★ 舒任庚 鄭穎 張娣

(江西中醫(yī)學(xué)院 南昌 330004)

山蠟梅化學(xué)成分研究*

★ 舒任庚**鄭穎 張娣

(江西中醫(yī)學(xué)院 南昌 330004)

目的：研究山蠟梅(ChimonanthusnitensOliv.)葉中的化學(xué)成分。方法：利用硅膠柱色譜、Sephadex LH-20柱色譜、制備色譜等方法分離純化化合物，利用理化性質(zhì)、核磁光譜數(shù)據(jù)解析化合物結(jié)構(gòu)。結(jié)果：鑒定了7個(gè)化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)，分別為：(1)d-夏蠟梅堿,(2)6,7-二甲氧基香豆素，(3)東莨菪內(nèi)酯，(4)槲皮素，(5)山奈酚,(6)紫云英苷，(7)1,8-松油二醇，其中化合物6和7為首次從該植物中分得。

山蠟梅；化學(xué)成分；結(jié)構(gòu)鑒定

山蠟梅為我國(guó)特有的植物蠟梅科蠟梅屬山蠟梅(ChimonanthusnitensOliv.)的葉，橢圓形、卵狀披針形或卵狀橢圓形，具有芳香氣味。又稱(chēng)之為野蠟梅(《云南中藥資源名錄》)，亮葉蠟梅(《經(jīng)濟(jì)植物手冊(cè)》)，毛山茶、巖馬桑(《新華本草綱要》)，香風(fēng)茶(《安徽中草藥》)，民間使用歷史悠久，常用葉泡茶飲以防止感冒。目前已分得的化學(xué)成分主要為：揮發(fā)油類(lèi)、黃酮類(lèi)等化合物。為了進(jìn)一步系統(tǒng)研究山蠟梅生物活性的物質(zhì)基礎(chǔ)，挖掘該植物的藥用價(jià)值并為其資源的綜合開(kāi)發(fā)應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)，本課題擬對(duì)其化學(xué)成分進(jìn)行系統(tǒng)深入的研究，以期有新的發(fā)現(xiàn)。

1 儀器與材料

1.1 儀器

BRUKER DRX-500型核磁共振波譜儀，X4型顯微熔點(diǎn)測(cè)定儀，數(shù)顯恒溫水浴鍋(HH-2)，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器(RE-52)，超聲波清洗器KQ-250DB，循環(huán)水真空泵SHE-DC(III)，匯通LC600型高效液相中壓恒流色譜儀，匯通C18中壓柱(26cm×31cm，30-50μm)。

1.2 材料

試劑：石油醚，四氯化碳，氯仿，乙酸乙酯，丙酮，甲醇，均為分析純。藥材：山蠟梅，采自江西省上饒市婺源縣曉起鎮(zhèn)上臺(tái)村深山叢林(野生)，經(jīng)江西中醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院藥用植物學(xué)教研室葛菲教授鑒定為蠟梅屬植物山蠟梅(ChimonanthusnitensOliv.)的鮮葉，陰干后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

2 化合物的提取分離

提?。?009年7月份采摘山蠟梅鮮葉，陰干，約12kg，分4次用提取罐提取(80%乙醇)，每次3h，回收溶劑，得總浸膏約2 700g。總浸膏分次用0.5%H2SO4溶解，抽濾，將酸水合并，減壓濃縮，加氨水調(diào)PH值約12，抽濾，得少量沉淀。堿水液用氯仿萃取至檢識(shí)無(wú)顯色?；厥章确碌媒嗯c沉淀合并，稱(chēng)量約73.4g。分離：200-300目硅膠濕法裝柱，干法上樣，氯仿-甲醇梯度洗脫，每流份500mL，共收集42份。經(jīng)硅膠柱色譜、Sephadex LH-20凝膠柱色譜、制備色譜反復(fù)分離純化，得化合物1(78.3mg)、化合物2(2.3mg)、化合物3(2.4mg)、化合物4(2.1mg)、化合物5(2.5mg)、化合物6(26.09mg)、化合物7(26.3mg)、化合物8(5.9mg)。

3 化合物的結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1-d-夏蠟梅堿：深紅色羽狀結(jié)晶(氯仿)，改良碘化秘鉀試劑、碘-碘化鉀試劑、硫酸鈰-硫酸試劑檢測(cè)均呈陽(yáng)性，mp:195-197℃。1H-NMR(DMSO，500MHz)δ：6.92(2H，d，J=7.0Hz，H-4,4')，6.64(2H,t,J=7.5Hz，H-6,6')，6.30(2H，s， N-H)，6.29(2H,t,J=7.5Hz，H-5,5'),6.22(2H,d,J=7.0Hz,H-7,7'),4.21(2H,s,H-8a,8a')，3.01(2H,dt,J=13.0Hz，5.0Hz，H-3,3')，2.44(2H,dd, J=13.0 Hz,3.0 Hz,H-2,2')，2.26(6H,s,2×NCH3)，2.05(2H,dt, J=13.0 Hz,5.0 Hz,H-2,2'), 1.04(2H,dd, J=13 Hz,3.0 Hz ,H-3,3')。13C-NMR(DMSO，500MHz)δ：146.32(C-7a,C-7a'),125.91(C-6，C-6'),124.63(C-4，C-4'),124.53(C-3b,C-3b'),114.75(C-5，C-5'),111.15(C-7，C-7'),69.55(C-8a，C-8a'),46.14(C-2，C-2'),42.54(N-CH3，N-CH3')，35.32(C-3a，C-3a'),31.84(C-3,C-3')。將該化合物的波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道[1,2]數(shù)據(jù)比較，二者數(shù)據(jù)基本一致。故鑒定化合物1為d-夏蠟梅堿(d-Calycanthine)。

化合物2-6,7-二甲氧基香豆素：無(wú)色針狀結(jié)晶(氯仿)，mp：142-143℃。紫外光λ=254nm下有強(qiáng)烈藍(lán)紫色熒光。與6,7-二甲氧基標(biāo)準(zhǔn)品混合，3種不同體系的展開(kāi)劑展開(kāi)，TLC分析均顯示為單一斑點(diǎn)，且混合熔點(diǎn)不下降，故鑒定化合物2為6,7-二甲氧基香豆素(6,7-dimethoxycoumarin)。

化合物3-東莨菪內(nèi)酯：淡黃色針狀結(jié)晶(氯仿)，mp：209-210℃。紫外光λ=254nm下有藍(lán)紫色熒光。與東莨菪內(nèi)酯標(biāo)準(zhǔn)品混合，三種不同體系的展開(kāi)劑展開(kāi)，TLC分析均顯示為單一斑點(diǎn)，且混合熔點(diǎn)不下降，故鑒定化合物3為東莨菪內(nèi)酯(Isoscopletin)。

化合物4-山奈酚：淺黃色針狀結(jié)晶(氯仿)，mp：204-205℃。與山奈酚標(biāo)準(zhǔn)品混合點(diǎn)樣，3種不同體系的展開(kāi)劑展開(kāi)，均顯示為單一斑點(diǎn)，且混合熔點(diǎn)不下降，故推斷化合物4為山奈酚(Kaempferol)。

化合物5-槲皮素：淡黃色針狀結(jié)晶(氯仿)，mp：318-319℃。與槲皮素標(biāo)準(zhǔn)品混合點(diǎn)樣，3種不同體系展開(kāi)劑展開(kāi)，均顯示為單一斑點(diǎn)，且混合熔點(diǎn)不下降，故推斷化合物5為槲皮素(Quercetin)

化合物6-紫云英苷：黃色結(jié)晶(甲醇)，mp：170-171℃。1H-NMR(DMSO，500MHz)δ：12.63(1H,s,H-5)，10.92(1H,br，H-7)，10.25(1H,br，H-4')，8.05(2H,d,H-2',6')，6.90(2H,d,H-3',5')，6.45(1H,d，H-8)，6.22(1H,d，H-6)，5.47(1H,d，H-1'')，5.39(1H,d)，5.10(1H,d)，5.00(1H,s)，4.31(1H,t,)，3.17-3.60(6H,m)。13C-NMR(DMSO，500MHz)δ：177.59(C-4)，164.23(C-7),161.33(C-5)，160.05(C-4')，156.51(C-9)，156.41(C-2)，133.29(C-3)，131.02(C-2',6')，121.02(C-1')，115.24(C-3',5')104.13(C-10)，100.96(C-1'')，98.82(C-6)，93.79(C-8),77.58(C-5'')，76.51(C-3'')，74.33(C-2'')，69.99(C-4'')，60.94(C-6'')。將該化合物的波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道[3]數(shù)據(jù)比較，二者數(shù)據(jù)基本一致。故鑒定化合物6為紫云英苷(Astragalin)。

化合物7-1,8-松油二醇：淡黃色晶體(甲醇)，mp：116-117℃。1H-NMR(CD3OD，500MHz)δ：1.77(2H,d,H-2,6)，1.72(2H,d,H-3,5)，1.45(2H,td,H-3,5)，1.28(1H,dt,H-4)，1.22(1H,d,H-6)，1.19(3H,s,H-1a)，1.16(1H,d,H-2)，1.14(6H,s,H-8,9)。13C-NMR(CD3OD，500MHz)δ：73.22(C-7)，71.48(C-1)，50.16(C-4)，41.28(C-3,5)，27.22(C-8,9)，26.12(C-2,6)，25.43(C-1a)。將該化合物的波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道[4]數(shù)據(jù)比較，二者數(shù)據(jù)基本一致。故鑒定化合物7為1,8-松油二醇(Terpin)。

[1]Hall E S, Mccapra F, Scott A I. Biogenetic-type synthesis of the calycanthaceous alkaloids[J]. Tetrahedron, 1967, 23(10):4 131-4 142.

[2]Tokyama T, Daly J W. Steroidal alkaloids (batrachotoxins and 4β-hydorxybatrachotoxin)，"indole alkaloids"(calycanthine and chimonanthine) and a piperidinyldipyridine alkaloid (noranabasamine) in skin extracts from the Colombian poison-dart Frogphyllobates terribilis(Dendrobatidae)[J]. Tetrahedron, 1983, 39(1):41-47.

[3]郭澄，韓公羽，蘇中武.南方菟絲子化學(xué)成分的研究[J].中國(guó)藥學(xué)雜志,1997,32(1):8-10.

[4]Atlas of spectral data and physical constants for organic compounds 2ed, t34, 1975.

StudiesonChemicalConstituentsofChimonanthusNitensOliv*

SHURen-geng**,ZHENGYing,ZHANGDi

SchoolofPharmacy,JiangxiUniversityofTraditionalChineseMedicine,Nanchang330004

Objective: To investigate the chemical constituents of Chimonanthus nitens Oliv. Method: The chemical components were isolated and purified by silica gel column, Sephadex LH-20 column and preparative thin chromatography. The chemical structures were identified by their physical properties and spectral analyses of NMR. Result: Eight compounds were isolated and identified as d-Calycanthine(1), 6,7-Dimethoxycoumarin(2), Isoscopletin(3), Quercetin(4), Kaempferol(5), Astragalin(6), terpin(7). Conclusion: Compounds 6 and 7 were obtained from the genus for the first time.

Chimonanthus Nitens Oliv.; Chemical Constituents; Structure Identify

“十一五”支撐計(jì)劃資助項(xiàng)目(項(xiàng)目編號(hào)：2006BAI06A01-01)；國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(項(xiàng)目編號(hào)：81360631)；江西省教育廳資助項(xiàng)目(項(xiàng)目編號(hào)：GJJ08326)。

**通訊作者：舒任庚，男，教授，碩士研究生導(dǎo)師，Tel:0791-87118993。

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2013-06-13)