房紹鵬

（吉林省食品藥品審評中心，吉林 長春 130062）

慢性腎臟病的發(fā)病率逐年增加，單一用藥治療高血壓的有效率僅為40%[1]，增加劑量雖可提高療效，但同時也提高了不良反應的發(fā)生率。為了增加療效，降低心血管事件的發(fā)生率，通常將轉(zhuǎn)換酶抑制劑貝那普利和鈣拮抗劑氨氯地平聯(lián)合用藥治療高血壓，其降壓療效約為單方制劑治療2倍[2]。本試驗研究氨氯地平的藥代動力學特點及其與貝那普利的相互作用，總結(jié)如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

1.1.1 藥品與試劑

復方貝那普利片（廠家：北京諾華制藥有限公司，批號：H20090180）10mg，苯磺酸氨氯地平片（廠家：北京賽科藥業(yè)有限責任公司，批號：H20010700）5mg，普奈洛爾（廠家：山西晉華藥業(yè)有限公司，批號：H14023169），乙酸乙酯、異丙醇、甲酸、冰醋酸為色譜純，鹽酸、碳酸鈉為分析純。

1.1.2 儀器

LC-MS/MS系統(tǒng)包括質(zhì)譜儀、高效液相色譜儀和質(zhì)譜工作站。

1.1.3 受試者

健康男性受試者18例，年齡（25±3）歲，體質(zhì)量指數(shù)（21.0±1.1）kg/m2，經(jīng)體檢、胸片、心電圖、血尿常規(guī)、血生化檢查均無異常，無藥物過敏史和藥物依賴史，無精神病史，無家族性疾病史，無體位性低血壓史。試驗前2周內(nèi)未服用任何藥物，所有受試者自愿參加試驗并簽署知情同意書，試驗方案經(jīng)倫理委員會批準。

1.2 試驗方法

1.2.1 本試驗為隨機、開放試驗

采用兩制劑、兩周期交叉試驗設計。18例健康男性受試者自身對照，交叉口服復方貝那普利或氨氯地平，試驗清洗期為12d。受試者禁食12h后口服規(guī)定制劑，200mL溫開水送服，藥后4h統(tǒng)一進食標準餐，試驗期間禁忌煙酒和含咖啡因飲料。避免臥床，但也避免劇烈運動。分別于服藥前（0h）和服藥后15.0、25.0、35.0、45.0min，1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、8.0、10.0、12.0、24.0、48.0、72.0、96.0、120.0h于肘正中靜脈取血5mL，置于含肝素的離心試管內(nèi)，離心分離血漿，存于-70℃冰箱內(nèi)待測。

1.2.2 色譜、質(zhì)譜條件

色譜柱：NucleosilODS柱（50cm×2mm，5μm）；流動相=甲醇∶水∶冰醋酸∶三乙胺（70∶30∶1.5∶1，V/V/V/V）；流速：0.2mL/min；柱溫：30℃。離子源為電噴霧離子源，離子噴射電壓4500V，溫度為320℃；氣簾氣體（N2）壓力為30unit，離子源氣GS1（N2）壓力為29unit，離子源氣體GS2（N2）壓力為22unit，碰撞氣CAD（N2）壓力為5unit；正離子方式檢測；掃描方式為多反應監(jiān)測用于定量分析的離子反應分別為m/z 409.4→m/z238.1（氨氯地平）和m/z 260.3→m/z 116.3（普奈洛爾，內(nèi)標）；氨氯地平和內(nèi)標普奈洛爾的DP電壓為40V，碰撞能量為25eV，EP為8V。

1.2.3 血漿樣品預處理

取0.2mL血漿樣品加入1mol/L NaOH溶液50μL，混勻后加入提取劑乙酸乙酯（含內(nèi)標普奈洛爾0.2μg/L）1mL進行提取，渦流混合5min，離心10min（3000r/min），分取上層有機相于室溫下氮氣流吹干，殘留物溶于0.1mL流動相中，取10μL進樣。

1.3 統(tǒng)計學方法

本組數(shù)據(jù)采用SPSS13.0統(tǒng)計學軟件進行處理，計量單位采用（±s）表示，組間比較采用均數(shù)t檢驗，以P＜0.05為有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié) 果

2.1 方法的專屬性

將受試者空白血漿的色譜圖和血漿中加入氨氯地平和內(nèi)標普奈洛爾得到的色譜圖進行比較，證明血漿中的內(nèi)源性物質(zhì)不干擾測定。其中氨氯地平和內(nèi)標普奈洛爾的保留時間分別為2.2、1.2min。

2.2 標準曲線和線性范圍

取標準系列血漿樣品0.2mL，分別對應氨氯地平血漿濃度為0.02、0.04、0.08、0.20、0.40、0.80、2.00、4.00μg/L，其余同“1.2.3血漿樣品預處理”項下操作，以待測物氨氯地平的濃度為橫坐標，以待測物與內(nèi)標物的峰面積比值為縱坐標，用加權(quán)最小二乘法進行線性回歸。測定血漿中氨氯地平濃度的線性范圍為0.02～4.00μg/L，最低定量濃度均為0.02μg/L。氨氯地平的典型線性回歸方程為y=0.143x-0.00249 （r=0.9949）。

2.3 方法的精密度和準確度

制備氨氯地平低、中、高（0.04、0.20、4.00μg/L）3個濃度的質(zhì)控樣品各6份，連續(xù)測定4d，求得本法的精密度與準確度。氨氯地平3個濃度水平的日內(nèi)和日間的RSD均＜15%，相對回收率為98.0%～100%。

2.4 穩(wěn)定性試驗

本試驗分別考察了血漿樣品經(jīng)提取后在室溫放置24h和反復凍融3次后的穩(wěn)定性，結(jié)果表明苯磺酸氨氯地平的血漿樣品在本試驗條件下是穩(wěn)定的，相對回收率為97.2%～99.8%。

2.5 藥代動力學參數(shù)

見表1。

表1 受試者單次口服復方貝那普利或苯磺酸氯地平后氨氯地平的平均藥代動力學參數(shù)[（±s），n=18]

表1 受試者單次口服復方貝那普利或苯磺酸氯地平后氨氯地平的平均藥代動力學參數(shù)[（±s），n=18]

參數(shù) 復方貝那普利 苯磺酸氨氯地平Ke（/h） 0.014±0.002 0.015±0.002 t1/2 （h） 35±12 38±6 tmax（h） 5.4±1.1 5.2±1.2 Cmax（μg/L） 2.2±0.4 2.3±0.2 AUC0-324[μg/（L·h）]98±25 99±10 AUC0-∞[μg/（L·h）]101±15 104±20 CL/F（L/h） 70±25 48±20

3 討 論

氨氯地平是二氫吡啶類鈣拮抗劑，可抑制鈣離子跨膜進入平滑肌細胞和心肌細胞，舒張血管平滑肌而產(chǎn)生擴張血管、抗高血壓的作用。氨氯地平與鈣通道的相互作用取決于它和受體位點結(jié)合和解離的漸進性速率，是一個慢通道阻滯劑。單藥治療高血壓往往難以達到理想目標值貝那普利和氨氯地平聯(lián)用具有良好的降壓效果，并且對于合并蛋白尿、心血管疾病、糖尿病等高風險人群具有特別的益處。本文研究結(jié)果經(jīng)方差分析表明無統(tǒng)計學差異，說明兩種藥物在健康人體內(nèi)的吸收速率、吸收程度及消除速率基本一致，即在貝那普利和苯磺酸氨氯地平組成的復方藥物制劑中，貝那普利不影響氨氯地平在健康受試者體內(nèi)的吸收、分布和消除。tmax和t1/2與國外文獻報道基本保持一直。

[1]朱錦秀,李見春,鄭青山.氨氯地平治療輕、中度高血壓有效性與安全性的Meta分析[J].中國臨床藥理學與治療學,2005,10(2):204-210.

[2]劉培良,陳瑤,安向光,等.氨氯地平和苯那普利聯(lián)合治療對高血壓患者腎功能的影響[J].中國心血管病研究雜志,2005,3(10):760-762.