李學(xué)軍 劉禮梅 龍小娜 陳亮亮 吳 婧 孫 建 王亞瑜 金月萍

（安徽中醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院，安徽 合肥 230061）

慢性胃炎是消化系統(tǒng)的一種常見病，其發(fā)病率在各種胃病中居首位［1］。臨床主要采用三聯(lián)療法對(duì)幽門螺桿菌（helicobacter pylori，Hp）感染進(jìn)行根除治療，雖然見效快但是依賴性大，副作用多。中醫(yī)藥治療本病，方法較多，如辨證論治、復(fù)方、單方及中西醫(yī)結(jié)合療法等均取得了很好的臨床效果［2］。本課題組在長期臨床應(yīng)用中發(fā)現(xiàn)以益氣健脾和中法針?biāo)幗Y(jié)合治療Hp相關(guān)性慢性胃炎療效顯著［3］。本研究觀察脾胃培元法配合針刺療法對(duì)Hp相關(guān)性慢性胃炎大鼠胃黏膜Hp及形態(tài)的影響，為臨床治療提供理論支持，為下一步研究其機(jī)制奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物及分組 選取健康、清潔級(jí)SD大鼠70只，雌雄不拘，體質(zhì)量80～100 g，由南京醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，許可證號(hào)：SCXK（蘇）2008-0004。動(dòng)物于安靜環(huán)境下分籠飼養(yǎng)，室溫控制在（22±1）℃，相對(duì)濕度（55±5）%，自然光照，塑料籠內(nèi)以消毒木屑為墊料，食水自取。大鼠適應(yīng)環(huán)境1周后，從70只健康SD大鼠中隨機(jī)選擇10只作為正常對(duì)照組，其余60只用于模型復(fù)制，選取造模成功的大鼠隨機(jī)分為模型組、西藥組、中藥組、針刺組、針?biāo)幗M，每組10只。

1.2 藥品及試劑 阿司匹林、脫氧膽酸鈉、雷貝拉唑、生理鹽水、阿莫西林、甲硝唑等由上海生物化學(xué)制藥廠生產(chǎn)。Hp菌株由安徽中醫(yī)學(xué)院微生物實(shí)驗(yàn)室提供。黨參、黃芪、白術(shù)、茯苓、黃連、蒲公英、陳皮、甘草等中藥飲片由安徽中醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院中藥房提供。

1.3 儀器與設(shè)備 切片機(jī)（Leica2135，德國），Olympus顯微鏡（BX51，德國），PCE-A型程控電針治療儀（安徽天恒有限公司）

1.4 模型制備 參照文獻(xiàn)［4］將大鼠分以下兩個(gè)階段造模。第1階段：饑飽失常加藥物刺激。即單日正常飲食，雙日禁食不禁水，予阿司匹林混懸液2 mL（阿司匹林粉100 mg/kg體質(zhì)量，溶于15%乙醇100 mL中），持續(xù)4周，共灌胃15次。以20 mmol/L脫氧膽酸鈉溶液作為飲水隨意飲用。第2階段：Hp菌液制備。將Hp密集劃線接種于Skirrow平板，37℃，微需氧環(huán)境中培養(yǎng)72 h，用滅菌生理鹽水洗下菌苔，混合均勻，以酶標(biāo)儀測定其 OD550 值在4.8～8.4之間（相當(dāng)于 1×109CFU／mL）。上述菌液4℃冰箱保存，于15 h內(nèi)大鼠灌胃。從第5周起，每周感染Hp 2次，共8次。灌胃前，先禁食水24 h，經(jīng)口腔緩慢灌注5%NaHCO32 mL，20 min后灌注Hp菌液2 mL，1 h后給食，共4周。

1.5治 療

1.5.1 藥物制備 （1）西藥制備：雷貝拉唑20 mg/片，用蒸餾水配成濃度為0.37 mg/mL的混懸液備用；阿莫西林250 mg/片，用蒸餾水配成濃度為9.17 mg/mL的混懸液備用；甲硝唑200 mg/片，用蒸餾水配成濃度為7.33 mg/mL的混懸液備用。（2）中藥制備：采用脾胃培元法為主自擬脾胃培元方，藥用黨參15 g，黃芪20 g，白術(shù) 15 g，茯苓 15 g，黃連 6 g，蒲公英 20 g，陳皮 10 g，甘草6 g，中藥飲片由安徽中醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院中藥房提供，按中藥常規(guī)煎煮法水煎后濃縮配制成0.78g/mL濃度。

1.5.2 治療方法 （1）西藥組給予阿莫西林、雷貝拉唑、甲硝唑混懸液0.5 mL/只，服用7 d，然后單灌胃雷貝拉唑混懸液2 mL/只，每日2次，連用3周。（2）中藥組灌胃脾胃培元法湯劑2 mL/只，早晚各1次，連用4周。（3）模型組每日給予生理鹽水2 mL灌胃，連續(xù)4周。（4）正常組同期相同條件下飼養(yǎng)，相同條件下抓捕與處理，并每日給予生理鹽水2 mL灌胃，連用4周。（5）針刺組參照《實(shí)驗(yàn)針灸學(xué)》［5］關(guān)于“常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物針灸穴位”的取穴標(biāo)準(zhǔn)。針刺組選取“足三里”、“中脘”和“內(nèi)關(guān)”（其中“足三里”、“內(nèi)關(guān)”均選雙側(cè)穴位）。選用 1寸（25 mm）毫針，直刺 4～6 mm，留針 30 min。 于手術(shù)第1日開始電針，每日1次，連用4周。（6）針刺方法：針?biāo)幗M針刺方法同針刺組，另灌喂脾胃培元法湯劑2 mL/只，早晚各1次，連用4周。

1.6 標(biāo)本采集與檢測 所有大鼠治療結(jié)束后采取頸椎脫位的方法處死動(dòng)物，取出鼠胃，沿大彎剪開胃腔，洗凈后，固定于中性福爾馬林緩沖液中，切取胃2 cm×1 cm大小的組織條塊，用于快速尿素酶法檢測Hp和HE染色。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件。率的檢驗(yàn)用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 各組大鼠Hp感染情況 見表1。正常對(duì)照組無Hp感染，模型組感染率為90%，西藥組感染率為40%，中藥組和針刺組感染率為50%，針?biāo)幗M感染率最低為30%，說明各治療組均可抑制Hp感染，且以針?biāo)幗M最顯著。

表1 各組大鼠HP感染率比較（n）

2.2 胃黏膜病理變化 見圖1。正常組大鼠胃黏膜上皮完整，部分可見少量散在的淋巴細(xì)胞。模型組胃竇部炎癥程度較重，可見程度不等的點(diǎn)狀或片狀糜爛。治療各組胃黏膜炎癥反應(yīng)均較模型組有所減輕，其中針?biāo)幗M變化更明顯。

圖1 各組大鼠胃黏膜病理切片

3 討 論

Hp相關(guān)性慢性胃炎，據(jù)其癥狀當(dāng)屬中醫(yī)學(xué)“胃脘痛”、“痞滿”、“嘔吐”、“嘈雜”、“吐酸”等病的范疇。病因有外邪犯胃、飲食不節(jié)、情志失調(diào)、脾胃虛弱等，病位在胃，與肝、脾關(guān)系最為密切，辨證分寒、熱、虛、實(shí)。病初為實(shí)，日久傷脾，脾氣不足，陽氣虧虛，陽損及陰（胃陰不足），則由實(shí)證轉(zhuǎn)虛證。《丹溪心法·痞》：“有濕熱太甚為痞者”、“痞者有食積兼濕，心下痞須用枳實(shí)、炒黃連”為辨證論治提供了依據(jù)［6］。現(xiàn)代研究提示Hp陽性慢性淺表性胃炎多屬于中醫(yī)脾胃濕熱證型［7］。Hp感染屬中醫(yī)所說邪氣的范疇具有毒的性質(zhì)，邪氣損傷脾胃，使脾氣不升，胃氣不降，水液不能正常輸布而化為濕濁，蘊(yùn)于體內(nèi)日久而形成濕熱。其次為飲食失宜，不僅首先直接傷害脾胃，而且胃不受納與脾失健運(yùn)可以相互影響，最終形成脾胃受損、濕熱內(nèi)蘊(yùn)、邪氣內(nèi)結(jié)、升降失司的病理改變［6］。

本研究在繼承新安醫(yī)學(xué)“調(diào)補(bǔ)氣血、固本培元”治療脾胃病理論的基礎(chǔ)上，結(jié)合專家經(jīng)驗(yàn)從中醫(yī)理論出發(fā)提出“邪之所湊，其氣必虛”，“正邪相爭”而導(dǎo)致“正虛邪戀”的觀點(diǎn)。在益氣和中法針?biāo)幉⒂弥委熉詼\表性胃炎已取得較好臨床療效的臨床研究基礎(chǔ)上，采用脾胃培元法為主，以人參、黃芪、白術(shù)、茯苓、黃連、蒲公英、陳皮、甘草組成脾胃培元方，結(jié)合針刺中脘、足三里、內(nèi)關(guān)的針方，共同發(fā)揮培護(hù)中焦之元、調(diào)養(yǎng)脾胃、養(yǎng)胃祛邪的功效。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示模型組大鼠胃竇部炎癥程度較重，可見程度不等的點(diǎn)狀或片狀糜爛。治療各組胃黏膜炎癥反應(yīng)均較模型組有所減輕，其中針?biāo)幗M變化更明顯。提示脾胃培元法配合針刺療法對(duì)Hp所致胃黏膜損傷具有明顯的保護(hù)作用。且在抑制Hp感染方面，針?biāo)幗M優(yōu)于中藥組和針刺組，甚至優(yōu)于西藥組，提示脾胃培元法配合針刺療法對(duì)Hp相關(guān)性胃炎體內(nèi)Hp有一定抑殺作用?？梢?，脾胃培元法配合針刺療法對(duì)Hp相關(guān)性慢性胃炎Hp的清除及胃黏膜形態(tài)的改善有良好的效果。為臨床采取針?biāo)幗Y(jié)合治療Hp相關(guān)性胃炎提供了理論支持，但其作用機(jī)制有待進(jìn)一步研究探討。

［1］ 陳灝珠.實(shí)用內(nèi)科學(xué)［M］.12版，北京：人民衛(wèi)生出版社，2005：1863-1864.

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［3］ 李學(xué)軍，劉禮梅，吳倩，等.益氣和中法針?biāo)幉⒂弥委熉詼\表性胃炎 70 例［J］.安徽中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2011，30（5）：51-53。

［4］ 吳施國，蔣通榮.左金丸對(duì)幽門螺桿菌所致胃炎模型大鼠作用機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究［J］.山東中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2010，34（3）：275-277

［5］ 李忠仁.實(shí)驗(yàn)針灸學(xué)［M］.北京：中國中醫(yī)藥出版社，2003：340-350.

［6］ 孫靖若.黃連溫膽湯治療脾胃濕熱型幽門螺旋桿菌陽性淺表性胃炎的臨床療效觀察［J］.中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2007，25（9）：1952-1953.

［7］ 韓子巖，韓松巖，韓樹穎.慢性胃炎中醫(yī)辨證分型與悉尼內(nèi)鏡胃炎分類及HP感染相關(guān)性研究［J］.中醫(yī)雜志，2001，42（9）：556.