閆巧梅　丁海麥　蘇燕

中圖分類號：G541.1 文獻標識碼：B 文章編號：1006-5962（2013）06-0312-01

血漿脂蛋白瓊脂糖電泳是醫(yī)學院校生物化學和臨床生化的基本實驗。在實驗教學過程中進程遇到由于學生加樣不好和紗布與電極槽相連不當，出現(xiàn)電泳條帶不整齊或瓊脂糖凝膠破裂影響實驗結(jié)果。筆者在教學過程中通過對加樣方法和紗布與電極槽相連的改進，是一般學生自己初次操作都能取得滿意實驗結(jié)果。

1 加樣方法改進

傳統(tǒng)的先在凝固的瓊脂糖凝膠板距一端的2cm處，用自制打孔器（在小玻璃片的兩面固定兩片小膠片）垂直打入凝膠后立即取出，然后用膠片剝出長方小條凝膠。用小片濾紙吸干小槽中的水分，注意不要損壞槽邊緣的凝膠。最后，再用微量注射器吸取經(jīng)過預染的血清約20ml注入凝膠板上的小槽內(nèi)。

改進后在凝固的瓊脂糖凝膠板距一端的2cm處，用電泳厚濾紙垂直插入凝膠后稍等片刻（大約15秒）取出，立刻用微量注射器吸取經(jīng)過預染的血清約20ml注入凝膠板上的狹縫內(nèi)（圖1）。

a 1、4為改進前加樣效果 2、3為改進后加樣效果

b 1、2 自制打孔器和剝刀 3 厚電用濾紙

2 紗布與電極槽相連改進

傳統(tǒng)的將凝膠玻璃板放入電泳槽兩根塑料橫桿上，用在妥緩沖液浸濕的兩層濾紙或紗布輕輕緊密貼在凝膠板兩端，紗布的另一端浸于電泳槽內(nèi)的巴比妥緩沖液中，接通電源，電壓為100～120V，每片電流為3～4mA，約經(jīng)電泳40～60min，可見分離脂蛋白色帶。

改進后將凝膠玻璃板放入電泳槽兩根塑料橫桿上，同時在玻璃板兩側(cè)分別再放一塑料橫桿，用在妥緩沖液浸濕的兩層濾紙或紗布先輕輕緊密貼玻璃板兩側(cè)的塑料橫桿上，紗布的另一端浸于電泳槽內(nèi)的巴比妥緩沖液中，使濾紙或紗布重心在此塑料橫桿上，然后將兩層濾紙或紗布輕輕緊密貼在凝膠板兩端，接通電源，電壓為100～120V，每片電流為3～4mA，約經(jīng)電泳40～60min，可見分離脂蛋白色帶（圖2）。多放兩個塑料橫桿主要是避免凝膠拉破。

3 實驗結(jié)果比較

通過對加樣方法和紗布與電極槽相連改進，電泳結(jié)束后玻璃板上瓊脂糖凝膠完整，沒出現(xiàn)破裂，電泳結(jié)果條帶整齊，并且明顯看出三條電泳區(qū)帶。而改進前電泳結(jié)果很容易出現(xiàn)月牙形和拖尾現(xiàn)象，區(qū)帶不好區(qū)分。

參考文獻

[1] 生物化學與分子生物學實驗技術(shù)教程 蘇燕 軍醫(yī)出版社 2013.4