織，用含有蛋白酶抑制劑混合物的RIPA裂解緩沖液提取總蛋白。將50 μg蛋白質(zhì)經(jīng)電泳、轉(zhuǎn)膜、封閉后，將膜與一抗TGF-β1（1∶2 000）、Smad2（1∶1 000）、p-Smad2（1∶2 000）、α-SMA（1∶1 000）、β-actin（1∶2 000）在4 ℃下孵育過夜，然后與HRP偶聯(lián)的二抗（1∶1 000）孵育1 h。采用Image LabTM軟件分析蛋白質(zhì)的相對表達(dá)水平。

1.11統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用GraphPad Prism 8.0.1軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。符合正態(tài)分布的定量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，采用單因素方差分析和Tukey檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1丹曲林對心房顫動大鼠心房顫動誘發(fā)時(shí)間的影響

心電圖顯示，空白對照組可見明顯p波，心率正常；模型組、丹曲林低劑量組、丹曲林高劑量組、陽性對照組、丹曲林高劑量＋SRI-011381組中的p波被不規(guī)則的f波代替，呈現(xiàn)不同程度的心律不齊。詳見圖1。空白對照組大鼠無心房顫動發(fā)生；與模型組比較，丹曲林低劑量組、丹曲林高劑量組、陽性對照組大鼠心房顫動誘發(fā)時(shí)間延長（P＜0.05）；與丹曲林低劑量組比較，丹曲林高劑量組、陽性對照組大鼠心房顫動誘發(fā)時(shí)間延長（P＜0.05）；與丹曲林高劑量組比較，丹曲林高劑量＋SRI-011381組大鼠心房顫動誘發(fā)時(shí)間縮短（P＜0.05）。詳見表1。圖1丹曲林對心房顫動大鼠心電圖的影響

2.2丹曲林對心房顫動大鼠心功能的影響

與空白對照組比較，模型組LVEDD、LVESD升高，LVFS、LVEF降低（P＜0.05）；與模型組比較，丹曲林低劑量組、丹曲林高劑量組、陽性對照組LVEDD、LVESD降低，LVFS、LVEF升高（P＜0.05）；與丹曲林低劑量組比較，丹曲林高劑量組、陽性對照組LVEDD、LVESD降低，LVFS、LVEF升高（P＜0.05）；與丹曲林高劑量組比較，丹曲林高劑量＋SRI-011381組LVEDD、LVESD升高，LVFS、LVEF降低（P＜0.05）。詳見表2。

2.3丹曲林對心房顫動大鼠心肌組織病理損傷的影響

空白對照組大鼠心肌細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整，排列整齊；模型組大鼠心肌細(xì)胞結(jié)構(gòu)異常，細(xì)胞腫脹且排列無規(guī)則；與模型組比較，丹曲林低劑量組、丹曲林高劑量組、陽性對照組大鼠心肌組織病理損傷有所改善；與丹曲林低劑量組比較，丹曲林高劑量組、陽性對照組大鼠心肌組織病理損傷減輕；與丹曲林高劑量組比較，丹曲林高劑量＋SRI-011381組大鼠心肌組織病理損傷嚴(yán)重。詳見圖2。

2.4丹曲林對心房顫動大鼠心肌纖維化的影響

與空白對照組比較，模型組大鼠膠原面積百分?jǐn)?shù)增加（P＜0.05）；與模型組比較，丹曲林低劑量組、丹曲林高劑量組、陽性對照組大鼠膠原面積百分?jǐn)?shù)降低（P＜0.05）；與丹曲林低劑量組比較，丹曲林高劑量組、陽性對照組大鼠膠原面積百分?jǐn)?shù)降低（P＜0.05）；與丹曲林高劑量組比較，丹曲林高劑量＋SRI-011381組大鼠膠原面積百分?jǐn)?shù)升高（P＜0.05）。詳見圖3、表3。

2.5丹曲林對心房顫動大鼠心肌組織中COL-Ⅰ、COL-Ⅲ表達(dá)的影響

與空白對照組比較，模型組大鼠心肌組織中COL-Ⅰ、COL-Ⅲ陽性表達(dá)增多；與模型組比較，丹曲林低劑量組、丹曲林高劑量組、陽性對照組大鼠心肌組織中COL-Ⅰ、COL-Ⅲ陽性表達(dá)減少；與丹曲林低劑量組比較，丹曲林高劑量組、陽性對照組大鼠心肌組織中COL-Ⅰ、COL-Ⅲ陽性表達(dá)減少；與丹曲林高劑量組比較，丹曲林高劑量＋SRI-011381組大鼠心肌組織中COL-Ⅰ、COL-Ⅲ陽性表達(dá)增多。詳見圖4。

2.6丹曲林對心房顫動大鼠心肌組織中TNF-α、IL-1β水平的影響

與空白對照組比較，模型組TNF-α、IL-1β水平升高（P＜0.05）；與模型組比較，丹曲林低劑量組、丹曲林高劑量組、陽性對照組TNF-α、IL-1β水平降低（P＜0.05）；與丹曲林低劑量組比較，丹曲林高劑量組、陽性對照組TNF-α、IL-1β水平降低（P＜0.05）；與丹曲林高劑量組比較，丹曲林高劑量＋SRI-011381組TNF-α、IL-1β水平升高（P＜0.05）。詳見表4。

2.7丹曲林對心房顫動大鼠心肌組織中TGF-β1/Smad2通路蛋白及纖維化相關(guān)蛋白α-SMA表達(dá)的影響

與空白對照組比較，模型組大鼠心肌組織中TGF-β1、p-Smad2、α-SMA蛋白表達(dá)升高（P＜0.05）；與模型組比較，丹曲林低劑量組、丹曲林高劑量組、陽性對照組大鼠心肌組織中TGF-β1、p-Smad2、α-SMA蛋白表達(dá)降低（P＜0.05）；與丹曲林低劑量組比較，丹曲林高劑量組、陽性對照組大鼠心肌組織中TGF-β1、p-Smad2、α-SMA蛋白表達(dá)降低（P＜0.05）；與丹曲林高劑量組比較，丹曲林高劑量＋SRI-011381組大鼠心肌組織中TGF-β1、p-Smad2、α-SMA蛋白表達(dá)升高（P＜0.05）。詳見圖5、表5。

3討論

心肌纖維化在心房顫動的發(fā)生發(fā)展過程中具有重要作用［11］。乙酰膽堿-氯化鈣混合液誘導(dǎo)心房顫動是常用于構(gòu)建心房顫動模型的方式之一［12］。本研究利用此方法構(gòu)建心房顫動大鼠模型，結(jié)果顯示，與空白對照組比較，模型組大鼠心律不齊，心肌組織病理損傷及心肌纖維化嚴(yán)重，心功能指標(biāo)LVEDD、LVESD升高，LVFS、LVEF降低，提示心房顫動大鼠模型構(gòu)建成功。α-SMA、COL-Ⅰ、COL-Ⅲ是常用于評估心肌纖維化的指標(biāo)，其表達(dá)越高，表明纖維化程度越嚴(yán)重［13］。本研究結(jié)果顯示，模型組大鼠心肌組織中COL-Ⅰ、COL-Ⅲ陽性表達(dá)及α-SMA蛋白表達(dá)明顯高于空白對照組，再次證明了心房顫動模型大鼠心肌纖維化嚴(yán)重。炎癥與心房顫動的病理生理學(xué)有關(guān)，過多的炎癥介質(zhì)擴(kuò)散到心房組織中，改變心房組織的結(jié)構(gòu)和電特性，進(jìn)而增加心房顫動的可誘導(dǎo)性［14］。與空白對照組比較，模型組TNF-α、IL-1β水平升高，提示除了心肌纖維化外，炎癥反應(yīng)也參與了心房顫動的進(jìn)展。

丹曲林作為一種蘭尼堿受體阻滯劑，已被批準(zhǔn)用于治療慢性痙攣、惡性高熱和抗精神病惡性綜合征的治療［15］。關(guān)于丹曲林在心血管疾病方面的研究較多，如丹曲林可降低心肌缺血再灌注小鼠室性心律失常的易感性［16］；丹曲林干預(yù)可改善慢性心力衰竭大鼠心功能［17］；丹曲林能夠拮抗糖尿病家兔心房肌纖維化［18］。以上研究均表明丹曲林可抑制心血管疾病的進(jìn)展，與本研究結(jié)果一致。本研究也顯示，丹曲林可抑制心房顫動大鼠炎癥反應(yīng)、心肌組織病理損傷及纖維化，改善心功能及心率，且丹曲林濃度越高對應(yīng)的趨勢越明顯，而丹曲林高劑量組與陽性對照組上述對應(yīng)指標(biāo)變化的比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示丹曲林可對心房顫動大鼠發(fā)揮保護(hù)作用。

TGF-β1是纖維化、炎癥等病理疾病發(fā)展的主要介質(zhì)，其作用由Smad2分子信號所介導(dǎo)［19］。研究顯示，抑制TGF-β1/Smad2信號通路可減輕博來霉素誘導(dǎo)的小鼠肺纖維化［20］；抑制TGF-β1可以改善四氯化碳誘導(dǎo)的肝纖維化［21］；降低受損心肌組織中TGF-β1蛋白表達(dá)水平能發(fā)揮對心肌梗死大鼠心肌組織的保護(hù)作用［22］。而關(guān)于TGF-β1/Smad2通路在心房顫動大鼠心肌纖維化中的作用鮮有報(bào)道。本研究顯示，與模型組比較，丹曲林低劑量組、丹曲林高劑量組、陽性對照組大鼠心肌組織中TGF-β1、p-Smad2蛋白表達(dá)降低，且丹曲林濃度越高，對應(yīng)蛋白質(zhì)表達(dá)降低的趨勢越明顯，而丹曲林高劑量組與陽性對照組對應(yīng)蛋白質(zhì)表達(dá)變化差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，推測丹曲林可能通過抑制TGF-β1/Smad2通路抑制心房顫動大鼠心肌纖維化及炎癥反應(yīng)。為了證明該猜想的合理性，本研究在高劑量丹曲林干預(yù)的基礎(chǔ)上再加TGF-β激動劑SRI-011381處理心房顫動大鼠，結(jié)果顯示，SRI-011381減弱了高劑量丹曲林對心房顫動大鼠心肌纖維化及炎癥反應(yīng)的抑制作用，證實(shí)了丹曲林可能通過抑制TGF-β1/Smad2通路抑制心房顫動大鼠心肌纖維化及炎癥反應(yīng)。

綜上所述，丹曲林可能通過抑制TGF-β1/Smad2通路抑制心房顫動大鼠心肌纖維化及炎癥反應(yīng)。丹曲林可能成為治療心房顫動的潛在藥物。然而，本研究尚存在不足之處，丹曲林對心房顫動大鼠心肌纖維化及炎癥反應(yīng)的抑制作用涉及的通路較多，有待后續(xù)進(jìn)一步探究。

參考文獻(xiàn)：

［1］HE D，RUAN Z，SONG G X，et al.miR-15a-5p regulates myocardial fibrosis in atrial fibrillation by targeting Smad7［J］.Peer J，2021，9（1）：e12686.

［2］LIPPI G，SANCHIS-GOMAR F，CERVELLIN G.Global epidemiology of atrial fibrillation：an increasing epidemic and public health challenge［J］.International Journal of Stroke，2021，16（2）：217-221.

［3］WIJESURENDRA R S，CASADEI B.Mechanisms of atrial fibrillation［J］.Heart，2019，105（24）：1860-1867.

［4］NOFI C，ZHANG K，TANG Y D，et al.Chronic dantrolene treatment attenuates cardiac dysfunction and reduces atrial fibrillation inducibility in a rat myocardial infarction heart failure model［J］.Heart Rhythm，2020，1（2）：126-135.

［5］LV W，ZHANG L，CHENG X C，et al.Apelin inhibits angiotensin Ⅱ-induced atrial fibrosis and atrial fibrillation via TGF-β1/Smad2/α-SMA pathway［J］.Front Physiol，2020，11（1）：1-10.

［6］劉維琴，馬清華，牟霞.丹參酮ⅡA對房顫大鼠心房肌組織LTCCα1c mRNA表達(dá)的干預(yù)研究［J］.中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2013，19（4）：199-202.

［7］YAO C L，ZHOU X J，WENG W D，et al.Aligned nanofiber nerve conduits inhibit alpha smooth muscle actin expression and collagen proliferation by suppressing TGF-β1/SMAD signaling in traumatic neuromas［J］.Experimental and Therapeutic Medicine，2021，22（6）：1414.

［8］舒禮良，黃功成，郝爽，等.紫草素抑制ERK1/2-NF-κB通路對大鼠心房顫動的改善作用［J］.解放軍醫(yī)學(xué)雜志，2021，46（8）：757-762.

［9］ZHU J，ZHU N，XU J A.miR-101a-3p overexpression prevents acetylcholine-CaCl2-induced atrial fibrillation in rats via reduction of atrial tissue fibrosis，involving inhibition of EZH2［J］.Molecular Medicine Reports，2021，24（4）：740.

［10］LI Y，SONG B X，XU C J.Effects of Guanfu total base on Bcl-2 and Bax expression and correlation with atrial fibrillation［J］.Hellenic Journal of Cardiology，2018，59（5）：274-278.

［11］LIU L，SU J，LI R，et al.Changes in intestinal flora structure and metabolites are associated with myocardial fibrosis in patients with persistent atrial fibrillation［J］.Front Nutr，2021，8（1）：1-14.

［12］王鑰，陳斌，盧悟廣，等.紫草素對乙酰膽堿-氯化鈣混合液誘導(dǎo)的房顫大鼠的保護(hù)作用研究［J］.南京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2020，36（1）：78-82.

［13］LIU M，AI J，SHUAI Z，et al.Adropin alleviates myocardial fibrosis in diabetic cardiomyopathy rats：a preliminary study［J］.Front Cardiovasc Med，2021，8（1）：1-8.

［14］ZHU X，ZHANG X G，CONG X P，et al.ANGPTL4 attenuates Ang Ⅱ-induced atrial fibrillation and fibrosis in mice via PPAR pathway［J］.Cardiology Research and Practice，2021，2021：1-10.

［15］ROMN M，RAMREZ J M，MORALES M，et al.Significant reduction of vascular reactivity with dantrolene and nimodipine in diabetic rats：a potential approach to cerebral vasospasm management in diabetes［J］.Pharmacological Reports，2020，72（1）：126-134.

［16］雷遷，呂娟娟，康新江，等.丹曲林對心肌缺血再灌注小鼠室性心律失常易感性的影響及其電生理機(jī)制：離體實(shí)驗(yàn)［J］.中華麻醉學(xué)雜志，2020（10）：1258-1262.

［17］胡冬冬，劉韜，石少波，等.丹曲林對慢性心力衰竭大鼠心室細(xì)胞鈣運(yùn)轉(zhuǎn)及心功能的影響［J］.中國醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2020，17（17）：4-8.

［18］陸建洪，翟昌林，陳捷.丹曲林對糖尿病兔心房重構(gòu)及氧化應(yīng)激的影響［J］.中國現(xiàn)代醫(yī)生，2011，49（35）：7-8;55;161.

［19］SHERIF I O，ALSHAALAN A A，AL-SHAALAN N H.Renoprotective effect of vildagliptin following hepatic ischemia/reperfusion injury［J］.Renal Failure，2020，42（1）：208-215.

［20］LV Q，WANG J J，XU C Q，et al.Pirfenidone alleviates pulmonary fibrosis in vitro and in vivo through regulating Wnt/GSK-3β/β-catenin and TGF-β1/Smad2/3 signaling pathways［J］.Molecular Medicine，2020，26（1）：49.

［21］HERMANSYAH D，PUTRA A，MUHAR A，et al.Mesenchymal stem cells suppress TGF-beta release to decrease α-SMA expression in ameliorating CCl4-induced liver fibrosis［J］.Medical Archives，2021，75（1）：16.

［22］黃永亮，李恩，汪濤.瑞舒伐他汀對心肌梗死后大鼠心肌組織中α-SMA、TGF-β1表達(dá)的影響［J］.鄭州大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版），2015，50（2）：232-236.

（收稿日期：2022-06-19）

（本文編輯鄒麗）