陳麗云（綜述），蘇素文（審校）

（1.河北醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院藥理學(xué)教研室，河北石家莊 050017；2.河北省正定縣醫(yī)院婦產(chǎn)科，河北正定 050800）

·綜 述·

腫瘤引流淋巴結(jié)在腫瘤免疫中的作用

陳麗云1，2（綜述），蘇素文1*（審校）

（1.河北醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院藥理學(xué)教研室，河北石家莊 050017；2.河北省正定縣醫(yī)院婦產(chǎn)科，河北正定 050800）

腫瘤；淋巴結(jié)；免疫；治療；免疫耐受；綜述文獻(xiàn)

腫瘤引流淋巴結(jié)（tumor-draining lymph node，TDLN）是腫瘤細(xì)胞沿淋巴管所能到達(dá)的淋巴結(jié)，是腫瘤免疫發(fā)生的部位，也是腫瘤誘導(dǎo)樹突狀細(xì)胞（dendritic cells，DC）首先遷移到的地方。在TDLN中隨著免疫系統(tǒng)對腫瘤抗原的識別和致敏，產(chǎn)生的腫瘤特異性CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞，進(jìn)入腫瘤灶協(xié)同殺滅腫瘤細(xì)胞。因此，TDLN是機(jī)體抗腫瘤免疫反應(yīng)的開始和維持部位，也是機(jī)體免疫系統(tǒng)對腫瘤產(chǎn)生耐受的關(guān)鍵部位。

1 TDLN對腫瘤免疫治療的促進(jìn)作用

1.1 TDLN在腫瘤免疫中的地位：現(xiàn)已明確，機(jī)體免疫系統(tǒng)對腫瘤抗原的免疫反應(yīng)與其他各種抗原引起免疫反應(yīng)的規(guī)律是一樣的。腫瘤浸潤的DC攜帶腫瘤抗原，并在主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ（major histocompatibility complex，MHCⅠ）分子的協(xié)同下加工、遞呈這些抗原。一旦這些攜帶腫瘤抗原的DC到達(dá)TDLN，將誘導(dǎo)產(chǎn)生腫瘤特異性CD4+T細(xì)胞，這些特異性CD4+T細(xì)胞能反過來促進(jìn)腫瘤特異性CD8+T細(xì)胞的產(chǎn)生［1］。攜帶腫瘤抗原的DC可以在MHCⅠ分子的協(xié)助下，直接將抗原遞呈給CD8+T細(xì)胞，這種現(xiàn)象叫作交叉遞呈。隨著機(jī)體免疫系統(tǒng)對腫瘤抗原的識別和致敏，腫瘤特異性CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞進(jìn)入腫瘤灶，協(xié)同殺滅腫瘤細(xì)胞。因此，TDLN是機(jī)體抗腫瘤免疫反應(yīng)的開始和維持部位。

1.2 TDLN離體激活后的治療效果：離體激活TDLN（ex vivo-TDLN）細(xì)胞療法是將經(jīng)手術(shù)摘除并分離到的TDLN細(xì)胞在體外經(jīng)各種免疫制劑激活、擴(kuò)增后再回輸?shù)胶闪鏊拗黧w內(nèi)的一種免疫治療方法。Lores等［2］的實驗結(jié)果表明，輸入這些細(xì)胞可導(dǎo)致肺和腦腫瘤消退。Tamai等［3］在研究中將帶有4T1自體轉(zhuǎn)移瘤的小鼠通過DC-腫瘤融合瘤苗和過繼來源于TDLN的免疫T淋巴細(xì)胞治療可以誘導(dǎo)有轉(zhuǎn)移灶存在的肺臟和沒有轉(zhuǎn)移灶的脾臟中的T細(xì)胞顯著增加，取得很好的療效。TDLN的過繼治療可治愈多種腫瘤。然而，皮下腫瘤比較難以治療并容易產(chǎn)生耐受性。研究［4］發(fā)現(xiàn)，從小鼠進(jìn)展性MCA205纖維瘤的TDLN中分離出CD62LlowT細(xì)胞亞群，在體外經(jīng)抗CD3單克隆抗體和白細(xì)胞介素-2（interleukin-2，IL-2）激活、過繼治療，可使荷瘤（MCA205纖維瘤）小鼠的腫瘤明顯變小，且腫瘤內(nèi)有CD62LlowT細(xì)胞密集浸潤。應(yīng)用過繼性免疫細(xì)胞治療轉(zhuǎn)移性腫瘤時，用腫瘤組織內(nèi)或淋巴結(jié)的T細(xì)胞，經(jīng)體外刺激后回輸?shù)募?xì)胞必須積聚于轉(zhuǎn)移的病變處才能抑制腫瘤生長［5］。TDLN本身的抗腫瘤活性并不是很高，只有得到有效的激活后才表現(xiàn)出強(qiáng)大的抗癌效應(yīng)。Hunter等［6］研究發(fā)現(xiàn)，來自TDLN的T細(xì)胞對自體腫瘤細(xì)胞沒有反應(yīng)。然而，在抗CD40特異性抗體激動藥（CP-870，893）存在情況下，這種T細(xì)胞對自體腫瘤細(xì)胞的反應(yīng)性明顯增強(qiáng)。最近，Shan等［7］對TDLN體外激活各種方法進(jìn)行比較，試圖尋找一種可以應(yīng)用于臨床的TDLN激活方法，由IL-2+粒細(xì)胞集落刺激因子+白細(xì)胞介素-4（interleukin-4，IL-4）+自體抗原刺激TDLN的方法好于單純用IL-2或是IL-2+自體抗原刺激，可產(chǎn)生更多的DC。在研究中，他們建立了T細(xì)胞和DC離體共刺激系統(tǒng)，該系統(tǒng)更容易操作，也更容易得到預(yù)期結(jié)果。該研究提供了一種提高TDLN細(xì)胞抗腫瘤活性的新方法，為TDLN細(xì)胞過繼療法應(yīng)用于臨床提供了新的思路。另外，TDLN中的B細(xì)胞可有與DC相類似的功能，并能發(fā)揮效應(yīng)細(xì)胞的作用。Li等［8］研究發(fā)現(xiàn)，體外激活的TDLN B細(xì)胞能使小鼠肺轉(zhuǎn)移瘤消退。

1.3 TDLN體內(nèi)激活后的治療效果：要從根本上解決腫瘤淋巴轉(zhuǎn)移問題，除了依靠自身免疫系統(tǒng)對腫瘤抗原的識別和致敏外，很大程度上也要依靠外源佐劑的幫助。Yang等［9］研究發(fā)現(xiàn)，在TDLN區(qū)域注射C類磷酸胞苷酰（基鳥苷）寡脫氧核苷酸，表現(xiàn)出強(qiáng)大的抑癌作用，能夠使一些荷瘤小鼠乳腺癌組織完全消失，通過觀察發(fā)現(xiàn)，TDLN中的免疫細(xì)胞和腫瘤特異性記憶細(xì)胞增多。提示C類磷酸胞苷酰（基鳥苷）寡脫氧核苷酸體內(nèi)刺激TDLN對治療乳腺癌有很大的促進(jìn)作用。Dubrot等［10］研究發(fā)現(xiàn)，瘤內(nèi)注射α干擾素和全身給抗CD137單克隆抗體激動劑的聯(lián)合療法，能使TDLN中的DC數(shù)量增加，DC數(shù)量與腫瘤大小呈負(fù)相關(guān)。Battaglia等［11］研究發(fā)現(xiàn)，放化療等輔助療法對進(jìn)行性宮頸癌TDLN中免疫耐受和抗腫瘤免疫反應(yīng)的平衡起決定性作用，與僅進(jìn)行化療或進(jìn)行化療加高劑量放療的TDLN相比，化療加低劑量放療的TDLN抗腫瘤活性明顯增強(qiáng)，特異性也有所提高。Sabel等［12］研究發(fā)現(xiàn)，分別對荷4T1細(xì)胞的BALB/c小鼠進(jìn)行手術(shù)和高頻率冷凍消融術(shù)治療，與單純手術(shù)切除相比腫瘤特異性T細(xì)胞顯著增加，肺轉(zhuǎn)移灶減少，生存期更長。

2 TDLN在腫瘤免疫耐受中的作用

2.1 TDLN在腫瘤免疫耐受中的地位：位于腫瘤下游的TDLN，由于腫瘤存在的原因發(fā)生結(jié)構(gòu)變化。因為腫瘤衍生的抗原被宿主細(xì)胞交叉遞呈，TDLN中的抗原呈遞細(xì)胞在致耐受環(huán)境下被改變。另外，TDLN中的調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（regulatory T cells，Tregs）數(shù)量增加，抑制活性增強(qiáng)。新的證據(jù)顯示，Tregs中有一些是對抗腫瘤的特異性抗原而新產(chǎn)生的［13］，因此，可作為TDLN中抗原遞呈的直接結(jié)果。另外一些可能代表抗自身抗原的Tregs，在TDLN致免疫耐受環(huán)境中優(yōu)先活化。因此，TDLN就成為了這樣一個解剖部位，在其中遞呈的抗原不僅不能夠引發(fā)保護(hù)性的免疫反應(yīng)，而且能產(chǎn)生對抗原的系統(tǒng)性耐受。綜上所述，TDLN類似于經(jīng)典的免疫赦免，可以引起免疫系統(tǒng)的其他部位耐受。為了使臨床抗腫瘤免疫療法更加有效，必須打破這些免疫耐受機(jī)制。

2.2 TDLN中DCs免疫耐受作用：研究［14］發(fā)現(xiàn)，初始腫瘤特異T細(xì)胞的活化是通過宿主抗原遞呈細(xì)胞（antigen-presenting cells，APCs）的交叉遞呈完成的，APCs在TDLN中是引起免疫反應(yīng)還是免疫耐受要視宿主的情況而定。在一些情況下，腫瘤抗原的交叉遞呈能引起TDLN中T淋巴細(xì)胞的活化，細(xì)胞表面活化標(biāo)志物上調(diào)，使更多的細(xì)胞處于細(xì)胞分裂狀［15］，然而，當(dāng)T細(xì)胞大量活化時，就會出現(xiàn)發(fā)育不全或凋亡，幸存下來的T細(xì)胞也可能出現(xiàn)無反應(yīng)性或是缺乏效應(yīng)功能［14，16-17］。從功能上講，TDLN中交叉遞呈腫瘤抗原不僅沒有誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生對腫瘤的排斥反應(yīng)，而且表現(xiàn)出對腫瘤耐受性活化。由于人們認(rèn)為DC是人體內(nèi)最有效的APCs，所以DC有活躍的免疫抑制性這一概念還依然是比較新穎的。在卵巢癌患者中，來源于TDLN中的DC表達(dá)免疫抑制性配體B7-H1和程序性死亡配體1（programmed death ligand-1，PDL-1），當(dāng)把這些抑制性通路阻斷時，T細(xì)胞的反應(yīng)活性明顯提高［18］。在鼠類TDLN中，DC分泌轉(zhuǎn)化生長因子β（transforming growth factor-β，TGF-β），能夠增強(qiáng)Tregs增殖［19］。類漿細(xì)胞DC浸潤人類卵巢癌能誘導(dǎo)產(chǎn)生Tregs和抑制性CD8+T細(xì)胞［20］。Munn等［21］在研究中發(fā)現(xiàn)，鼠類TDLN中的類漿細(xì)胞DC表達(dá)一種免疫調(diào)節(jié)酶即吲哚胺2，3-二氧化酶（indoleamine 2，3-dioxygenase，IDO）。在人類TDLN中也發(fā)現(xiàn)了表達(dá)IDO的與鼠類TDLN中的類漿細(xì)胞DC相類似的細(xì)胞［22］。雖然人類表達(dá)IDO的功能還不是很明確，但I(xiàn)DO有促進(jìn)免疫耐受發(fā)生的作用，如自身免疫病和器官移植。TDLN中表達(dá)IDO DC出現(xiàn)可促進(jìn)TDLN致免疫耐受環(huán)境的形成。

2.3 TDLN中Tregs的免疫耐受作用：近來的研究［23］發(fā)現(xiàn)，CD4+CD25+Tregs與T細(xì)胞具有許多類似的功能特征，它與腫瘤免疫逃逸有密切關(guān)系。在人TDLN中存在CD4+CD25+的Tregs，是TDLN中重要的致免疫耐受因素。Jones等［24］使用特異性抗CD25單抗以去除CD4+CD25+T細(xì)胞，結(jié)果顯示能夠促進(jìn)小鼠的移植腫瘤細(xì)胞消退。Tanaka等［25］還通過體外實驗證實，去除CD4+CD25+T細(xì)胞能誘導(dǎo)腫瘤效應(yīng)T細(xì)胞的產(chǎn)生。Dercamp等［26］發(fā)現(xiàn)，只有在消除宿主體內(nèi)Tregs的前提下，過繼到TDLN中的CD8+效應(yīng)T細(xì)胞才能夠積累和增殖。Tien等［27］在小鼠荷瘤模型中發(fā)現(xiàn)，隨著腫瘤的發(fā)展，由Tregs介導(dǎo)的免疫抑制反應(yīng)性明顯增加，并能在TDLN中檢測到這種反應(yīng)。

3 TDLN在抗腫瘤免疫領(lǐng)域的應(yīng)用前景

TDLN在腫瘤免疫中是抗腫瘤免疫開始和維持的部位，也是機(jī)體免疫系統(tǒng)對腫瘤產(chǎn)生耐受的關(guān)鍵部位，具有抗癌和護(hù)癌的雙重功能。因此，對TDLN這一特點的深入研究，并找到調(diào)節(jié)其平衡的方法，對于癌癥的預(yù)防和治療有著極其重要的意義。

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（本文編輯：劉斯靜）

R730.3

A

1007-3205（2012）08-0974-04

2012-02-12；

2012-06-08

河北省自然科學(xué)基金資助項目（C2011206145）

陳麗云（1976-），女，河北行唐人，河北省正定縣人民醫(yī)院主治醫(yī)師，醫(yī)學(xué)碩士研究生，從事婦產(chǎn)科疾病診治研究。

*通訊作者。E-mail：suswmk@163.com

10.3969/j.issn.1007-3205.2012.08.042