邢曉光

(天津港口醫(yī)院，天津300456)

目前腫瘤診斷主要靠影像學(xué)和細(xì)胞病理學(xué)技術(shù)，多數(shù)患者在有明顯占位性病變和臨床癥狀后才得以確診。由于這種占位性病變已非癌變最早期，過了癌癥的最佳治療時(shí)期，因此，對(duì)癌癥具有早期診斷作用的血清腫瘤標(biāo)志物更具臨床價(jià)值。血清胸腺嘧啶脫氧核苷激酶1(TK1)是最新研究發(fā)現(xiàn)的一種細(xì)胞增殖標(biāo)記物。2010年10月～2011年3月，我們檢測(cè)了血清TK1在惡性腫瘤患者中的表達(dá)，探討其在全身臟器腫瘤發(fā)生、發(fā)展及其預(yù)后判斷中的作用。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 惡性腫瘤患者74例(惡性組)，男32例，女42例;年齡42～76(58.30 ±6.55)歲。其中胃癌18例，肝癌12例，結(jié)直腸癌12例，乳腺癌16例，胰腺癌6例，肺癌10例，均符合WHO相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)，且經(jīng)病理檢查證實(shí)診斷。其中未行任何治療者37例，另37例行相應(yīng)治療后無效15例，有效(臨床癥狀有所好轉(zhuǎn)，相關(guān)腫瘤標(biāo)志物水平下降)22例。良性增生疾病(乳腺增生、肌瘤、囊腫等)29例(良性組)，男12例，女17例;年齡37～73(53.60 ±4.13)歲。另取43例健康體檢者為對(duì)照組，男19例，女24例;年齡39～69(55.92±5.47)歲。均無任何增生性疾病，無消化道潰瘍、貧血、女性非月經(jīng)期。惡性組、良性組與對(duì)照組間年齡、性別均無顯著性差異。

1.2 血清TK1水平檢測(cè) 患者空腹靜脈真空采血，4 000 r/min離心15 min分離血清，采用深圳華瑞同康技術(shù)有限公司生產(chǎn)的CIS系列化學(xué)發(fā)光數(shù)字成像儀及TK1診斷試劑，點(diǎn)印跡免疫酶化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)血清TK1水平。以TK1水平＞2 pmol/L為陽性診斷標(biāo)準(zhǔn)，繪制ROC曲線，計(jì)算診斷惡性腫瘤的敏感性及特異性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料以ˉx±s表示，組間均數(shù)比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用q檢驗(yàn);以ROC曲線分析診斷敏感性及特異性。P≤0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

血清TK1水平見表1。TK1對(duì)惡性腫瘤的診斷敏感性為93.1%，特異性為73.3%，見圖1。

表1 各組血清TK1水平比較(ˉx±s)

3 討論

TK是使胸腺嘧啶核苷轉(zhuǎn)化為單磷酸胸腺嘧啶的關(guān)鍵酶［1］。因磷酸化作用是胸腺嘧啶核苷進(jìn)入DNA代謝的唯一途徑，因此，TK亦被稱為搶救酶。TK有細(xì)胞質(zhì)胸苷激酶(TK1)和線粒體胸苷激酶(TK2)兩種同工酶，編碼TK1的基因位于17號(hào)染色體q21-22的位點(diǎn)上，編碼TK2的基因位于16號(hào)染色體上。TK1是細(xì)胞周期依賴性標(biāo)志物，高水平的TK1主要存在于胎兒組織和成人的增殖細(xì)胞質(zhì)中。胎兒發(fā)育以后逐漸減低。正常成人細(xì)胞中，TK1水平極低，當(dāng)機(jī)體出現(xiàn)大量增殖細(xì)胞時(shí)，TK1水平迅速升高。一旦發(fā)生癌變，伴隨著腫瘤細(xì)胞的急劇增殖，TK1的活性和水平均將升高，可超過正常水平的2～100倍［2］。

圖1 血清TK1診斷惡性腫瘤的ROC曲線

TK1與細(xì)胞分裂密切相關(guān)［3］，在細(xì)胞分裂 G1期水平較低，在G1晚期開始升高，在DNA合成期開始急劇升高，至S期和G2期達(dá)到最高，編碼TK1的mRNA及其表達(dá)的蛋白質(zhì)為細(xì)胞增生的標(biāo)志物;從G2晚期開始細(xì)胞中的TK1急劇降解，直至降低到G1前期最低水平。TK1這種依賴細(xì)胞分裂后期促進(jìn)復(fù)合物/循環(huán)體(APC/C)介導(dǎo)的泛素—蛋白酶體降解途徑［4］，對(duì)于維持細(xì)胞核內(nèi)dNTP庫(kù)的動(dòng)態(tài)平衡具有重要意義。dNTP的失衡特別是高水平的dTTP可極大增加DNA復(fù)制錯(cuò)誤幾率，因此正常細(xì)胞增殖后TK1不會(huì)或極少釋放至血液中，血清中TK1值會(huì)極低。而對(duì)于腫瘤患者，處于S期、G2期的細(xì)胞比例高，原來依賴于APC/C介導(dǎo)的泛素—蛋白酶體降解途徑等在內(nèi)的一系列細(xì)胞周期調(diào)控機(jī)制被打亂，使得腫瘤細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生大量的TK1并釋放到血液中。惡性腫瘤是一種細(xì)胞異常增殖性疾病，正常細(xì)胞生長(zhǎng)一旦失控，將導(dǎo)致細(xì)胞惡性增殖，DNA合成速度急劇升高。由于TK1水平與DNA合成呈正相關(guān)，所以腫瘤惡性程度越高，TK1水平越高。

本研究顯示，惡性組TK1水平顯著高于對(duì)照組及良性組，良性組同對(duì)照組相比無顯著性差異，證實(shí)惡性腫瘤患者體內(nèi)腫瘤細(xì)胞大量增殖，腫瘤細(xì)胞中的TK1大量釋放入血液中，導(dǎo)致血液中TK1水平升高;而良性增生患者雖然亦有細(xì)胞增殖，但其增殖水平相對(duì)較低，因此TK1水平基本處于正常水平。但有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，個(gè)別良性增生患者其TK1水平保持2～4 pmol/L［5］，本研究尚未發(fā)現(xiàn)相似病例，此可能與本研究的例數(shù)相對(duì)有限有關(guān)。筆者認(rèn)為，對(duì)TK1升高的良性增生患者應(yīng)進(jìn)行隨訪，并定期監(jiān)測(cè)TK1，其水平持續(xù)升高提示有惡變的可能性。

本研究同時(shí)發(fā)現(xiàn)，惡性組中未治療及治療無效者TK1水平顯著高于治療有效者，提示腫瘤患者經(jīng)有效治療后，腫瘤細(xì)胞的大量惡性增殖被抑制，而隨著增殖的被抑制，TK1水平亦相應(yīng)下降，此提示TK1對(duì)于腫瘤患者的療效監(jiān)測(cè)具有重要意義，而其較高的診斷敏感性亦提示TK1對(duì)于惡性腫瘤有較好的診斷價(jià)值。

傳統(tǒng)的腫瘤標(biāo)志物是指在腫瘤發(fā)生和增殖過程中，由腫瘤細(xì)胞合成、分泌或由機(jī)體對(duì)腫瘤反應(yīng)而異常產(chǎn)生和或升高的，能反映腫瘤存在和生長(zhǎng)的一類物質(zhì)，包括蛋白質(zhì)、激素、酶(同工酶)、多胺及癌基因產(chǎn)物等，一般不適宜對(duì)無癥狀人群進(jìn)行普查，而適于高危人群篩查;腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)體內(nèi)有無腫瘤的存在，而與腫瘤生長(zhǎng)快慢無直接相關(guān)性。TK1是細(xì)胞增殖標(biāo)志物［6］，是預(yù)測(cè)惡性腫瘤風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)展的標(biāo)志物，而不是腫瘤標(biāo)志物，其判斷的是患者體內(nèi)腫瘤細(xì)胞有無增殖，更適于在無癥狀人群中進(jìn)行普查，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞惡性增殖高危者。

綜上所述，筆者認(rèn)為血清TK1對(duì)于惡性腫瘤的早期診斷及療效評(píng)估有重要診斷價(jià)值，更適于對(duì)正常人群進(jìn)行惡性腫瘤的早期篩查。

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