馬閃閃 馬賢德 孫宏偉 陳文娜 陳殿學(xué)

遼寧中醫(yī)藥大學(xué)，遼寧 沈陽(yáng) 110847

競(jìng)技運(yùn)動(dòng)和全民健身是我國(guó)體育事業(yè)的發(fā)展戰(zhàn)略，尤其在08年北京奧運(yùn)會(huì)之后，運(yùn)動(dòng)和健康成為全民關(guān)注的熱點(diǎn)話題之一。但是，由于人們對(duì)運(yùn)動(dòng)科學(xué)缺乏足夠的認(rèn)識(shí)，很多情況下，運(yùn)動(dòng)不但沒(méi)有增強(qiáng)人們的體質(zhì)反而對(duì)機(jī)體的免疫功能造成了不良的影響。例如，運(yùn)動(dòng)員在大負(fù)荷訓(xùn)練和比賽期間很容易因免疫抑制患各種感染疾病;“全民健身”熱潮中，人們對(duì)運(yùn)動(dòng)量和形式缺乏科學(xué)合理的安排，損害免疫系統(tǒng);當(dāng)前社會(huì)生活節(jié)奏加快，長(zhǎng)時(shí)間高強(qiáng)度緊張工作使機(jī)體免疫系統(tǒng)處于抑制狀態(tài)，從而對(duì)某些疾病易感。研究表明:一次高強(qiáng)度長(zhǎng)時(shí)間運(yùn)動(dòng)引起免疫系統(tǒng)功能的暫時(shí)性抑制［1］。因而，預(yù)防運(yùn)動(dòng)性免疫抑制和促進(jìn)運(yùn)動(dòng)后免疫功能恢復(fù)是運(yùn)動(dòng)免疫學(xué)研究的焦點(diǎn)之一。運(yùn)動(dòng)免疫增強(qiáng)營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)劑的合理使用在一定程度上解決了這一難題，國(guó)內(nèi)外越來(lái)越多的學(xué)者把運(yùn)動(dòng)營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)劑的開(kāi)發(fā)重點(diǎn)轉(zhuǎn)移到我國(guó)傳統(tǒng)中藥。

人參屬于傳統(tǒng)滋補(bǔ)強(qiáng)壯類中藥，具有大補(bǔ)元?dú)?、固脫生津的功用，在提高機(jī)體免疫力方面有著獨(dú)特的療效［2］。本實(shí)驗(yàn)嘗試用人參煎劑調(diào)節(jié)力竭運(yùn)動(dòng)后的免疫抑制癥狀，在運(yùn)動(dòng)后不同時(shí)間測(cè)量血清IFN－γ和IL－4水平，觀察小鼠免疫功能的變化，探討人參煎劑能否改善一次力竭運(yùn)動(dòng)導(dǎo)致的免疫抑制，為人參煎劑在競(jìng)技體育和全民健身中發(fā)揮有效的免疫調(diào)節(jié)作用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 潔凈級(jí)健康昆明種小鼠96只，雌雄各半，體重 (20±2)g，購(gòu)于遼寧中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物中心，分籠飼養(yǎng)，自然光照，自由飲水進(jìn)食。

1.1.2 人參煎劑制備 人參選用遼寧桓仁產(chǎn)6年生曬參，切片，浸泡1小時(shí)，傳統(tǒng)方法煎煮3次，過(guò)濾、合并、濃縮至50%濃度，裝入玻璃瓶中，低溫冷藏備用。

1.2.3 實(shí)驗(yàn)試劑和儀器 電子天枰，型號(hào)JY5002，上海精密科學(xué)儀器有限公司生產(chǎn);酶標(biāo)儀，型號(hào)Anthos2010，奧地利Anthos Labtec Instruments生產(chǎn);超速離心機(jī)，型號(hào)DU PONT/SORV－LL，OTD－558，美國(guó)生產(chǎn);小鼠 IL－4 ELISA試劑盒，購(gòu)自上海越研生物科技有限公司，生產(chǎn)批號(hào)DRE61041;小鼠IFN－γ ELISA試劑盒，購(gòu)自上海越研生物科技有限公司，生產(chǎn)批號(hào)DRE61042。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 分組方法 96只鼠隨機(jī)分為以下幾組:模型組(M)40只，模型+人參組 (MG)40只，按照取材時(shí)間不同平均分成5組，即力竭游泳后即刻組 (M1、MG1)、6h組(M2、MG2)、24h組(M3、MG3)、48h組 (M4、MG4)、72h組(M5、MG5)。另設(shè)空白對(duì)照組(B)、人參對(duì)照組(G)，每組8只。

1.2.2 給藥方法 小鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后，G和MG組灌服人參煎劑0.3ml/d/只，B和M組灌服等量生理鹽水，連續(xù)14天。

1.2.3 造模方法 最后一次給藥結(jié)束后1h，M和MG小鼠進(jìn)行一次無(wú)負(fù)重游泳直至力竭。游泳池水深約30cm，溫度控制在 (32±2)℃。當(dāng)小鼠浮在水面不動(dòng)時(shí)，輕輕攪拌周圍水面，迫使小鼠持續(xù)運(yùn)動(dòng)，游泳完畢后用紗布吸干小鼠身上的水，再用吹風(fēng)機(jī)吹干，避免小鼠感冒。

力竭判斷標(biāo)準(zhǔn)參照Dawson法:游泳動(dòng)作緩慢，明顯失調(diào)，沉入水中10s不能露出水面，撈出后翻正反射消失［3］。1.3 血清IFN－γ和IL－4含量測(cè)定 具體操作方法參照試劑盒說(shuō)明書。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì) 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS19.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理，組內(nèi)比較采用單因素方法分析，組間比較采用獨(dú)立樣本T檢驗(yàn)，統(tǒng)計(jì)結(jié)果用“均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差 (±s)”表示。

2 結(jié)果與分析

表1 各組小鼠血清IFN－γ、IL－4及IFN－γ/IL－4的表達(dá)比較

2.1 小鼠血清IFN－γ水平變化 與B比，M1、M2、M3、M4、MG1、MG2、MG3降低 (P＜0.01或P＜0.05)?？梢?jiàn)，一次力竭游泳使小鼠血清IFN－γ含量降低，M組小鼠72h恢復(fù)至正常水平，MG組小鼠48h恢復(fù)至正常水平。

在相同時(shí)間點(diǎn):MG小鼠血清IFN－γ含量普遍比M高，MG4小鼠血清IFN－γ含量明顯高于M4，P＜0.05。可見(jiàn)，人參煎劑可提力竭高運(yùn)動(dòng)后小鼠血清IFN－γ水平。

2.2 小鼠血清IL－4水平變化 與B比，M2明顯增高，P＜0.05。可見(jiàn)，一次力竭游泳后6h小鼠血清IL－4含量一過(guò)性增高，并很快恢復(fù)。

在相同時(shí)間點(diǎn):M小鼠血清IL－4含量普遍高于MG，其中M2與MG2差異明顯，P＜0.05?？梢?jiàn)，人參煎劑可維持小鼠血清IL－4在正常水平表達(dá)。

2.3 小鼠血清IFN－γ/IL－4比值變化 與B比:M1、M2、M3、M4、MG1、MG2比值降低 (P＜0.01或 P＜0.05);MG4、MG5比值增大，分別為P＜0.05和P＜0.01?？梢?jiàn)，M小鼠一次力竭游泳后72h恢復(fù)正常值;MG小鼠24h恢復(fù)正常值，48h和72h比值大于B組。人參煎劑可促進(jìn)小鼠IFN－γ/IL－4恢復(fù)正常水平，恢復(fù)速度明顯快于M組小鼠。

在相同時(shí)間點(diǎn)比較:M組各時(shí)間點(diǎn)IFN－γ/IL－4比值均高于MG組 (P＜0.01或P＜0.05)?？梢?jiàn)，灌服人參煎劑可使小鼠IFN－γ/IL－4比值增大。

3 討論

免疫功能是人體重要的防御機(jī)能，也是人體體質(zhì)的代表性指標(biāo)之一，運(yùn)動(dòng)對(duì)免疫功能有十分重要的影響，但并不是所有的運(yùn)動(dòng)都能增強(qiáng)人體的免疫功能。國(guó)內(nèi)外大量文獻(xiàn)表明［3－5］，急性大強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)和力竭性運(yùn)動(dòng)都會(huì)使機(jī)體的免疫功能不同程度抑制，從而對(duì)某些疾病易感。因此，對(duì)運(yùn)動(dòng)后免疫抑制調(diào)理的研究是當(dāng)今運(yùn)動(dòng)免疫學(xué)研究的焦點(diǎn)之一。目前常用的調(diào)理措施有［6－7］:①營(yíng)養(yǎng)調(diào)理，包括基本營(yíng)養(yǎng)素和功能因子兩大類。②自我保護(hù)調(diào)理，主要措施有多樣化平衡膳食、生活規(guī)律、睡眠充足、防止過(guò)度訓(xùn)練等。③傳統(tǒng)中醫(yī)藥調(diào)理。中藥對(duì)免疫系統(tǒng)具有雙向調(diào)節(jié)作用，并且中藥的“整體調(diào)節(jié)作用”能調(diào)動(dòng)機(jī)體的免疫功能和激發(fā)免疫應(yīng)答，被越來(lái)越多應(yīng)用于運(yùn)動(dòng)營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)劑的開(kāi)發(fā)研究。本實(shí)驗(yàn)的目的是探討人參煎劑能否緩解力竭性運(yùn)動(dòng)導(dǎo)致的運(yùn)動(dòng)性免疫抑制，能否促進(jìn)免疫功能盡快恢復(fù)正常狀態(tài)，為改善力竭運(yùn)動(dòng)導(dǎo)致的免疫功能抑制尋找科學(xué)有效的調(diào)理方法，同時(shí)為人參在運(yùn)動(dòng)營(yíng)養(yǎng)方面的開(kāi)發(fā)提供科學(xué)依據(jù)。

在免疫系統(tǒng)中，IFN－γ和IL－4是一對(duì)相互調(diào)節(jié)的重要細(xì)胞因子，IFN－γ是Th1細(xì)胞分泌的標(biāo)志性細(xì)胞因子，IL－4是Th2細(xì)胞分泌的標(biāo)志性細(xì)胞因子，IFN－γ和IL－4既相互抑制又自身促進(jìn)，除了維持自身的平衡和穩(wěn)定，對(duì)維持Th1/Th2的平衡也起重要作用［5］。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，一次力竭游泳可使小鼠血清IFN－γ含量降低，IL－4含量一過(guò)性升高，IFN－γ與IL－4比值下降，Th1/Th2向Th2漂移，與Simth［8］報(bào)道的“過(guò)度運(yùn)動(dòng)時(shí)，機(jī)體免疫功能受到抑制，Th1/Th2比值下降”一致。在免疫功能恢復(fù)過(guò)程中，灌服人參煎劑的小鼠在力竭游泳后各項(xiàng)指標(biāo)恢復(fù)速度更快，從而縮短了由于力竭運(yùn)動(dòng)造成的的免疫抑制時(shí)間。其中，MG組小鼠IFN－γ/IL－4比值在力竭游泳后48h和72h高于B和G組，這可能與運(yùn)動(dòng)后機(jī)體的超量恢復(fù)有關(guān)，有待于進(jìn)一步研究探討。從相同時(shí)間點(diǎn)取材結(jié)果來(lái)看，G和MG組小鼠免疫功能明顯好于B和M組小鼠，這表明人參煎劑有效地緩解了由大運(yùn)動(dòng)量所致的免疫功能低下?tīng)顩r。

綜上所述，由本實(shí)驗(yàn)可得出以下結(jié)論:人參煎劑可促進(jìn)小鼠血清IFN－γ和IL－4含量恢復(fù)至正常水平，縮短力竭運(yùn)動(dòng)后的免疫抑制時(shí)間并預(yù)防力竭運(yùn)動(dòng)造成的免疫功能低下，對(duì)力竭運(yùn)動(dòng)造成的免疫功能低下具有有效的預(yù)防和調(diào)節(jié)作用。

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