王平 劉麗

PIH存在血管發(fā)生和功能障礙。VEGF作為重要血管生長(zhǎng)因子之一，與受體Flt-1結(jié)合，在調(diào)節(jié)胎盤(pán)血管發(fā)育和PIH病中發(fā)揮重要的作用，PIH是嚴(yán)重的產(chǎn)科并發(fā)癥，發(fā)病率約為9.4%，是導(dǎo)致母嬰發(fā)病率和病死率顯著增加的重要原因，但其病因和發(fā)病機(jī)制尚不明確。本研究通過(guò)測(cè)定孕婦胎盤(pán)組織中VEGF和Flt-1表達(dá)情況，進(jìn)一步揭示它們?cè)谌迅哒靼l(fā)病機(jī)制中的作用及二者間是否存在相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2008月12月至2012年2月鄭州市中醫(yī)院婦產(chǎn)科住院的晚期妊娠婦女200例，其中正常妊娠婦女100例(對(duì)照組)，年齡(25±5)歲，分娩孕周(38±2)周;PIH患者100例(PIH組)，根據(jù)全國(guó)高等院校統(tǒng)編教材《婦產(chǎn)科學(xué)》(第6版)的分類(lèi)及定義，再分成3個(gè)小組，其中妊娠期高血壓1組35例，年齡(25±5)歲，分娩孕周(38±2)周;子癇前期2組30例，年齡(25±5)歲，分娩孕周(38±2)周;子癇3組35例，年齡(25±5)歲，分娩孕周(38±2)周;由專(zhuān)人檢測(cè)身高、體質(zhì)量，并計(jì)算體質(zhì)量指數(shù)。200例均為第1胎、臨產(chǎn)前行剖宮產(chǎn)術(shù)的孕婦，并除外糖尿病、高脂血癥等其他疾病。各組孕婦年齡、孕周、孕晚期體質(zhì)量指數(shù)、血脂、血糖差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 方法 VEGF和Flt-1表達(dá)測(cè)定

1.2.1 胎盤(pán)組織的取材及制備。胎盤(pán)娩出后30min內(nèi)取胎盤(pán)母面中央絨毛組織塊約1cm×1cm×1cm，避開(kāi)鈣化區(qū)及壞死區(qū)，生理鹽水充分漂洗后用10%中性福爾馬林溶液固定24h以上，常規(guī)石蠟包埋4 pure連續(xù)切片。

1.2.2 鼠抗人VEGF單克隆抗體(南京博爾迪):鼠抗人Flt-1單克隆抗體(南京博爾迪)，SP9000通用型試劑盒均購(gòu)自北京中山生物技術(shù)有限公司;磷酸氫二鈉、磷酸氫二鉀、氯化鈉、氯化鉀等化學(xué)試劑均為分析純，由北京益利化學(xué)有限公司生產(chǎn)。

1.2.3 免疫組化測(cè)定具體步驟按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。用已知陽(yáng)性標(biāo)本做陽(yáng)性對(duì)照，用1%BSA代替一抗做陰性對(duì)照。染色以細(xì)胞有棕黃色顆粒沉著視為陽(yáng)性反應(yīng);與背景一致為0;胞核或胞漿內(nèi)可見(jiàn)少量淡黃色顆粒，明顯高于背景為1;胞核或胞漿內(nèi)可見(jiàn)較多深棕色顆粒為2;胞核或胞漿內(nèi)可見(jiàn)大量深棕色或褐色顆粒為3。陽(yáng)性細(xì)胞百分率:無(wú)陽(yáng)性細(xì)胞為0;＜25為1;25%～50%為2;＞50%為3。取以上兩項(xiàng)乘積:積分0～1分為(-);2～3分為(+);4～5分為(++);＞5分為(+++)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 11.5統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，計(jì)量資料以均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差表示，兩兩比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，多個(gè)樣本比較用單因素方差分析;P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

VEGF，F(xiàn)lt-1表達(dá)PIH組胎盤(pán)組織表達(dá)明顯低于對(duì)照組(P＜0.05)，且隨著妊高癥病情的加重而水平減低。見(jiàn)表1。

表1 4組胎盤(pán)組織的VEGF，F(xiàn)lt-1陽(yáng)性表達(dá)率比較(例，%)

3 討論

近年來(lái)，PIH病因“胎盤(pán)淺著床”理論逐漸被多數(shù)學(xué)者所可，認(rèn)為滋養(yǎng)細(xì)胞對(duì)子宮螺旋動(dòng)脈侵蝕不足致使胎盤(pán)植入過(guò)淺，血流灌注不足，進(jìn)而引發(fā)系統(tǒng)性血管內(nèi)皮損傷，導(dǎo)致PIH各種臨床癥狀的出現(xiàn)。在妊娠過(guò)程中，胚胎滋養(yǎng)層細(xì)胞侵入到母體蛻膜，并侵入其中的螺旋動(dòng)脈，替代血管內(nèi)皮細(xì)胞，建立母體/胎兒的交互式循環(huán)，為胚胎的發(fā)育提供營(yíng)養(yǎng)。VEGF是一種高效特異的內(nèi)皮細(xì)胞有絲分裂原，VEGF與FIt-1結(jié)合主要調(diào)節(jié)肉皮細(xì)胞間及內(nèi)皮細(xì)胞與基質(zhì)問(wèn)的相互作用，發(fā)揮強(qiáng)烈的促血管生長(zhǎng)及增加微血管通透性的作用。有學(xué)者認(rèn)為作為重要的血管誘生園子，VEGF在妊娠早期參與胎盤(pán)血管網(wǎng)的形成，而在妊娠晚期主要調(diào)節(jié)血管內(nèi)皮細(xì)胞的通透性.有利于胎兒生長(zhǎng)發(fā)育。關(guān)于VEGF和受體能促進(jìn)血管生成和胎盤(pán)發(fā)育可通過(guò)基因缺失的小鼠胚胎發(fā)育障礙得到直接證實(shí)[1，2]，研究表明[3]，MMP-9在滋養(yǎng)細(xì)胞植入中起重要作用，并與VEGF，F(xiàn)lt-1表達(dá)率呈正相關(guān)，本研究發(fā)現(xiàn)VEGF，F(xiàn)lt-1在 PIH組胎盤(pán)組織表達(dá)明顯低于對(duì)照組，且隨著妊高癥病情的加重而水平減低，說(shuō)明VEGF，F(xiàn)lt-1可能共同參與PIH的發(fā)生。

[1]Reynolds L P，Wu J H，Assadinia S，et al.Arterolar and venular patterning in retinas ofmice selectively expressing VEGF isforms.J Clin Invest，2002，109(3):327-336．

[2]Winther H．Dantzer V.Co-localization ofvascular endothelial growth facfor and its two receptors in the mink.Placenta，2001，22(5):457-465．

[3]Huisman MA，Timmer A．Zeinstra M．et al.Matrix-met alloproteinase activity in first trimester placental bed biopsies in further complicated and un-complicated pregnancies.Placenta，2004，25(4):253-258．