摘 要：目的：研究羅伊氏粘液乳桿菌WZALR30后生元在改善胃腸道功能性消化不良中的作用。方法：采用碘乙酰胺灌胃法結(jié)合改良小平臺法建立功能性消化不良大鼠模型，對消化不良大鼠灌胃1 g·kg-1羅伊氏粘液乳桿菌WZALR30后生元。結(jié)果：與模型組相比，后生元組大鼠干物質(zhì)、粗蛋白、粗脂肪的消化率和胃排空率均有顯著升高（P＜0.05）。結(jié)論：羅伊氏粘液乳桿菌WZALR30后生元具有提高消化率、促進胃動力、改善功能性消化不良的效果，在功能性食品的研究與開發(fā)中具有廣闊的應(yīng)用前景。

關(guān)鍵詞：羅伊氏粘液乳桿菌；后生元；功能性消化不良；養(yǎng)分消化率；胃排空率

The Role of Limosilactobacillus reuteri Postbiotics in Improving Gastrointestinal Functional Dyspepsia

WANG Cheng， DING Boqun， DONG Guihong， FAN Qiuping， KONG Deling， WANG Ling

（Morning Stomach Health Technology （Shandong） Co.， Ltd.， Taian 271000， China）

Abstract： Objective： To investigate the role of Limosilactobacillus reuteri WZA-LR30 postbiotics in improving gastrointestinal functional dyspepsia. Method： A functional dyspepsia rat model was established by gavage of iodoacetamide combined with an improved small platform method. The dyspepsia rats were orally administered with 1 g·kg-1 Limosilactobacillus reuteri WZA-LR30 as a derivative. Result： Compared with the model group， the digestibility of dry matter， crude protein， and crude fat， as well as gastric emptying rate， were significantly increased in the postnatal tuple rats （Plt;0.05）. Conclusion： Limosilactobacillus reuteri WZA-LR30 postbiotics has the effects of increasing digestibility， promoting gastric motility， and improving functional dyspepsia， and has broad application prospects in the research and development of functional foods.

Keywords： Limosilactobacillus reuteri; postbiotics; functional dyspepsia; nutrient digestibility; gastric emptying rate

在一項調(diào)查研究中，我國功能性消化不良的患者占比達到了23.5%[1]。目前，功能性消化不良的傳統(tǒng)治療方式主要依賴藥物干預(yù)，但這些藥物往往會帶來一些副作用。因此，尋找能減輕功能性消化不良癥狀的健康療法和天然物質(zhì)引起了廣泛關(guān)注。

羅伊氏粘液乳桿菌具有抑菌、調(diào)節(jié)腸道菌群、提高免疫功能等益生特性，雖然活菌可以迅速定植于腸道并發(fā)揮其優(yōu)勢，但其不耐高溫、穩(wěn)定性較差、以及對儲存運輸條件要求較高等，這些特性限制了產(chǎn)品的生產(chǎn)工藝和運輸儲存方式。因此，安全性更高、穩(wěn)定性更強、更易于儲存的后生元成為當下的研究熱點。2021年9月，國際益生菌和益生元科學(xué)學(xué)會（International Scientific Association for Probiotics and Prebiotics，ISAPP）發(fā)布了關(guān)于后生元定義和范圍的共識聲明，將后生元定義為“對宿主健康有益的無生命微生物和/或其成分的制劑”[2]。目前，后生元的功能研究主要集中在預(yù)防和改善肥胖、抗炎、抗腫瘤、改善腸易激綜合征、改善認知障礙以及改善免疫功能等[3]。

本研究通過測定羅伊氏粘液乳桿菌WZALR30后生元對大鼠干物質(zhì)、粗蛋白、粗脂肪養(yǎng)分消化率和胃排空率的影響，探究羅伊氏粘液乳桿菌WZALR30后生元改善功能性消化不良的效果，以期為羅伊氏粘液乳桿菌WZALR30后生元在功能性食品中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料與試驗動物

羅伊氏粘液乳桿菌WZALR30后生元；試驗動物為SPF級7日齡雄性SD乳鼠，母鼠3只，用于母乳喂養(yǎng)乳鼠，購自泰安某生物公司。

1.2 儀器與設(shè)備

FW-100粉碎機，北京市永光明醫(yī)療儀器廠；303-1型電熱恒溫培養(yǎng)箱，龍口市黃城精益電爐廠；YXQ-50A高壓滅菌器，濟南捷島分析儀器有限公司；SW-CJ-2D凈化工作臺，上海蘇凈實業(yè)有限公司；YP10002型電子天平，上海衡際科學(xué)儀器有限公司。

1.3 試驗方法

1.3.1 羅伊氏粘液乳桿菌后生元的制備

將萊菔子、絲蘭葉片、新鮮菊芋塊莖按比例混合后粉碎，加水混勻，煎煮3 h，降溫后過濾獲得發(fā)酵底物，將羅伊氏粘液乳桿菌WZALR30按照10%接種量接種到發(fā)酵底物中，35 ℃發(fā)酵48 h獲得發(fā)酵液，在120 ℃下滅菌30 min，冷卻后離心取上清液，干燥，得到羅伊氏粘液乳桿菌WZALR30后生元。

1.3.2 消化不良大鼠模型的建立和分組

參照呂林等[4]的方法進行消化不良大鼠模型的建立和分組。

（1）消化不良大鼠模型的建立。將7日齡乳鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)3 d后，隨機選取20只進行造模，每日每只灌胃0.2 mL 0.1%蔗糖碘乙酰胺溶液（每日1次，連續(xù)造模6 d）。喂養(yǎng)至22日齡時，將乳鼠與母鼠分籠，改用全價顆粒飼料喂養(yǎng)乳鼠。喂養(yǎng)至43日齡時，連續(xù)14 d，對大鼠進行改良小平臺法處理，在水槽中注入20～24 ℃清水，使水面位于平臺面下2 cm左右，每日17∶00至次日07∶00，大鼠可在小平臺上自由活動，一旦進入睡眠狀態(tài)，就會因為肌肉舒張、松弛而落入水中，無法休息，以此造成大鼠疲勞。

（2）空白組的建立。將7日齡乳鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)3 d后，隨機選取10只作為空白組，每日每只灌胃0.2 mL 2%蔗糖溶液，喂養(yǎng)至22日齡時，將乳鼠與母鼠分籠，改用全價顆粒飼料喂養(yǎng)乳鼠。

（3）消化不良大鼠分組。將造模成功的20只大鼠隨機分為模型組和后生元組，每組各10只。后生元組每天灌胃給予1 g·kg-1羅伊氏粘液乳桿菌WZALR30后生元，模型組和空白組給予等量蒸餾水，連續(xù)干預(yù)飼養(yǎng)2周。

1.3.3 養(yǎng)分消化率的測定

在飼養(yǎng)干預(yù)試驗結(jié)束前的最后5 d，每天收集大鼠糞便并均勻混合，然后，向混合糞便中加入0.5 mL 10%硫酸，攪拌均勻，置于-20 ℃冰箱保存?zhèn)溆谩嶒灂r，將樣品置于65 ℃烘箱中烘干，粉碎，并過40目篩，以便用于測定養(yǎng)分表觀消化率[5]。其中，根據(jù)《飼料中水分的測定》（GB/T 6435—2014）方法測定干物質(zhì)含量；參照《飼料中粗蛋白的測定 凱氏定氮法》（GB/T 6432—2018）方法測定粗蛋白質(zhì)含量；粗脂肪含量采用索氏提取法測定。養(yǎng)分消化率計算公式為

（1）

式中：M為食入飼料養(yǎng)分量，g；M1為糞便中的養(yǎng)分量，g。

1.3.4 胃排空率的測定

各組大鼠禁食不禁水24 h，灌胃3 mL半固體營養(yǎng)糊（配方為10 g羧甲基纖維素鈉、250 mL蒸餾水、16 g奶粉、8 g糖、8 g淀粉和2 g活性炭粉末），30 min后處死大鼠，迅速打開腹腔分離全胃，用濾紙拭干后稱胃全重；剪開胃體，洗去胃內(nèi)容物后，用濾紙拭干，稱胃凈重，胃排空率計算公式為

（2）

式中：m1為胃全重，g；m2為胃凈重，g；m3為灌胃總量，g。

1.4 數(shù)據(jù)處理

試驗數(shù)據(jù)采用Excel 2010進行初步整理計算和作圖，IBM SPSS Statistics 21軟件進行單因素方差分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 羅伊氏粘液乳桿菌WZALR30后生元對大鼠養(yǎng)分消化率的影響

如表1所示，與空白組相比，模型組大鼠的干物質(zhì)、粗蛋白、粗脂肪的消化率均顯著降低（P＜0.05），說明功能性消化不良大鼠模型建立成功；與模型組大鼠相比，后生元組的養(yǎng)分消化率均顯著升高（P＜0.05），干物質(zhì)、粗蛋白、粗脂肪分別升高了9.85個百分點、10.31個百分點、9.11個百分點；后生元組大鼠的干物質(zhì)、粗蛋白的消化率顯著低于空白組（P＜0.05），粗脂肪的消化率低于空白組但未見顯著差異（P＞0.05）。上述結(jié)果表明，羅伊氏粘液乳桿菌WZALR30后生元可以顯著提高功能性消化不良大鼠的干物質(zhì)、粗蛋白、粗脂肪的消化率。

2.2 羅伊氏粘液乳桿菌WZALR30后生元對大鼠胃排空率的影響

如圖1所示，與空白組相比，模型組大鼠胃排空率顯著下降（P＜0.05），說明功能性消化不良大鼠模型建立成功。與模型組相比，后生元組的大鼠胃排空率顯著升高了9.59個百分點（P＜0.05），表明羅伊氏粘液乳桿菌WZALR30后生元能提高功能性消化不良大鼠的胃排空率，有利于改善胃動力，緩解功能性消化不良癥狀。

不同字母表示存在顯著性差異（P＜0.05）；相同字母表示不存在顯著性差異（P＞0.05）。

3 討論

3.1 羅伊氏粘液乳桿菌WZALR30后生元對大鼠養(yǎng)分消化率的影響

養(yǎng)分消化率是衡量胃腸道消化能力的重要指標。曹文新等[6]研究表明，飼喂滅活酵母培養(yǎng)物能在一定程度上提高羔羊的干物質(zhì)、粗脂肪和粗蛋白的表觀消化率。戴穎[7]研究表明，給大鼠灌胃鼠李糖乳桿菌發(fā)酵液、發(fā)酵乳桿菌發(fā)酵液和混合乳酸菌發(fā)酵液，可顯著提高大鼠的粗纖維和粗脂肪的表觀消化率。黃福佳[8]給大鼠飼喂不同添加量的枯草芽孢桿菌工程菌發(fā)酵產(chǎn)物，并在不同階段收集大鼠糞便進行測定。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，隨著發(fā)酵產(chǎn)物添加量的升高，大鼠的粗蛋白和粗脂肪的表觀消化率呈上升趨勢，特別是在30～40 d階段，添加量最高的組別中，大鼠的這些消化率指標顯著提高。本研究中通過對功能性消化不良大鼠經(jīng)過一段時間的灌胃羅伊氏粘液乳桿菌WZALR30后生元，可以顯著提高其干物質(zhì)、粗蛋白、粗脂肪的養(yǎng)分消化率，與上述研究結(jié)果相似，表明羅伊氏粘液乳桿菌WZALR30后生元具有一定的改善功能性消化不良的作用。

3.2 羅伊氏粘液乳桿菌WZALR30后生元對大鼠胃排空率的影響

胃腸道疾病是我國的常見且多發(fā)的疾病之一。胃排空是評價胃腸道功能的重要指標[9]。包莉媛等[10]研究表明，山楂麥芽提取物聯(lián)合干酪乳桿菌可以協(xié)同加速食積小鼠的胃排空，有效改善高蛋白飲食誘導(dǎo)的消化不良。王智鼎等[11]對小鼠灌胃長雙歧桿菌、德氏乳桿菌保加利亞亞種、嗜酸乳桿菌、嗜熱鏈球菌4種

菌混合發(fā)酵54種原材料制成的發(fā)酵飲品。結(jié)果表明，這種混合乳酸菌發(fā)酵飲品可以降低小鼠胃內(nèi)色素殘留量，相對胃內(nèi)色素殘留率顯著低于陽性對照組，顯著提高了小鼠的胃排空能力，有效調(diào)節(jié)了腸胃功能。本研究中灌胃羅伊氏粘液乳桿菌WZALR30后生元的功能性消化不良大鼠的胃排空率得到顯著的提高，結(jié)果與上述研究結(jié)果相似，表明羅伊氏粘液乳桿菌WZALR30后生元可以通過提高胃排空率，促進胃動力，以達到改善功能性消化不良癥狀的效果。

4 結(jié)論

本試驗成功建立了功能性消化不良大鼠模型，分別測定了羅伊氏粘液乳桿菌WZALR30后生元對功能性消化不良大鼠養(yǎng)分消化率和胃排空率的影響。結(jié)果表明，對功能性消化不良大鼠灌胃羅伊氏粘液乳桿菌WZALR30后生元可以顯著升高大鼠的干物質(zhì)、粗蛋白、粗脂肪養(yǎng)分消化率和胃排空率。驗證了羅伊氏粘液乳桿菌WZALR30后生元具有提高消化率、促進胃動力、改善功能性消化不良的效果，其在功能性食品的研究與開發(fā)中具有廣闊的應(yīng)用前景。

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