鳳小平

大慶市中心血站自2006年開展血小板交叉配合試驗以來效果良好，報道如下。

1 材料與方法

1.1 病例資料

大慶市中心血站2006年1月至2009年3月接受輸血治療的門診或住院患者1206名，年齡2～85歲，平均43歲。

1.2 血小板自身抗體測定

在一些自身免疫性疾病、服用某些藥物或同種免疫反應時，機體可產(chǎn)生血小板自身抗體（autoantibody），這些自身抗體可導致血小板破壞增加或生成障礙，使循環(huán)血小板數(shù)量顯著減少。血小板自身抗體可分為血小板相關免疫球蛋白（platelet associated immunoglobulin，PAIg），包括PAIgG、PAIgA、PAIgM和特異性糖蛋白自身抗體、藥物相關自身抗體、抗同種血小板抗體等。這些血小板抗體可采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）、免疫熒光顯微術、流式細胞術等方法進行測定。

1.2.1 適應證

特發(fā)性血小板減少性紫癜（ITP）與繼發(fā)性血小板減少性紫癜的診斷與鑒別、療效觀察。藥物相關性血小板減少性紫癜的診斷。新生兒同種異體免疫性血小板減少癥，輸血后紫癜及其他原因不明的血小板減少癥。血小板減少癥患者需要輸注血小板前的檢查。

1.2.2 標本采集

EDTA抗凝血3mL或未抗凝的全血，分離血清后檢測。最好空腹采血后立即送檢。如果測定血小板膜結(jié)合抗體，可用106mmol/L的枸櫞酸鈉抗凝。

1.2.3 檢測方法

1.2.3.1 篩查試驗

血小板免疫熒光試驗（PIFT）。正常人血小板與待測血清或洗脫液反應后，加入熒光標記的抗人IgG（抗IgM、抗IgA），血小板結(jié)合的抗體可通過流式細胞術（FCM）或熒光顯微鏡檢測，也可通過加入酶標抗體用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）檢測。這種方法檢測的屬于血小板相關免疫球蛋白（PAIg）。此外，也可直接測定患者血小板結(jié)合的PAIg。

1.2.3.2 診斷試驗

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主要是檢測血小板抗原特異的自身抗體，如糖蛋白特異性抗體。正常人血小板與待測血清反應后，加入血小板糖蛋白特異性單克隆抗體，裂解血小板后并將其結(jié)合于固相，再用熒光素或酶標記的抗人IgG（抗IgM、抗IgA）檢測血小板結(jié)合的抗體，從而確定自身抗體是抗何種糖蛋白的抗體。此類方法稱為單克隆抗體固定血小板抗原法（Monoclonal Antibody Immobilization of Platelet Antigens，MAIPA），具有較高的特異性。此外，還可在一些藥物存在時檢測藥物相關的血小板抗體。檢測同種異體抗體則需要患者血清同一系列不同抗原性的血小板進行反應，方法較為復雜。

1.2.3.4 參考范圍

①PAIg：PAIgG 0～78.8ng/107血小板（ELISA），PAIgG＜10%（FCM）；PAIgM 0～7ng/107血小板（ELISA）；PAIgA 0～2ng/107血小板（ELISA）。②抗GPⅡb/Ⅲa自身抗體：陰性。③藥物相關自身抗體：陰性。

1.3 注意事項

血小板自身抗體的檢測方法較多，其參考范圍不盡相同，一般以各實驗室的為準。

1.4 輸注效果評價

在血小板輸注前、后的1、24h對患者血小板計數(shù)，并計算血小板增值（CCI），輸注后1、24h的CCI分別＞7.5×109/L、＞4.5×109/L有效，否則無效。

體表面積（m2）=0.0061×身高（cm）+0.0128×體質(zhì)量（kg）-0.01529

2 結(jié) 果

見表1～表3。

3 討 論

3.1 PAIg

ITP患者血小板表面和血清中以PAIgG增多為主，還包括少量PAIgA、PAIgM。PAIg可能來源于機體免疫系統(tǒng)針對血小板骨架蛋白或膜糖蛋白產(chǎn)生的自身抗體而結(jié)合在血小板膜上，也可能是血清中的抗體分子或抗原抗體復合物在血小板表面的黏著或覆蓋。此外，血小板激活時，α顆?？舍尫臝gG分子至血小板表面。因此，PAIg測定的特異性并不高，但具有較高的敏感度。PAIg增多是導致循環(huán)血小板破壞的重要原因，這種破壞主要是補體活化后參與的結(jié)果，因而ITP患者血清中補體含量常顯著下降，但血小板表面補體成分（如C3）可增多。研究表明，大多數(shù)ITP患者在治療前PAIgG可增高，若同時測定PAIgM、PAIgA和PAC3（血小板相關補體C3），對ITP診斷的敏感度可達100%。因此，PAIg被作為ITP檢查指標之一，但由于其特異性較低，只能作為篩查指標。未治療的血小板減少癥（thrombocytopenia）患者，若PAIgG陰性，則患ITP的可能性較小。PAIgG可隨ITP治療后血小板數(shù)量的升高而減低，復發(fā)時又增高，但有時也不呈負相關關系。PAIg陽性還可見于系統(tǒng)性紅斑狼瘡、慢性活動性肝炎、類風濕病、結(jié)締組織病等[1]。

3.2 抗血小板膜糖蛋白自身抗體

研究發(fā)現(xiàn)，ITP患者血小板表面存在特異性抗血小板膜糖蛋白的自身抗體，其中以抗GPⅡb/Ⅲa、GPIb-Ⅸ復合物的抗體為主，少數(shù)為抗GPIa、GPIV、CD62P的抗體。如果抗糖蛋白自身抗體陽性，則診斷ITP有較高的特異性。有作者報道，在ITP患者中，抗GPⅡb、GPⅢa自身抗體的陽性率為30%～50%[2]。

表1 不同疾病患者血小板交叉配合陽性率比較

表2 不同輸血量患者血小板配型的陽性率比較

表3 血小板相關抗體與輸注后效果比較

3.3 藥物相關抗體

少數(shù)患者應用某些藥物（如奎寧、奎尼丁、金制劑、青霉素、氨芐西林、磺胺類藥、肝素等）后可引起免疫性血小板減少，血清中可查到藥物相關的自身抗體。血小板的破壞是藥物依賴性的，當體內(nèi)有藥物相關抗體存在、但沒有藥物存在時，抗體不與血小板結(jié)合，一般不會引起血小板破壞。所以，對有藥物相關性血小板減少癥患者，在用藥前檢測體內(nèi)是否存在抗體，在抗體陽性期避免用藥，可防止血小板減少的發(fā)生[3]。

隨著輸血量的增加，陽性率不斷遞增，與文獻報道輸血＞10次，抗體陽性率為30%～85%基本一致。

[1]趙桐茂.人類血小板抗原(HPA)研究概況[J].中國輸血雜志,2004,17(2):129.

[2]閻東河,姜美林.現(xiàn)代臨床輸血技術[M].濟南:濟南出版社,2003:138-142.

[3]孟慶寶,趙祥勝,雷厲.微柱凝膠技術檢測血小板抗體的臨床研究[J].臨床血液學雜志(輸血與檢驗版),2004,1(2):56.