陸敏玉,唐萌

(東南大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院,環(huán)境醫(yī)學(xué)工程教育部重點實驗室,江蘇省生物材料與器件重點實驗室,江蘇南京 210009)

量子點(quantum dot,QD)是一種由Ⅲ ～Ⅴ族或Ⅱ～Ⅵ族元素組成的納米微晶體,一般是以半導(dǎo)體材料為內(nèi)核,外面包裹第 2種半導(dǎo)體材料來構(gòu)成,可以接受激發(fā)產(chǎn)生熒光。典型的 QD尺寸為 2～10 nm,具有一些傳統(tǒng)有機熒光染料所不具備的優(yōu)點:熒光強度強,穩(wěn)定性好,經(jīng)修飾以后生物相容性較好[1-2];耐光性好,熒光壽命長,抗漂白能力強[3-5];用同一激發(fā)光源激發(fā)不同尺寸的 QD,可獲得從藍(lán)到紅的一系列不同顏色的光[6-8],可同時靜態(tài)或動態(tài)觀察多種亞細(xì)胞結(jié)構(gòu),使得活體多色熒光成像成為可能;發(fā)射光譜窄且不拖尾,可減少給體與受體發(fā)射光譜的重疊,從而避免相鄰?fù)ǖ赖幕ハ喔蓴_而方便觀察[9-11]。

QD的優(yōu)異性能使之具有廣泛的應(yīng)用前景,如研究開發(fā)新型太陽能電池、發(fā)光器件、遺傳物質(zhì)的標(biāo)記、細(xì)胞蛋白標(biāo)記與跟蹤、與磁性粒子結(jié)合對腫瘤進行可視化的磁熱療等等[12-17]。隨著 QD的廣泛應(yīng)用,其毒性與生物安全性也得到了廣大科技工作者的高度重視。國內(nèi)外對 QD的細(xì)胞毒性及其作用機制方面有過較多的研究,作者就近 3年來國內(nèi)外對多種 QD(如CdTe、CdSe、CdS、CdSe/SiO2等 )從表面修飾、粒徑大小、暴露時間、暴露濃度及環(huán)境因素等方面對細(xì)胞毒性的影響及目前所公認(rèn)的細(xì)胞毒性作用機制進行綜述,同時指出 QD研究方面所存在的問題,并進一步對今后的研究進行展望。

1 QD的細(xì)胞毒性研究現(xiàn)狀

隨著合成制備技術(shù)的改進,QD必將成為最有潛力的熒光標(biāo)記物質(zhì),尤其是在活細(xì)胞和活體動物標(biāo)記領(lǐng)域的應(yīng)用。但是,目前 QD在生命科學(xué)領(lǐng)域的研究仍局限于實驗室,臨床及實際生活中的應(yīng)用尚未推廣。究其原因,主要是因為 QD是由重金屬物質(zhì)構(gòu)成,其是否會對機體產(chǎn)生副作用,是否會對環(huán)境產(chǎn)生破壞作用,這一系列疑問至今未有定論。表 1中總結(jié)出了 2008年以來國內(nèi)外對 QD細(xì)胞毒性的一系列研究。

已有的研究表明,QD表面修飾的不同、材料粒徑的大小、暴露時間及濃度的不同、細(xì)胞攝入量的多少以及外界環(huán)境的變化均會導(dǎo)致其毒性的改變。因此,對QD進行生物安全性評價需要從多方面因素綜合考慮,而不能簡單將 QD定義為“有毒”或“無毒”。

1.1 表面修飾

研究發(fā)現(xiàn) QD的表面理化性質(zhì)是影響其毒性的關(guān)鍵,已有不少課題組展開了對 QD表面修飾物的研究工作。Chan等[18]分析比較了未包裹 CdSe QD和硫化鋅包裹的 CdSe QD的毒性大小,發(fā)現(xiàn)未包裹 CdSe QD可通過線粒體依賴性途徑誘導(dǎo)人類神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞的凋亡,引起一系列生化改變,如 JNK活化、線粒體膜電位喪失、活性氧(ROS)增加、Ras和 Raf-1蛋白表達抑制等等,而這些生化變化在硫化鋅包裹的 CdSe QD染毒的細(xì)胞中則檢測不到,表明對 QD表面包裹涂層如硫化鋅能有效地降低毒性。Cho等[19]的研究也支持這個觀點,10μg?m l-1濃度下,與 CdSe/ZnSQD共培養(yǎng)的細(xì)胞存活率達 95%,而未包裹 CdTe QD共培養(yǎng)的細(xì)胞存活率均低于 40%,且不同化合物巰基丙酸、巰基乙胺、乙酰半胱氨酸修飾的 CdTe QD毒性也不一,以乙酰半胱氨酸修飾的 CdTe毒性最小。表面電荷的不同會影響物質(zhì)與體內(nèi)蛋白分子的相互作用,因此Guo等[20]對表面修飾不同電荷的 CdSe QD進行了研究,表明修飾中性粒子的 QD毒性較小。

Mahto等[21]于 2010年進一步對表面修飾的毒性進行了研究,發(fā)現(xiàn)不同修飾的 QD在細(xì)胞中的定位不同,共聚焦圖像顯示巰基乙胺 MPA包裹的 QD主要分布在胞質(zhì)區(qū),而 GA/TOPO(對表面配位基進行修飾)包裹的 QD在細(xì)胞中卻沒有發(fā)現(xiàn)。有趣的是,入胞的MPA-QD有良好的細(xì)胞相容性,而胞外的 GA/TOPOQDs細(xì)胞毒性卻很大,會明顯改變細(xì)胞形態(tài),升高細(xì)胞內(nèi)鈣濃度,產(chǎn)生 ROS等。Zhang等[22]用 HeLa細(xì)胞評價了表面偶聯(lián)鐵傳遞蛋白的 CdSe/ZnSQD的毒性,發(fā)現(xiàn)其蛋白標(biāo)記特異性較高且不會顯著影響細(xì)胞活性。這些研究表明,表面修飾物質(zhì)對 QD的毒性有顯著的影響,且不同材料 QD的毒性機制仍需進一步研究,隨著技術(shù)的發(fā)展,QD的合成修飾有望走向“綠色化、低毒化”,為 QD更廣泛的應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。

1.2 粒徑大小

QD尺寸極小,較微米級顆粒物更易穿透細(xì)胞膜等生物屏障,且不同粒徑的 QD在細(xì)胞中分布也不盡相同,因而其毒性作用也各有差異。最早于 2005年,Lovric等[23]以大鼠嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(PC12)和小鼠神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞(N9)對 CdTe QD的毒性進行了研究,發(fā)現(xiàn)小的發(fā)綠色熒光的 CdTe QD可以通過核孔進入細(xì)胞核,而體積較大的發(fā)紅色熒光 QD則分布于胞質(zhì)中。10 g?L-1濃度下,小粒徑的 CdTe QD具有更加顯著的細(xì)胞毒作用,可引起細(xì)胞染色質(zhì)凝集和細(xì)胞膜空泡變性從而導(dǎo)致細(xì)胞死亡。2009年,Li等[24]研究結(jié)果再次證實粒徑大小對其毒性的影響,低于 40μg?ml-1時,納米級的 CdSQD毒性顯著大于微米級的 CdS。

1.3 暴露時間與暴露濃度

對于 QD的時間-效應(yīng)與劑量-效應(yīng)關(guān)系,研究者們一致認(rèn)為隨著時間的延長、劑量的增加,對細(xì)胞的毒性作用是呈正比的。2006年,Delehanty等[25]以人中腎細(xì)胞(HEK293T/17)和非洲綠猴腎細(xì)胞(COS-1)對表面連接有肽的 CdSe/ZnSQD進行了一系列研究,發(fā)現(xiàn) 60～250 nmol?L-1濃度的 QD溶液作用 24 h后會對細(xì)胞產(chǎn)生顯著的毒性作用,而作用 1 h的則幾乎沒有毒性作用,認(rèn)為不同的作用時間會導(dǎo)致 QD的毒性產(chǎn)生差異。Choi等[26]的研究結(jié)果也得出了相似的結(jié)論,以 5μg?m l-1濃度的 CdTe QD分別與人乳腺癌細(xì)胞(MCF-7)共培養(yǎng) 4 h和 24 h,發(fā)現(xiàn)染毒 24 h可引起MCF-7細(xì)胞核固縮、染色質(zhì)凝集、線粒體嵴紊亂、線粒體膜通透性改變。Choi等研究過程中還發(fā)現(xiàn)低濃度的 CdTe與細(xì)胞共培養(yǎng)雖然會引起細(xì)胞輕微的染色質(zhì)重組現(xiàn)象,但是細(xì)胞并沒有進一步走向死亡程序,表明并未顯著影響細(xì)胞活性。

Tang等[27]分別以 1 nmol?L-1和 20 nmol?L-1的未包被 CdSe QD溶液對小鼠海馬神經(jīng)元原代細(xì)胞進行染毒,發(fā)現(xiàn) 20 nmol?L-1的 CdSe QD會引起細(xì)胞胞內(nèi)鈣穩(wěn)態(tài)的失調(diào),進而導(dǎo)致細(xì)胞死亡,而低濃度 QD溶液毒性較小,存在明顯的劑量依賴關(guān)系。Liu等[28]以不同的細(xì)胞株對不同的 QD進行了系統(tǒng)研究,也證實其毒性大小與暴露濃度和暴露時間有關(guān)。因此合理控制這兩個參數(shù),可以在無毒作用或最低毒作用的條件下達到生物應(yīng)用的目的。

1.4 環(huán)境因素

在實際研究過程中,研究者們會根據(jù)具體需要對QD進行包被或修飾,如偶聯(lián)不同的功能基團、包裹不同的殼層從而改變 QD的物理、化學(xué)性質(zhì)。這些修飾將會在一定程度上影響 QD結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性,進而影響QD在環(huán)境中的“狀態(tài)”。Wang等[29]評估商用聚乙二醇包裹的 CdSe/ZnSQD的穩(wěn)定性,發(fā)現(xiàn)環(huán)境低 pH值會導(dǎo)致 QD的完整性被破壞以及 Cd2+粒子的釋放,使得 QD的毒性增加。

其他外界環(huán)境因素,如光照、溶劑等對 QD的毒性也具有一定的影響作用。Chang等[30]研究紫外線的照射對 MPA-CdTe QD毒性的影響,發(fā)現(xiàn)經(jīng)紫外照射的 MPA-CdTe與細(xì)胞共培養(yǎng)后能顯著抑制細(xì)胞活性,誘導(dǎo) ROS的大量產(chǎn)生。Su等[31]發(fā)現(xiàn)非水溶性 QD制備過程中所殘留的有機溶劑也有可能對細(xì)胞產(chǎn)生毒性作用。這些研究結(jié)果表明,降低 QD的毒性不僅要著重于材料本身的選擇,還要充分考慮環(huán)境因素的交互作用。同時也表明,QD進入環(huán)境中可能會產(chǎn)生一些結(jié)構(gòu)性的變化從而具有潛在危害,為新的研究指明了方向。

2 QD毒性作用機制

QD由于其尺寸、制備原料、合成方法的多樣性,導(dǎo)致不同的 QD在化學(xué)性質(zhì)上可能有較大的差異,其引起細(xì)胞毒性機制也復(fù)雜多樣。目前公認(rèn)的毒性機制歸納如下。

2.1 合成材料本身的毒性

QD進入生物體以后,被生物體微環(huán)境腐蝕、降解或氧化光解,如在胃液等低 pH條件下,連接體質(zhì)子化后溶解發(fā)生核殼解離,使 QD穩(wěn)定降低,釋放金屬離子,對細(xì)胞產(chǎn)生損傷作用。

2005年,Kirchner等[32]研究發(fā)現(xiàn) QD溶液中游離的 Cd2+濃度與 QD的細(xì)胞毒性有關(guān),之后人們曾一度關(guān)注于 Cd2+的釋放所引起的毒性。眾所周知,Cd2+可以通過與巰基的相互作用使線粒體蛋白失活,影響線粒體生化功能。Cd2+可以與 DNA直接作用,如與DNA分子中的磷酸、堿基等結(jié)合[33],對機體具有極大的危害性。國內(nèi)外學(xué)者們對 QD的毒性與 Cd2+的相關(guān)性進行了一系列研究。CHO等[19]分析未包裹CdTe QD作用后的人乳腺癌細(xì)胞(MCF-7)中 Cd2+的濃度,發(fā)現(xiàn)與 CdTe QD共培養(yǎng)后細(xì)胞內(nèi) Cd2+濃度升高,表明 QD在培養(yǎng)液基質(zhì)中緩慢釋放出了重金屬內(nèi)核,從而對 MCF-7細(xì)胞產(chǎn)生了毒性作用。

2009年 Su等[34]設(shè)計了一系列實驗,研究了 QD毒性與 Cd2+離子的關(guān)系,以 CdCl2溶液富含 Cd2+作為對照,發(fā)現(xiàn)經(jīng)處理后細(xì)胞內(nèi) Cd2+離子濃度相同的情況下,CdTe的毒性遠(yuǎn)大于 CdCl2溶液。表明 Cd2+的確是QD毒性的重要影響因素,但是 QD的毒性不能僅僅歸結(jié)于游離的 Cd2+離子。Stern等[35]制備了非重金屬內(nèi)核銦鎵磷化物為內(nèi)核的 QD(InGaP),并與 CdSe為核的 QD進行比較,發(fā)現(xiàn) CdSe的毒性大約是 InGaP的10倍,100 nmol?L-1的 InGaP也會顯著降低細(xì)胞活性。因此,可以認(rèn)為除了 Cd2+的釋放,其他金屬離子也是細(xì)胞受損的影響因素,且不同材料在細(xì)胞中的分布不同,其具體的毒性機制還有待更深入的研究。

2.2 活性氧(ROS)自由基產(chǎn)生的毒性

研究表明,自由基通過連鎖反應(yīng)可導(dǎo)致生物膜結(jié)構(gòu)和功能的損傷,使膜蛋白流動性下降,脂質(zhì)過氧化物含量增加,與膜脂交聯(lián)形成高聚物,膜通透性改變。當(dāng)自由基濃度達到一定程度時,自由基對細(xì)胞的作用除直接損傷細(xì)胞線粒體等超微結(jié)構(gòu),更重要的是造成DNA損傷,使得染色質(zhì)凝集,細(xì)胞發(fā)生凋亡。Cd2+在有氧條件下可產(chǎn)生自由基,誘發(fā)細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)過氧化物生成,造成生物大分子氧化損傷,導(dǎo)致 DNA單鏈斷裂。

2004年,Hoshino等[36]通過 SCGE技術(shù)檢測出 QD能誘發(fā) Vero細(xì)胞顯著的 DNA損傷。2005年,Lovric等[23]發(fā)表文章認(rèn)為 CdTe QD的細(xì)胞毒性作用是由胞內(nèi)外環(huán)境中 ROS介導(dǎo)的細(xì)胞損傷所引起的,且實驗證實可被抗氧化劑所拮抗。由此掀起了學(xué)術(shù)界對 QD細(xì)胞毒性與 ROS相關(guān)性的研究。Choi等[37]研究發(fā)現(xiàn),CdTe QD可以引起成纖維瘤細(xì)胞脂質(zhì)過氧化,并且可以誘導(dǎo) Fas受體表達上調(diào)從而導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。殷海榮等[38]探討 CdTe對小鼠腹腔巨噬細(xì)胞 RAW 264.7凋亡和脂質(zhì)過氧化水平的影響時發(fā)現(xiàn),QD處理組細(xì)胞的增殖能力明顯受到抑制,且 NO、MDA含量及 SOD活性顯著上升。Tang等[39]研究也表明,QD細(xì)胞毒性是由于 ROS的產(chǎn)生,以及引起胞外鈣內(nèi)流、胞內(nèi)鈣釋放對細(xì)胞造成損傷。由此可見,ROS自由基的產(chǎn)生是QD細(xì)胞毒性的重要機制之一。

3 QD的不足

(1)QD本身粒徑極小,但經(jīng)過修飾后可能會很大,可產(chǎn)生明顯的空間位阻,在一定程度上限制其在分子生物學(xué)的應(yīng)用。

(2)某些品種 QD的生產(chǎn)制備技術(shù)尚未完全成熟,由于其制備方法的多樣性,加之成本較高,使得成品價格昂貴,因此推廣不易。

(3)對 QD進入生物體后的長期毒性研究甚少,進入機體的穩(wěn)定性、分散度、生物相容性等研究仍很匱乏,以至于尚不能應(yīng)用于人體。

4 總結(jié)與展望

為了更深入地了解 QD的性能、毒性,從而將其更廣泛地應(yīng)用于各個領(lǐng)域,研究工作可從以下幾個方面著手:

(1)QD合成工藝多元化。不同的合成原料、合成方法、表面修飾,導(dǎo)致 QD的種類繁多、毒性不一、機制不同。如何從源頭降低 QD的毒性,而又保證其熒光性能是一個至關(guān)重要的問題。

(2)加強對 QD毒性標(biāo)準(zhǔn)的研究。研究所采用的條件,如實驗細(xì)胞株、暴露濃度、暴露時間各不相同,無標(biāo)準(zhǔn)統(tǒng)一評價 QD的毒性大小。如何制定出統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)對 QD的毒性進行定量研究迫在眉睫。

(3)增加 QD在各領(lǐng)域的應(yīng)用。建立合適的模型,在基因、分子、細(xì)胞以及動物水平上進行研究,對經(jīng)口、靜脈、呼吸等多種暴露途徑產(chǎn)生的毒作用效應(yīng)進行研究,從不同領(lǐng)域如免疫系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)、生殖系統(tǒng)、毒物代謝動力學(xué)等多角度進行綜合研究,以提高 QD的使用價值以及擴大 QD的應(yīng)用范圍。

(4)注意對環(huán)境的保護。由于某些 QD如鎘本身就是有毒重金屬,進入環(huán)境中會有潛在的危害,但是防止 QD對生態(tài)環(huán)境及人類健康損害的保護措施并未出臺。如何防止商品化 QD產(chǎn)物泄漏對環(huán)境的影響以及如何處理實驗室廢棄 QD也是人們應(yīng)該關(guān)心的問題。

綜上所述,若想真正實現(xiàn) QD在各領(lǐng)域的廣泛應(yīng)用,就需要從各方面來考慮如何降低其毒性,增加其生物相容性和水溶性,進一步完善其生物效應(yīng)和安全性評價,并制定相關(guān)措施防止 QD對生態(tài)環(huán)境造成影響,真正實現(xiàn)“綠色科技”。

[1]TUC,MA X,PANTAZIS P,etal.Paramagnetic,silicon quantum dots formagnetic resonance and two-photon imaging ofmacrophages[J].JAm Chem Soc,2010,132(6):2016-2023.

[2]HSIEH SC,WANG F F,LIN C S,et al.The inhibition of osteogenesiswith human bonemarrow mesenchymal stem cells by CdSe/ZnSquantum dot labels[J].Biomaterials,2006,27(6):1656-1664.

[3]HILDERBRAND SA,WEISSLEDER R.Near-infrared fluorescence:app lication to in vivo molecu lar imaging[J].Curr Opin Chem Biol,2010,14(1):71-79.

[4]HAN R,YU M,ZHENG Q,et al.A facile synthesis of small-sized,highly photoluminescent,and monodisperse Cd-SeSQD/SiO(2)for live cell imaging[J].Langmuir,2009,25(20):12250-12255.

[5]YONGK T,ROY I,DINGH,etal.Biocompatib le near-infrared quantum dots as ultrasensitive probes for long-term in vivo imaging applications[J].Small,2009,5(17):1997-2004.

[6]WU C,SHIL,LIQ,etal.Probing the dynamic effectof cys-CdTe quantum dots toward cancer cells in vitro[J].Chem Res Toxicol,2010,23(1):82-88.

[7]PRADHAN N,BATTAGLIA D M,LIU Y C,etal.Efficient,stable,small,and water-soluble doped ZnSe nanocrystalemitters as non-cadm ium biomedical labels[J].Nano Lett,2007,7(2):312-3l7.

[8]COSTA-FERNANDEZ JM,PEREIROR,SANZ-MEDEL A,et al.The use of luminescent quantum dots for opticalsensing[J].Trends Analyt Chem,2006,25(3):207-218.

[9]王璐,王德平,黃文顯,等.水相制備硒化鎘半導(dǎo)體 QD的熒光性能[J].硅酸鹽學(xué)報,2005,33(10):1223-1230.

[10]PELLEY J L,DAAR A S,SANER M A.State of academic know ledge on toxicity and biological fate of quantum dots[J].Toxicol Sci,2009,112(2):276-296.

[11]RON H.A toxicologic review of quantum dots:toxicity depends on physicochem icaland environmental factors[J].Environ Health Perspect,2006,114(2):165-171.

[12]MEDINTZ IL,UYEDA H T,GOLDMAN ER,et al.Quantum dot bioconjugates for imaging,labelling and sensing[J].Nat Mater,2005,4(6):435-446.

[13]CHEN L D,LI Y,YUAN H Y,et al.Quantum dots and their app lications in cancer research[J].Cancer,2005,25:651-656.

[14]GAO X H,CHUNG LW,NIE SM.Quantum dots for in vivo molecular and cellularimaging[J].Methods Mol Biol,2007,374:135-146.

[15]YUW W,CHANG E,FALKNER JC,et al.Forming biocom patible and nonaggregated nanocrystals in water using amphiphilie polymers[J].Abstr Pap Am Chem Soc,2007,129(10):2871-2879.

[16]胡亮,周家華,余澤前,等.納米免疫磁珠聯(lián)合 RT-nest-PCR法檢測胰腺癌外周血微轉(zhuǎn)移的敏感度及特異性[J].東南大學(xué)學(xué)報:醫(yī)學(xué)版,2009,28(4):287-290.

[17]周頤,姜藻,顧曉怡.磁性納米四氧化三鐵協(xié)同順鉑作用于肺癌A 549細(xì)胞的初步研究[J].東南大學(xué)學(xué)報:醫(yī)學(xué)版,2009,28(4):297-301.

[18]CHANW H,SHIAO N H,LU P Z.CdSe quantum dots induce apoptosis in human neuroblastomacells via mitochondrial-dependentpathways and inhibition of survival signals[J].Toxicol Lett,2006,167(3):191-200.

[19]CHO SJ,MAYSINGER D,JAIN M,etal.Long-term exposure to CdTe quantum dots causes functional impairments in live cells[J].Langmuir,2007,23:1974-1980.

[20]GUO G N,LIUW,LIANG JG,et al.Probing the cytotoxicity of CdSe quantum dots with surface modification[J].Mater Lett,2007,61(8/9):1641-1644.

[21]MAHTO SK,PARKC K,YOON TH,etal.Assessmentof cytocompatibility of surface-modified CdSe/ZnSe quantum dots for BALB3T3 fibrob last cells[J].Toxicol In Vitro,2010,24(4):1070-1077.

[22]ZHANG H L,LIY Q,WANG JH,etal.Specialmethod to prepare quantum dot p robeswith reduced cytotoxicity and increased optical property[J].JBiomed Opt,2010,15(1):1-8.

[23]LOVRIC J,BAZZIH S,CUIE Y,et al.Differences in subcellu lar distribution and toxicity of green and red emitting CdTe quantum dots[J].JMol Med,2005,83(5):377-385.

[24]LI K G,CHEN J T,BAI S S,et al.Intracellular oxidative stress and cadmium ions release induce cytotoxicity of unmodified cadm ium sulfide quantum dots[J].Toxicology In Vitro,2009,23(6):1007-1013.

[25]DELEHANTY JB,MATTOUSSIH,MEDINTZ IL.Self-assemb led quantum dot-peptide bioconjugates for selective intracellular delivery[J].Bioconjug Chem,2006,17(4):920-927.

[26]CHOI A O,BROWN SE,SZYF M,et al.Quantum dot-induced epigenetic and genotoxic changes in human breast cancer cells[J].JMol Med,2008,86(3):291-302.

[27]TANG M L,XING T R,ZENG J,et al.Unmodified CdSe quantum dots induce elevation of cytoplasmic calcium levels and impairment of functional properties of sodium channels in rat p rimary cu ltured hippocampal neurons[J].Environ Health Perspect,2008,116(7):915-922.

[28]LIU L,ZHANG J,SU X,etal.In vitro and in vivo assessment of CdTe and CdHgTe toxicity and clearance[J].JBiomed Nanotechnol,2008,4(4):524-528.

[29]WANG L,NAGESHA D K,SELVARASAH S,etal.Toxicity of CdSe nanoparticles in Caco-2 cell cultures[J].J Nanobiotechnol,2008,6(11):1-15.

[30]CHANG SQ,DAIY D,KANG B,etal.UV-enhanced cytotoxicity of thiol-capped CdTe quantum dots in human pancreatic carcinoma cells[J].Toxicol Lett,2009,188(2):104-111.

[31]SU Y,HE Y,LU H,et al.The cytotoxicity of cadmium based,aqueous phase-Synthesized,quantum dots and its modu lation by surface coating[J].Biomaterials,2009,30(1):19-25.

[32]KIRCHNERC,LIEDL T,KUREDA S,et al.Cytotoxicity of colloidal CdSe and CdSe/ZnSnanoparticles[J].Nano Lett,2005,5(2):331-338.

[33]葉記林,毛偉平,吳愛蓮,等.鎘誘導(dǎo)HEK293細(xì)胞凋亡及其線粒體凋亡途徑[J].分子細(xì)胞生物學(xué),2007,40(1):7-16.

[34]SU Y,HU M,FANC,etal.The cytotoxicity of CdTe quantum dots and the relative contributions from released cadm ium ions and nanoparticle properties[J].Biomaterials,2010,31(18):4829-4834.

[35]STERN S T,ZOLNIK B S,MCLELAND C B,etal.Induction ofautophagy in porcine kidney cells by quantum dots:a common cellular response to nanomaterials[J].Toxicol Sci,2008,106(1):140-152.

[36]HOSH INO A,FUJIOKA K,OKU T,et al.Physicochem ical properties and cellular toxicity of nanocrystal quantum dots depend on their surfacemodification[J].Nano Lett,2004,4(11):2163-2169.

[37]CHOIA O,CHO S J,DESBARATS J,et al.Quantum dotinduced cell death involves Fas upregulation and lipid peroxidation in human neurob lastoma cells[J].JNanobiotechnology,2007,5:1-13.

[38]殷海榮,唐萌,夏婷,等.量子點 CdTe對 RAW264.7細(xì)胞凋亡和脂質(zhì)過氧化水平的影響[J].中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志,2008,18(18):2593-2596.

[39]TANG M L,WANGM,XINGT R,et al.Mechanisms of unmodified CdSe quantum dot-induced elevation of cytoplasmic calcium levels in primary cultures of rat hippocampal neurons[J].Biomaterials,2008,29(33):4383-4391.