范　晶　楊　瓊

（武漢生物工程學(xué)院，湖北 武漢 430415）お

摘 要：采用正交設(shè)計法對飽和水溶液法制備維生素E、β-環(huán)糊精包合物工藝中維生素E與β-環(huán)糊精的比例、包合時間、包合溫度進行研究，以篩選出最佳制備工藝。

關(guān)鍵詞：維生素E；β-環(huán)糊精；包合物

中圖分類號：R977.2+5文獻標識碼：A文章編號：1673-2197（2009）03-0027-02

維生素E （VitE）為脂溶性維生素，在臨床上有較廣泛的應(yīng)用，它能抑制體內(nèi)自由基反應(yīng)，促進RNA和蛋白質(zhì)的合成及增加免疫功能，具延緩衰老作用。維生素E常采用膠丸劑，亦有將其加入到各種復(fù)合維生素制劑中的方法。近來有將維生素E制成乳膏劑外用，用于治療老年性角化斑等皮膚病的報道^[1]。VitE易氧化，在各種復(fù)合制劑和乳膏中不穩(wěn)定，增加其穩(wěn)定性可提高這類制劑的質(zhì)量。采用復(fù)凝聚法制備VitE微囊，能提高穩(wěn)定性，但制備工藝復(fù)雜^[2]。制備VitE、β-環(huán)糊精（β-CD）包合物的方法有研磨法、飽和水溶液法等^[3]。本實驗使用飽和水溶液法制備VitE、β-CD包合物來提高其穩(wěn)定性。

β-環(huán)糊精（簡稱β-CD），具有一個高0.79 nm，直徑為0.60~0.65 nm的非極性筒狀空腔，這種特殊的分子結(jié)構(gòu)使β-CD可與其它極性相似，分子大小與其空腔相匹配的不同類型的分子形成包合物^[4-5]，經(jīng)包合后形成的包合物具有比客體分子更優(yōu)良的性能。β-CD不但能夠包合藥物中的有效成分，同時其作為藥物載體能夠除去藥物的異味，增加藥物的溶解度，減少藥物的揮發(fā)和氧化等，有利于提高其生物利用度^[6-7]。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

材料：β- CD （國藥集團化學(xué)試劑有限公司）；VitE （西南制藥廠）；無水乙醇（分析純）；苯二甲醇；微晶纖維素。儀器：UV-1810雙光束紫外可見分光光度計（北京普析）；SK250H超聲波清洗機（上海一恒）；電熱恒溫干燥箱（天津泰斯特）；78-1磁力攪拌器（江蘇金壇市金南儀器廠）；超級恒溫器。

1.2 實驗方法

采用飽和溶液法將β-CD制成飽和水溶液，然后將VitE加入β-CD飽和溶液中。充分攪拌或不斷振蕩一定時間，使VitE被包合，然后過濾、洗滌、干燥即得。將析出的固體包合物濾過，再用適當(dāng)?shù)娜軇┫磧?、干燥，即得穩(wěn)定包合物^[8]。

2 實驗部分

2.1 包合物最佳包合條件的選擇

影響包合的主要因素：維生素E與β-CD的配比、攪拌時間、溫度、乙醇的用量。應(yīng)利用正交設(shè)計表進行試驗，測定所得包合物中維生素E含量，然后分別按公式計算包合率的測定、回收率、包合物含量，從而確定因素主次與最佳水平，然后按照最佳包合工藝制備VitE-β-CD包合物，并測定收率、含量與回收率。

2.2 包合率的測定

精密稱取一定量β-CD 與VitE包合物置于50mL容量瓶中，加少量無水乙醇超聲振蕩使之溶解，再加無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，過濾，取濾液5mL放入50mL 容量瓶中，加無水乙醇至刻度，搖勻，在284 nm下測其吸光度A，代入線性方程得其濃度，然后計算包合率。

包合率（%）=C×50×10m×x×100%

x（%）=n1×473n1×473+n2×1135×100%

C－代入線性方程所得VitE濃度（μg/mL）

m－包合物質(zhì)量（μg）

x－包合物中VitE 的質(zhì)量百分數(shù)（%）

n1－包合前VitE的物質(zhì)的量（mol）

n2－包合前β-CD的物質(zhì)的量（mol）

1135、473分別為β-CD、VitE的相對分子質(zhì)量。

2.3 包合物含量測定

2.3.1 波長選擇

取VitE無水乙醇溶液和β-CD無水乙醇溶液，在200～400nm處進行光譜掃描，掃描速度1200nm/min， VitE在284nm處有最大吸收而β-CD沒有，故測定波長設(shè)定為284nm^[9]。 見圖1。

2.3.2 標準曲線制備

精密稱取VitE對照品約200mg，置于100mL容量瓶中，用無水乙醇配成濃度為2mg/mL對照品貯備液。分別精密量取1、2、3、4、5、6、7、8mL貯備液置于100mL容量瓶中，加無水乙醇至刻度，得到系列濃度的對照品溶液，分別于284nm處測定A值，求得回歸方程為C=235.7A-2.3765；r=0.9975。VitE濃度在25~170ug/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.3.3 回收率實驗

精密稱取VitE標準品53.8mg，用無水乙醇溶解并加入等量β-CD后用60%乙醇定容于50mL棕色容量瓶中，待溶解后測定吸收度，求得回收率為（100.2±0.68）%（n=4）。

2.4 穩(wěn)定性實驗

采用經(jīng)典恒溫法，對VitE、β-CD包合物進行了穩(wěn)定性試驗。測定了VitE、β-CD包合物在不同溫度下，不同取樣時間的藥物含量，根據(jù)這些數(shù)據(jù)計算不同溫度下的K值（見表1），用1gK對1/T回歸，計算得到VitE包合物在室溫20℃的K值為2.61×10-5，室溫20℃貯存期為169天。

VitE在室溫下密封避光保存，其含量穩(wěn)定；當(dāng)置于日光下，暴露于空氣中時，因其氧化而使含量降低， VitE經(jīng)包合后，穩(wěn)定性大為提高。

3 結(jié)論

3.1 正交試驗

為選擇最佳試驗條件而進行正交試驗設(shè)計，見表2。

3.2 方差分析

以VitE利用率作指標，對正交實驗結(jié)果進行直觀分析，由各因素極差，確定因素主次及最佳水平，再以方差分析求得各因素的F值，最后確定A1B2C1為最佳包合工藝，即VitE與β-CD配比為1∶5，包合時間為4h，包合溫度為50℃。見表4。

3.3 質(zhì)量考察

3.3.1 外觀

VitE、β-CD包合物成白色粉狀。

3.3.2 薄層層析

將VitE、β-CD包合物及VitE分別配制成一定濃度的樣品液及對照液，在經(jīng)活化的硅膠GF254 薄層板上點樣，以苯二甲醇（20∶1） 于20℃展開，涼干后，于254nm紫外光下檢查，斑點位置相同，說明VitE包合后化學(xué)結(jié)構(gòu)并無變化。

3.3.3 差熱分析法

圖2可見混合物中β-CD的吸熱峰沒有改變，而包合物圖譜與β-CD圖譜完全不同，表明VitE與β-CD已形成新物相。

參考文獻：

［1］ 張石革.維生素霜劑的制備及應(yīng)用［J］.中國醫(yī)院藥學(xué)雜志，1985， 5（2）： 28.

［2］ 馮琳，張紅梅，王景祥.維生素E微囊的制備及其穩(wěn)定性研究［J］.中國醫(yī)院藥學(xué)雜志，1997，17（1）：3.

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［4］ 王亞娜，孫俊梅，余麗，等.環(huán)糊精及衍生物藥物包合常數(shù)的測定方法及其應(yīng)用［J］.藥學(xué)進展，2004，28（1）：23-28.

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［8］ 董方言.現(xiàn)代實用中藥新劑型新技術(shù)［M］.第2版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2007.

［9］ 王霖隱，陳冠芬，劉杰，等. 高效液相色譜法測定維生素E 膠丸含量［J］.中國醫(yī)院藥學(xué)雜志，1994，14 （11）： 503.

（責(zé)任編輯：陳涌濤）