［摘 要］形態(tài)學研究方法廣泛適用于基礎(chǔ)醫(yī)學及臨床醫(yī)學的科學研究。傳統(tǒng)的形態(tài)學實驗教學缺乏實驗設(shè)計以及對實驗結(jié)果的預判和分析，醫(yī)學生獨立、創(chuàng)新和創(chuàng)造性思維未能得到充分展示。基于成果導向教育（OBE）是指以成果為目標導向，以學生為本，采用逆向思維方式進行的課程體系，是一種先進的教育理念，符合國家衛(wèi)生健康委員會培養(yǎng)多層次復合型醫(yī)學人才的需求。本教學改革以 “5+3”一體化臨床醫(yī)學專業(yè)學生為研究對象，選擇 “皮膚機械性損傷修復”作為學生的科研設(shè)計課題，將改良Masson三色染色法應用到實驗課堂，并增加對染色和實驗結(jié)果的分析和討論。教學反饋及評價表明，基于OBE理念的形態(tài)學教學不僅能夠培養(yǎng)學生獨立、創(chuàng)新、創(chuàng)造性思維，而且有效提高了形態(tài)學實驗教學質(zhì)量。

［關(guān)鍵詞］基于成果導向教育；形態(tài)學研究；改良Masson三色染色；實驗教學

doi：10.3969/j.issn.1674-7593.2024.06.023

Applying OBE Concepts to Reform and Enhance “Morphological Research Methods” Experimental Teaching

Huang Kexin， Li Shulei， Guo Ying， Cui Jiayue， Liu Ying， Liu Jiamei

Department of Histology and Embryology， College of Basic Medical Sciences， Jilin University， Changchun 130021

Corresponding author： Liu Jiamei， email： liujm@jlu.edu.cn" ［Abstract］ “Morphological Research Methods” is extensively utilized in scientific research within both basic and clinical medicine. Traditional morphology experiments often lack components such as experimental design， prediction， and analysis of results， which limits the demonstration of medical students' independent， innovative， and creative thinking. Outcome based education （OBE） is a forward-thinking educational concept that focuses on being goal-oriented， student-centered， and employs reverse thinking. This approach aligns with the Ministry of Health’s objectives for cultivating multi-level， interdisciplinary medical talents. In this teaching reform initiative， “5+3” clinical medicine students were selected as the subjects of study. The topic \"skin mechanical damage repair\" was chosen for student research and design projects. The improved Masson trichrome staining method was incorporated into the experimental curriculum， with an emphasis on enhancing the analysis and discussion of staining results and experimental outcomes. Teaching feedback and evaluations indicate that morphology instruction based on the OBE framework not only fosters students’ independent， innovative， and creative thinking but also significantly enhances the quality of morphological experimental teaching.

［Key words］ Outcome based education; Morphological research; Modified Masson trichrome staining; Experimental teaching

在吉林大學白求恩醫(yī)學部的大力支持下，組織學與胚胎學系為“5+3” 一體化臨床醫(yī)學專業(yè)的學生開設(shè)了形態(tài)學研究方法課程。多次的教學反饋及教學評價表明，傳統(tǒng)的實驗教學一方面缺乏足夠的科研實驗設(shè)計環(huán)節(jié)；另一方面單一學習蘇木精-伊紅（Hematoxylin-eosin，HE）染色技術(shù)，容易導致學生思維僵化，不會根據(jù)實驗目的選擇合適的染色方法，無法達到培養(yǎng)學生科研和實踐能力的教學目標^［1］。因此，為了及時地打破實驗教學落后于創(chuàng)新應用需求的僵局，本學系積極開放和推廣更具拓展性的實驗項目，幫助醫(yī)學生真正掌握醫(yī)學形態(tài)學研究的思維方式和基本方法。在2023年春季學期基于成果導向教育（Outcome based education，OBE）理念將改良Masson三色染色應用于形態(tài)學研究方法的實驗教學中，開展以提高學生綜合素質(zhì)能力為目標的創(chuàng)新型實驗教學。本文對該教學改革的實施及評價情況作一闡述。

1 形態(tài)學研究方法實驗教學改革的必要性

傳統(tǒng)的形態(tài)學研究方法的實驗教學主要以學生操作常規(guī)的形態(tài)學染色技術(shù)HE染色過程為主，側(cè)重于驗證性實驗，授課形式單一且不利于學生操作能力的培養(yǎng)，它在實驗教學中落后于其實際創(chuàng)新應用的狀態(tài)^［2］。形態(tài)學研究方法實驗教學應及時地將本專業(yè)涌現(xiàn)的新知識、新技術(shù)融入教學中，積極開放和推廣新的實驗項目，幫助醫(yī)學生真正掌握醫(yī)學形態(tài)學研究的思維方式和基本方法。因此，形態(tài)學研究方法實驗教學內(nèi)容亟待更新，提升實驗教學質(zhì)量、培養(yǎng)學生創(chuàng)新及科研意識。

2 OBE概述

OBE理念由美國學者Spady最早提出，已被美國工程教育認證協(xié)會接受為卓越教育的正確方向^［3］。OBE理念的核心是以學生為中心、強調(diào)實踐操作及注重學生的預期學習成果，并從學生的實際需求出發(fā)培養(yǎng)創(chuàng)新能力。OBE理念的精髓是注重學生為主，教師為輔，依據(jù)學生畢業(yè)需求開展教學目標明確的新型課堂教學模式，并持續(xù)在教學過程中推進改革，從而培養(yǎng)學生的創(chuàng)新性思維方式，充分激發(fā)學生的學習積極性、主觀能動性和科學素養(yǎng)，全方位、多角度地與“兩性一度”的金課標準相一致^［4］。與傳統(tǒng)的形態(tài)學研究方法課堂比較，OBE理念教學改變了教為主、學為輔的教學模式，更趨向于如何培養(yǎng)學生的實際業(yè)務能力，以能滿足社會需求和最終實現(xiàn)人才培養(yǎng)為目標。

3 基于OBE理念和Masson三色染色法設(shè)計適用于形態(tài)學研究方法的實驗教學項目

3.1 根據(jù)學情甄選實驗教學項目

新開展實驗項目將面向 “5+3”一體化臨床醫(yī)學專業(yè)二年級學生。他們已經(jīng)完成了組織胚胎學和病理解剖學的學習，掌握正常皮膚組織的結(jié)構(gòu)和皮膚組織損傷后的炎性修復過程，但是尚欠缺系統(tǒng)的科研訓練和實踐。因此，本教學改革選擇與其知識儲備相匹配、難度較低的“皮膚機械性損傷修復”作為科研實驗設(shè)計選題。將科研實驗“皮膚機械性損傷修復”轉(zhuǎn)化為臨床醫(yī)學生的本科綜合性教學實驗，通過學生自主設(shè)計實驗，觀察和分析創(chuàng)傷前后不同區(qū)域皮膚組織的結(jié)構(gòu)，實現(xiàn)醫(yī)學生在科研中將形態(tài)學研究方法真正做到學以致用的教學目的。

3.2 以O(shè)BE為目標，引導學生獨立完成科研實驗設(shè)計

在實踐教學中以O(shè)BE理念為目標，培養(yǎng)學生的科研思維、創(chuàng)新精神和團隊協(xié)作精神。授課學生以小組為單位，以提高理論聯(lián)系實踐和基本實驗設(shè)計的能力為目的，用討論和啟發(fā)式提問的方式，調(diào)動學生的科研參與積極性。引導學生獨立完成融合HE和Masson染色的“皮膚機械性損傷修復”的實驗設(shè)計，實驗設(shè)計要求包括：實驗目的、實驗依據(jù)、設(shè)立對照組和損傷組、HE染色和Masson染色原理、實驗方法及預期實驗結(jié)果分析和探討等。

4 教學實踐過程

4.1 動物模型的建立和染色樣品的制備

由于學時有限，動物模型制備和取材制片由實驗教學輔助人員在開課前完成。本實驗改革已通過吉林大學基礎(chǔ)醫(yī)學院倫理委員會批準。給予成年雄性SD大鼠腹腔注射10%水合氯醛麻醉后，用打孔器在背部打孔，直徑1 cm，常規(guī)護理傷口。7 d后取背部正常無損皮膚和打孔處損傷后愈合皮膚，用福爾馬林液固定24 h，經(jīng)梯度酒精脫水、二甲苯透明和包埋，制作5 μm連續(xù)石蠟切片備用。

4.2 HE染色、傳統(tǒng)Masson和改良Masson三色染色及觀察分析染色結(jié)果

在實驗授課教師的指導下，由學生自己完成常規(guī)的HE染色、傳統(tǒng)Masson染色和改良Masson三色染色的實踐操作。染色結(jié)束后，學生在光學顯微鏡下觀察皮膚的微細結(jié)構(gòu)，并進行顯微攝影。授課教師根據(jù)顯微攝影的結(jié)果引導學生進行課堂討論，分析不同染色方法在皮膚損傷研究中的適用性。

4.2.1 對HE染色、傳統(tǒng)Masson染色和改良Masson三色染色結(jié)果進行對比和總結(jié)性描述 HE染色后，皮膚表皮和真皮細胞核呈藍色，真皮膠原纖維染為淡粉色；傳統(tǒng)Masson染色后，皮膚的表皮和真皮細胞核呈黑色、細胞胞質(zhì)呈淡粉色、真皮膠原纖維染為暗淡綠色；而改良Masson三色染色后，皮膚的表皮和真皮細胞核為藍黑色、細胞胞質(zhì)呈淡粉色，真皮膠原纖維染為鮮艷綠色，見圖1。初步幫助學生理解相同的組織標本經(jīng)過不同的染色處理后可呈現(xiàn)不同的光學顯微鏡下染色特點，明確對比傳統(tǒng)Masson染色和改良Masson三色染色的差異。

4.2.2 對比觀察皮膚損傷修復后不同染色結(jié)果的異同 HE染色無法顯示真皮損傷部位與正常部位膠原纖維含量的改變；而傳統(tǒng)Masson染色和改良Masson三色染色法均能有效地將肌纖維和細胞間質(zhì)中的膠原纖維區(qū)分開，可用于檢測皮膚不同損傷時間點的病理修復狀態(tài)，見圖1。傳統(tǒng)Masson染色偏暗沉不夠鮮艷，較纖細的纖維著色模糊難區(qū)分；改良Masson三色染色色彩清晰鮮艷，能夠提高纖細的膠原纖維染色清晰度。進一步以直觀的圖像幫助學生理解和明確特殊染色方法在形態(tài)學研究中的應用價值，理解根據(jù)實驗目的合理選擇實驗方法的原則和改良Masson三色染色的優(yōu)勢。

4.2.3 課程考核 課后教師綜合切片的染色質(zhì)量、學生課堂討論參與度和實驗報告完整程度給予學生考核評分。

5 教學反饋和評價

實驗教學中積極開放和推廣更具拓展性的改良Masson三色染色法的優(yōu)勢：①幫助醫(yī)學生真正掌握形態(tài)學研究的思維方式和基本方法；②膠原纖維是結(jié)締組織的重要組成成分，廣泛地分布于細胞、組織和器官之間，但是傳統(tǒng)的形態(tài)學HE染色方法卻不能有效地區(qū)分肌纖維和膠原纖維，兩者均染為紅色，無法明確顯示膠原纖維的分布情況；Masson三色染色法能特異地、有效地將肌纖維和細胞間質(zhì)中的膠原纖維區(qū)分開^［5］；③該技術(shù)在纖維瘤、慢性炎癥、動脈斑塊及瘢痕修復等研究中具有重要的科研意義，基于HE和Masson染色的對比性，能夠充分拓展學生以科研設(shè)計為核心的實驗設(shè)計環(huán)節(jié)以及對實驗結(jié)果的預判和分析能力。

為了掌握學情，了解學生對HE染色和Masson染色理解和認識程度，能夠有的放矢地針對學生的知識盲區(qū)進行課堂討論。在2023年春季學期的“皮膚機械性損傷修復”實驗教學前后分別發(fā)放調(diào)查問卷。在本實驗項目教學前，學生對于在科研中合理選擇適用的染色技術(shù)方法存在極大的盲區(qū)。而在實驗教學后的調(diào)查問卷中顯示，全部學生對HE染色和Masson染色有了深刻的理解和認識，能夠區(qū)分兩者的適用范圍。同學對圍繞科研設(shè)計展開的實驗教學滿意度高達98.76%，99.38%的同學認為以科研實驗設(shè)計為核心開展的實驗項目有助于提高自身的科研能力，92.55%的同學能夠積極參與課堂討論，認可本實驗的考核方法，見表1。

綜上所述，基于OBE理念的形態(tài)學研究方法實驗教學改革體系包括實驗教學設(shè)計、實驗教學實施及教學反饋和評價。通過開展融合HE染色和Masson三色染色技術(shù)的“皮膚機械性損傷修復”的研究型實驗項目，實現(xiàn)了三維一體的教學目標。在知識目標維度，學生掌握了HE染色和Masson染色的原理、操作流程和染色結(jié)果分析，能夠理解各種染色技術(shù)是形態(tài)學研究必不可少的研究手段，同時應該根據(jù)實驗目的合理地選擇適合的染色方法。在能力目標維度，培養(yǎng)了醫(yī)學生獨立思考和分析問題的能力，具備了HE染色和Masson染色的操作能力和初步的實驗設(shè)計能力。在情感價值目標維度，促使醫(yī)學生發(fā)展創(chuàng)造性的科研思維，養(yǎng)成嚴謹?shù)目蒲凶黠L和團結(jié)協(xié)作的品質(zhì)。將以O(shè)BE為目標的科研實驗設(shè)計應用于創(chuàng)新型的形態(tài)學實驗教學項目中，其應用效果得到了實驗課教師和學生的認可，在潛移默化中提升了實驗課教學質(zhì)量，激發(fā)了學生的科研潛能、科研思維及創(chuàng)新意識，實現(xiàn)全程全方位育人目標。

參考文獻

［1］ 顧丹丹，鈕曉音，郭曉奎，等.“新醫(yī)科”內(nèi)涵建設(shè)及實施路徑的思考［J］.中國高等醫(yī)學教育，2018（8）：17-18.

Gu D D，Niu X Y，Guo X K，et al. Defining and developing a roadmap for “New College of Medicine” ［J］. China Higher Med Educ，2018 （8）：17-18.

［2］ 李敏訥，王巖靳，方馨，等.探究型教學在組織學與胚胎學實驗課的構(gòu)建及其應用［J］.中國組織化學與細胞化學雜志，2023，23 （3）：334-338.

Li M N， Wang Y J， Fang X ，et al. Construction and application of inquiry-based teaching in histology and embryology experimental course［J］. Chin J Histochem Cytochem，2023，23 （3）：334-338.

［3］ 張鈺，楊 巍. 淺談“One health”和 “成果導向教育”雙理念應用于醫(yī)學開放創(chuàng)新實驗項目管理的實踐與探索［J］. 國際老年醫(yī)學雜志，2023，44 （6）：762-764.

Zhang Y，Yang W. Brief discussion on the practice and exploration of application of “One health” and “outcome-based education” in medical open innovation experimental project［J］. Int J Geriatr， 2023，44（6）：762-764.

［4］ 魏靜波，劉輝，江小華，等.基于OBE理念的組織胚胎學實驗課翻轉(zhuǎn)課堂教學方式的實踐［J］.中國高等醫(yī)學教育，2023（11）：131-132，135.

Wei J B，Liu H，Jiang X H，et al. Practice of flipped classroom teaching method based on OBE philosophy in histology and embryology experimental course［J］. China Higher Med Educ，2023（11）：131-132，135.

［5］ 石搏，聞春艷，黃可欣，等.病理檢驗學實驗技術(shù)與方法［M］.長春：吉林大學出版社，2020.

Shi B， Wen C Y， Huang K X， et al. Experimental techniques and methods of pathological laboratory［M］. Changchun： Jilin University Press，2020.（2024-02-20收稿）