劉旭春?姚羽?付曉麗?王丹?張玲變?周曉溪

摘要：目的 對注射用氨芐西林鈉的質(zhì)量進行評價。方法 采用法定標準結(jié)合探索性研究對95批次注射用氨芐西林鈉進行檢驗，并與往年的兩次國抽結(jié)果進行縱向比較，評價本品的質(zhì)量狀況。結(jié)果 按法定標準檢驗，95批次樣品全部符合規(guī)定。原料為冷凍干燥和溶媒結(jié)晶工藝的產(chǎn)品在堿度、有關(guān)物質(zhì)、水分、含量等方面存在明顯差異。表現(xiàn)為冷凍干燥工藝的產(chǎn)品堿度相對較低，含量（按無水物計算）相對較低，雜質(zhì)量、水分相對較高。探索性研究表明，在加速試驗條件下放置，隨著時間的增長，原料為冷凍干燥工藝的產(chǎn)品顏色加深，雜質(zhì)增大；而溶媒結(jié)晶工藝的產(chǎn)品顏色和雜質(zhì)變化較小。結(jié)論 注射用氨芐西林鈉總體質(zhì)量較好，采用溶媒結(jié)晶工藝為原料的產(chǎn)品質(zhì)量相對更優(yōu)，原料是影響本品質(zhì)量的主要因素。

關(guān)鍵詞：注射用氨芐西林鈉；質(zhì)量評價；生產(chǎn)工藝

中圖分類號：R978.1文獻標志碼：A

Quality evaluate of ampicillin sodium for injection

Abstract Objective To evaluate the quality of ampicillin sodium for injection. Methods The quality of this product was assessed by conducting tests on 95 batches of samples using both the statutory standard procedures and exploratory research methods. Additionally， the product's quality was reviewed by comparing its results with three national random drug testing outcomes over a period of time. Results According to the statutory standards， 95 batches of samples all met the requirements. There were obvious differences in alkalinity， related substances， water and the content of samples between freeze-drying and solvent crystallization processes. The alkalinity and content calculated by anhydrous substance of freeze-dried products were relatively low. The impurities and moisture of freeze-drying products were relatively high. Under the condition of the accelerated test， the exploratory study showed that the color of raw materials with the freeze-drying process was deepened and the impurities increased， with the passage of time. However， the color and impurity of the products changed little in the process of solvent crystallization. Conclusions The quality of ampicillin sodium for injection was generally of good quality. The quality of products using the solvent crystallization process as the raw material was relatively better. The production process of the raw material was the main factor affecting the quality of the product.

Key words Ampicillin sodium for injection; Quality evaluation; Production process

氨芐西林鈉為廣譜半合成青霉素類抗生素，主要用于治療敏感細菌所致的呼吸道感染、泌尿系統(tǒng)感染、消化道感染、耳鼻喉感染、皮膚及軟組織感染等[1-2]。注射用氨芐西林鈉由氨芐西林鈉無菌原料直接分裝得到。目前，氨芐西林鈉原料和注射用氨芐西林鈉均收載于《中國藥典》2020年版。氨芐西林鈉原料的生產(chǎn)工藝包括溶媒結(jié)晶法和冷凍干燥法，其生產(chǎn)工藝對產(chǎn)品質(zhì)量的影響已受到關(guān)注 [3-4]。

2022年注射用氨芐西林鈉被列為國家藥品抽檢品種。本文依據(jù)現(xiàn)行質(zhì)量標準檢驗并結(jié)合探索性研究，對國內(nèi)注射用氨芐西林鈉的關(guān)鍵質(zhì)量屬性進行分析，并對2009、2011和2022年的抽檢結(jié)果進行縱向比較，探討產(chǎn)品存在的主要質(zhì)量問題，明確提高產(chǎn)品質(zhì)量的方向。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

戴安U3000高效液相色譜儀（Thermo Fisher Scientific）；賽多利斯CPA225D電子天平（Sartorius）；梅特勒V30水分滴定儀（Mettler Toledo）；戴安U3000/QE液質(zhì)聯(lián)用儀（Thermo Fisher Scientific）；Agilent 6890N氣相色譜儀（Agilent）；Malvern 2000激光粒度分析儀（Malvern Panalytical））；超純水機（ELGA）。

1.2 試藥

氨芐西林對照品（批號：130410-201908，含量：85.6%）、氨芐西林系統(tǒng)適用性對照品（批號：130618-201202）、頭孢拉定（批號：130427-201708）均購自中國食品藥品檢定研究院。乙腈為色譜純；磷酸二氫鉀、冰醋酸為分析純；水為超純水。

9個生產(chǎn)企業(yè)的95批次注射用氨芐西林鈉均為2022年國家藥品抽檢樣品，涉及19個批準文號和2個執(zhí)行標準（《中國藥典》2020年版和國家藥品監(jiān)督管理局標準YBH03372021）。其中，原料為冷凍干燥工藝的樣品有15批次，溶媒結(jié)晶工藝的有80批次。

2 試驗方法

2.1 法定標準檢驗

按照法定標準[5-6]，對注射用氨芐西林鈉進行檢驗。主要項目包括有關(guān)物質(zhì)、堿度、水分、含量測定等。

2.2 探索性研究

根據(jù)法定檢驗中出現(xiàn)的問題，通過文獻檢索[7-13]、

企業(yè)調(diào)研等，對產(chǎn)品的雜質(zhì)譜、原料藥對制劑質(zhì)量的影響、加速穩(wěn)定性試驗等方面進行研究。

2.2.1 雜質(zhì)譜研究

國家藥品監(jiān)督管理局標準YBH03372021為制劑企業(yè)Z1通過一致性評價后的執(zhí)行標準，參照此標準并結(jié)合國內(nèi)原料多來源的實際情況，通過篩選色譜柱、調(diào)整流動相比例等對有關(guān)物質(zhì)分析方法進行優(yōu)化。

采用Waters Spherisorb ODS2色譜柱（4.6 mm×

250 mm， 5 μm）；流動相見《中國藥典》2020年版二部氨芐西林鈉項下，先以流動相A-流動相B（84：16）等度洗脫，待氨芐西林峰洗脫完畢后立即按表1進行線性梯度洗脫；柱溫為30 ℃；流速為0.6 mL/min；檢測波長為254 nm；進樣體積為20 μL。

2.2.2 原料藥對制劑質(zhì)量的影響

選擇4家不同企業(yè)的氨芐西林鈉原料各1批，①采用粉末X-射線衍射法測定樣品的晶型；②依據(jù)《中國藥典》2020年版四部通則0861，測定上述原料中的殘留溶劑；③依據(jù)《中國藥典》2020年版四部通則0873，測定樣品中殘留的2-乙基己酸；④依據(jù)《中國藥典》2020年版四部通則0982，采用激光粒度分析儀對樣品的粒度分布進行測定。⑤選取不同原料來源的注射用氨芐西林鈉，參照國家藥品監(jiān)督管理局標準YBH03372021，測試其復溶時間。

2.2.3 加速穩(wěn)定性試驗

選取4家不同企業(yè)的注射用氨芐西林鈉共6批，于溫度40 ℃、相對濕度75%的條件下放置，分別于0、20、40和60 d進行測定，比較其性狀、水分、溶液的顏色、堿度、雜質(zhì)等的變化情況。

3 結(jié)果與討論

3.1 法定標準檢驗結(jié)果

按照現(xiàn)行法定標準檢驗，95批次樣品均符合規(guī)定，合格率100%。

3.1.1 有關(guān)物質(zhì)

對95批次樣品測定結(jié)果進行統(tǒng)計，氨芐西林閉環(huán)二聚體的量為0.24%～3.10%，其他總雜質(zhì)的量為0.49%～3.23%。按原料工藝比較樣品中的雜質(zhì)量，冷凍干燥工藝樣品閉環(huán)二聚體的量為1.50%～3.10%，其他總雜質(zhì)的量為1.04%～3.23%；溶媒結(jié)晶工藝樣品閉環(huán)二聚體的量為0.24%～1.16%，其他總雜質(zhì)的量為0.49%～1.45%。冷凍干燥工藝樣品閉環(huán)二聚體和其他總雜質(zhì)的量明顯大于溶媒結(jié)晶工藝樣品。

3.1.2 堿度

95批次樣品的堿度在8.79～9.64之間。按原料工藝比較樣品的堿度，冷凍干燥工藝樣品的堿度為8.79～9.24，溶媒結(jié)晶工藝樣品的堿度為9.33～9.64，冷凍干燥工藝樣品堿度明顯低于溶媒結(jié)晶工藝樣品。

3.1.3 水分

采用費休氏法測定，95批次樣品的水分為0.04%～1.28%。按原料工藝比較樣品的水分，冷凍干燥工藝樣品的水分為0.80%～1.28%，溶媒結(jié)晶工藝樣品的水分為0.04%～0.24%，冷凍干燥工藝樣品水分明顯高于溶媒結(jié)晶工藝樣品。

3.1.4 含量測定

95批次樣品按無水物計算，含量在86.01%～93.71%之間；按平均裝量計算，含量在95.67%～106.29%之間。按原料工藝比較樣品氨芐西林（按無水物計算）的含量，冷凍干燥工藝樣品的含量為86.01%～90.91%，溶媒結(jié)晶工藝樣品的含量為88.49%～93.71%，冷凍干燥工藝樣品含量（按無水物計算）明顯低于溶媒結(jié)晶工藝樣品。

3.1.5 質(zhì)量縱向比較

按法定標準檢驗，注射用氨芐西林鈉的合格率從2009年的98.61%到2022年的100%，質(zhì)量呈現(xiàn)向好趨勢。其中，產(chǎn)品的水分和雜質(zhì)量明顯下降，含量明顯增高（表2），說明該品種關(guān)鍵質(zhì)量指標的控制水平顯著提升。

3.2 探索性研究結(jié)果

3.2.1 雜質(zhì)譜研究

在《中國藥典》2020年版二部注射用氨芐西林鈉有關(guān)物質(zhì)系統(tǒng)適用性溶液的基礎(chǔ)上增加系統(tǒng)適用性溶液2（原系統(tǒng)適用性溶液命名為系統(tǒng)適用性溶液1）。系統(tǒng)適用性溶液2為樣品經(jīng)過熱破壞定位雜質(zhì)O[6]，使氨芐西林閉環(huán)二聚體和雜質(zhì)O峰的分離度大于1.5，典型的色譜圖見圖1。

通過優(yōu)化有關(guān)物質(zhì)檢測方法，共檢出19個雜質(zhì)（圖2），雜質(zhì)確認情況詳見表3。

其中，3、8、10、13、17號雜質(zhì)與氨芐西林系統(tǒng)適用性對照品比較，分別對應為氨芐西林噻唑酸、2'， 5'-二酮哌嗪-2（R）氨芐西林、氨芐西林開環(huán)二聚體、氨芐西林閉環(huán)二聚體、氨芐西林開環(huán)三聚體；4號和14號雜質(zhì)參考國家藥品監(jiān)督管理局標準YBH03372021有關(guān)物質(zhì)系統(tǒng)適用性溶液1、2的色譜圖分別確認為氨芐西林噻唑酸和雜質(zhì)O（命名參照YBH03372021，結(jié)構(gòu)式見圖3）。

3.2.2 原料藥對制劑質(zhì)量的影響

（1）晶型研究? ? 4家不同企業(yè)的氨芐西林鈉原料X-射線衍射圖有明顯差異（圖4）。A1企業(yè)和A2企業(yè)的氨芐西林鈉均為結(jié)晶性粉末，粉末X-射線衍射圖中顯現(xiàn)有多個特征衍射峰，且圖譜基本一致；B1企業(yè)和B2企業(yè)提供的冷凍干燥工藝生產(chǎn)的氨芐西林鈉，粉末X-射線衍射圖中均無明顯的衍射峰，為無定型粉末。

（2）殘留溶劑? ? 原料中的殘留溶劑均在《中國藥典》2020年版四部通則0861規(guī)定的限度范圍內(nèi)。B1和B2兩家企業(yè)冷凍干燥工藝的氨芐西林鈉原料均未檢出異丙醇，A1企業(yè)、A2企業(yè)的最大殘留溶劑分別為正丁醇和異丙醇（表4）。

（3）2-乙基己酸? ? 2家溶媒結(jié)晶工藝的氨芐西林鈉原料藥檢出2-乙基己酸，A1企業(yè)的量為0.18%，A2企業(yè)的量為0.28%；2家冷凍干燥工藝的氨芐西林鈉原料因生產(chǎn)過程中未用到2-乙基己酸，均未檢出。

（4）粒度分布? ? B1和B2企業(yè)為冷凍干燥工藝，原料粒徑相差較?。籄1和A2企業(yè)為溶媒結(jié)晶工藝，原料粒徑相差較大，A2企業(yè)的粒徑明顯比A1企業(yè)的大（表5）。

（5）復溶時間? ? 冷凍干燥工藝樣品的復溶時間明顯較短。溶媒結(jié)晶工藝樣品中，來自A1企業(yè)的原料藥復溶時間更長。A2企業(yè)的原料粒徑更大，復溶時間反而較短，可能是粒徑較大能避免藥品加水后的粘連，減少其復溶時間（表6）。

通過對95批次樣品的堿度、水分、雜質(zhì)、含量等測定結(jié)果和原料藥生產(chǎn)工藝等進行多因素相關(guān)分析，表明原料藥生產(chǎn)工藝與樣品的堿度、水分、雜質(zhì)、含量（按無水物計算）等均顯著相關(guān)（P<0.01）。說明氨芐西林鈉原料藥的生產(chǎn)工藝是影響本品質(zhì)量的主要因素。

3.2.3 加速穩(wěn)定性試驗

按《中國藥典》2020年版二部檢測樣品的性狀、水分、溶液的顏色和堿度，按優(yōu)化后的色譜條件檢測樣品有關(guān)物質(zhì)。結(jié)果顯示，樣品的堿度和水分無明顯變化；性狀和溶液的顏色變化與原料工藝相關(guān)（表7），原料為冷凍干燥工藝的樣品變化明顯，溶媒結(jié)晶工藝的樣品變化較小。

進一步比較樣品中閉環(huán)二聚體及其他總雜質(zhì)的變化趨勢，二者均呈現(xiàn)增大趨勢（圖5）。其中，原料來源為B1和B2企業(yè)的樣品增大趨勢更加明顯?？梢姡蠟槿苊浇Y(jié)晶工藝的樣品較冷凍干燥的更穩(wěn)定。

通過對3年國抽結(jié)果的縱向比較發(fā)現(xiàn)，氨芐西林鈉原料藥生產(chǎn)工藝中，質(zhì)量及穩(wěn)定性最差的噴霧干燥工藝已被淘汰，冷凍干燥工藝所占的比例也不斷下降，質(zhì)量及穩(wěn)定性最好的溶媒結(jié)晶工藝所占的比例大幅增長（圖6）。

4 結(jié)論

本次國家藥品抽檢結(jié)果顯示，國內(nèi)注射用氨芐西林鈉總體質(zhì)量較好，合格率100%。

通過標準檢驗和探索性研究發(fā)現(xiàn)，影響本品質(zhì)量的主要因素為原料藥的生產(chǎn)工藝。原料藥生產(chǎn)工藝不同，制劑質(zhì)量存在差異。溶媒結(jié)晶工藝的產(chǎn)品水分和雜質(zhì)量均小于冷凍干燥工藝產(chǎn)品，且穩(wěn)定性也優(yōu)于冷凍干燥工藝的產(chǎn)品。

通過縱向比較發(fā)現(xiàn)，氨芐西林鈉原料藥生產(chǎn)工藝有大幅改進，噴霧干燥工藝產(chǎn)品已被淘汰，冷凍干燥工藝產(chǎn)品所占的比例也不斷下降，質(zhì)量及穩(wěn)定性較好的溶媒結(jié)晶工藝產(chǎn)品所占的比例大幅增長。

參 考 文 獻

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