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回陽玉龍膏對乳腺增生大鼠的治療作用

2013-05-24 11:55彭成浩劉國文楊俊省
中國腫瘤外科雜志 2013年6期
關(guān)鍵詞:腺泡玉龍增生癥

彭成浩, 劉國文, 楊俊省

乳腺增生癥是最常見的乳腺疾病之一,常見不同程度的乳房疼痛以及腫塊,其發(fā)病率占育齡婦女的80% ~90%,占全部乳房疾病的75%,癌變率2% ~4%,其高發(fā)人群為30~45歲的女性[1]。目前乳腺增生癥的治療手段主要分三大類:西藥、中藥和物理治療。西藥多選用激素或受體阻斷劑,雖有療效,但往往使激素代謝更加紊亂[2]。物理治療多采用磁療,取得了較可靠的療效,但起效相對較慢,且理療的實施需患者在醫(yī)院才能進行[3],因此其推廣受到了一定限制。中藥治療乳腺增生癥有其獨到之處,且療效確切,為目前治療的主要手段[4-5]。本研究從明代陳實功所著的《外科正宗》中選取處方,將草烏、干姜、赤芍、白芷、南星、肉桂溫陽藥研制成回陽玉龍膏,考察其對乳腺增生大鼠的治療作用,為其臨床應(yīng)用提供實驗依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 SD雌性大鼠19只,清潔級,體重(210±10)g,75~85日齡。購于南華大學實驗動物部(動物合格證號:SCXK湘2004-0010)。實驗鼠體重和周齡統(tǒng)計學上無差異,按標準飲食,分籠飼養(yǎng)于相同的環(huán)境中。

1.2 藥物及試劑 回陽玉龍膏藥物組成:草烏、干姜各30 g,赤芍、白芷、南星各10 g,肉桂5 g。雌二醇注射液以及雌二醇、孕酮、泌乳素放免試劑盒均購自天津金耀氨基酸制藥有限公司,黃體酮注射液購自浙江仙琚制藥股份有限公司。

1.3 實驗方法 (1)乳腺增生癥模型的建立:19只SD雌性大鼠后肢內(nèi)側(cè)肌肉注射苯甲酸雌二醇0.5 mg/kg,1次/天,連續(xù)25天;后肌肉注射黃體酮5 mg/kg,1次/天,連續(xù)5 天[6]。隨機處死 5 只大鼠,檢驗造模成功率。(2)治療方法:將剩余14只大鼠按干預方法不同采取盲法隨機分為對照組(A組)及中藥組(B組)。參考正常SD雌性大鼠胸圍、腹圍平均值,設(shè)計治療胸帶。胸帶呈長方形,自然長度16 cm,寬6 cm,拉緊后最短可達8 cm,由內(nèi)袋、外袋、扣帶處三部分組成??蹘^(qū)位于兩端,由兩層棉布組成,內(nèi)縫有3條長約3 cm的貼片。A組:僅用空白胸帶包裹,未做其他處理。B組根據(jù)人體體表面積計算法及許文生公式計算得出實驗大鼠的中藥用量:草烏、干姜各 0.6 g;赤芍、白芷、南星各0.2 g,肉桂0.1 g,研細末混勻黃酒調(diào)勻放入治療胸帶內(nèi)側(cè),包裹給藥,每天定時換藥,連續(xù)給藥30天。(3)指標測定:于第31天測量兩組大鼠第2對乳頭的高度及直徑,隨后將動物經(jīng)3%水合氯醛300 mg/kg腹腔麻醉,后切取第2對完整的乳房待病理檢測用。隨即處死動物,從心臟中抽取5 mL血液作雌二醇(E2)、孕酮(P)、泌乳素(PRL)及肝腎功能檢查。切取大鼠心臟,將其與上述切除的第2對乳房分別用10%的福爾馬林液固定,石蠟包埋切片,HE染色,在光鏡下觀察,做病理切片分析。(4)乳房大體形態(tài)判定標準為:改變不明顯者為(-),單純腫大者為(+),紅腫大者為(++)。乳頭形態(tài)學判定標準為:無變化,光鏡下基本恢復到正常乳腺結(jié)構(gòu)為(-);乳頭大,光鏡下可見結(jié)締組織增生為(+);乳頭腫大,光鏡下可見結(jié)締組織及腺導管增生為(++);乳頭紅、腫、大,光鏡下可見結(jié)締組織成纖維細胞增生,腺導管增生可見數(shù)目增加,管腔擴大,腺導管上皮增生為(+++)。乳腺增生病理程度分為4級:乳腺小葉不增生,腺體數(shù)量極少,腺泡不擴張,處于靜止狀態(tài)(-);乳腺小葉無明顯增生,個別腺泡有輕度增生,無擴張(+);乳腺小葉大部分增生,部分腺泡明顯擴張(++);乳腺小葉明顯增生,腺泡處于極度擴張狀態(tài),腺上皮細胞呈扁平狀,腺泡內(nèi)及導管內(nèi)有大量的分泌物(+++)。

1.4 統(tǒng)計學方法 采用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行分析處理。計量資料數(shù)據(jù)均以±s描述數(shù)據(jù)的集中和離散趨勢,組間比較采用t檢驗;計數(shù)資料采用χ2檢驗。檢驗水準:以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 造模結(jié)果 造模后隨機處死5只大鼠,病理檢測,確定造模均獲成功。觀察其余大鼠乳房大體及乳頭形態(tài),確定本組造模成功率為100%。

2.2 乳房形態(tài)對比 肉眼觀察A組大鼠乳頭突出皮毛,脫毛后,可見乳頭增大、充血豎起,顏色暗紅,觸之較硬;B組可見大鼠乳頭較前縮小,成米粒狀,稍隆起,顏色稍紅潤,觸之較軟。兩組大鼠第2對乳頭的直徑和高度見表1,結(jié)果顯示A組的乳頭直徑和高度明顯大于B組,兩者相比差異有統(tǒng)計學意義(均P<0.05)。乳房大體形態(tài)比較:A組(-)6只,(+)1只,(++)0只;B組(-)0只,(+)2只,(++)5只;兩組相比B組乳房大體形態(tài)可見明顯好轉(zhuǎn)。乳頭形態(tài)學比較:A組(-)0只,(+)0只,(++)2只,(+++)5只;B組(-)3只,(+)4只,(++)0只,(+++)0只。與B組比較,A組大鼠乳腺導管上皮細胞增生明顯,管腔明顯擴張有分泌物,小葉明顯增多,腺泡增生明顯;B、C、D、E組大鼠小葉增大不明顯,腺泡腔和腺導管腔少數(shù)擴張,分泌物減少。形態(tài)學上B組可見明顯好轉(zhuǎn)。

表1 各組大鼠乳頭高度以及直徑比較 ± s,n=7)

表1 各組大鼠乳頭高度以及直徑比較 ± s,n=7)

組別 乳頭高度(mm) 乳頭直徑(mm)A組2.35 ±0.18 1.86 ±0.05 B 組 2.08 ±0.11 1.52 ±0.06 t值 2.44 3.67 P值0.03 0.02

2.3 乳腺增生病理對比 病理切片示,A組大鼠乳腺導管上皮細胞增生明顯,管腔明顯擴張,有分泌物,小葉明顯增多,腺泡增生明顯(圖1);B組大鼠小葉增大不明顯,腺泡腔和腺導管腔少數(shù)擴張,分泌物減少(圖2)。兩組的小葉數(shù)、腺泡數(shù)、腺泡擴張程度及上皮增生情況相比,均有好轉(zhuǎn),具體見表2。

2.4 兩組生殖激素對比 結(jié)果見表3。B組與A組比較,血中E2、PRL水平下降,P水平升高,差異有統(tǒng)計學意義(均P<0.05)。

2.5 兩組肝腎及心肌毒性對比 肝腎毒性比較結(jié)果見表4。結(jié)果表明,兩組的血清肌酐(BUN)、尿素氮(Cr)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)及總膽紅素(TBIL)水平差異無統(tǒng)計學意義(均 P>0.05)。心肌細胞病理切片(圖3、4)顯示,兩組心肌纖維均排列整齊,無心肌纖維破壞,細胞質(zhì)豐富均勻,細胞間隙正常,未見水腫。

表2 兩組乳腺病理組織學比較

表3 兩組生殖激素的比較±s,n=7)

表3 兩組生殖激素的比較±s,n=7)

組別 E2(pg/mL) P(ng/mL) PRL(ng/mL)A 組 19.97 ±1.22 16.65 ±0.77 6.59 ±0.99 B 組 13.69 ±0.79 27.80 ±1.02 5.44 ±0.93 t值 5.38 7.75 2.13 P 值 0.00 0.00 0.03

表4 肝、腎毒性的比較±s,n=7)

表4 肝、腎毒性的比較±s,n=7)

組別 BUN(mmol/L)TBIL(μmol/L)A 組 5.38 ±0.48 34.6 ±3.1 46.00 ±11.63 162.55 ±25.05 3.969 ±1.33 B 組 5.29 ±0.53 34.8 ±3.9 47.54 ±10.17 161.84 ±23.85 3.859 ±1.66 t值 1.29 1.08 1.22 1.05 1.16 P 值 0.73 0.91 0.79 0.96 0.89 Cr(μmol/L)ALT(U/L)ALT(U/L)

3 討論

乳腺增生是乳房常見良性增生性疾病,以乳房疼痛和腫塊為主要表現(xiàn),且隨月經(jīng)周期或情緒波動呈現(xiàn)周期性變化。疼痛一般以脹痛為主,亦有刺痛、牽拉痛或隱痛,可累及一側(cè)或雙側(cè)乳房。疼痛常呈周期性,即月經(jīng)前加重,月經(jīng)后減輕或消失。腫塊邊界不甚清楚,質(zhì)地中等或韌硬不堅,且常有觸痛。乳腺增生癥屬于中醫(yī)“乳癖”的范疇,中醫(yī)藥治療以活血化瘀、化痰散結(jié)為本。然而單純口服中藥復方湯劑療效緩慢,服藥量大,一般患者難以堅持?;仃栍颀埜喑鲎悦鞔悓嵐λ饪茖V锻饪普凇?,有溫陽解凝、活血化痰之功;主治陽虛寒凝之局部腫硬。將其制備成膏劑,局部給藥可避免服用中藥的缺點,因此,本研究構(gòu)建大鼠乳腺增生的模型,考察模型大鼠局部應(yīng)用回陽玉龍膏的療效。

乳腺組織是性腺激素的靶器官,乳腺的生理、病理改變與激素的調(diào)節(jié)關(guān)系十分密切。從發(fā)生發(fā)育,增殖與復舊的交替,到最終腺體退化,這一系列復雜的變化,都是在下丘腦-垂體-卵巢軸及其他內(nèi)分泌激素的綜合作用下發(fā)生的。現(xiàn)代醫(yī)學認為,乳腺增生病與機體雌激素水平過高而黃體酮拮抗不足有著密切的關(guān)系。雌激素的過度刺激可使乳腺上皮細胞及間質(zhì)細胞增生,使結(jié)締組織水、鈉儲留增加,進而導致小葉間水腫,雌孕激素平衡失調(diào),使雌激素長期刺激乳腺組織,而無孕激素的節(jié)制和保護作用是導致乳腺增生的重要原因[2,6]。

本研究模擬人類乳腺增生癥的發(fā)病機制,使用苯甲酸雌二醇和黃體酮干預,成功構(gòu)建了大鼠乳腺增生模型。模型大鼠的乳頭高度、乳房直徑及乳腺組織形態(tài)均發(fā)生變化。經(jīng)過回陽玉龍膏干預后結(jié)果顯示,與對照組比較,干預組大鼠乳頭高度以及直徑明顯縮小,且差異具有統(tǒng)計學意義,此結(jié)果可證明,回陽玉龍膏可以使大鼠乳腺增生程度好轉(zhuǎn),對乳腺增生癥具有較好的治療作用。此外,通過對兩組大鼠的雌激素水平檢測發(fā)現(xiàn):與對照組比較,回陽玉龍膏能夠使雌二醇 (E2),泌乳素(PRL)均明顯降低,而孕酮(P)明顯升高,差異具有統(tǒng)計學意義,這說明回陽玉龍膏可以影響乳腺增生大鼠的雌激素水平,此可能是回陽玉龍膏治療乳腺增生的機制之一。與此同時,本研究又對大鼠的肝、腎功能和心肌細胞進行了生化及病理檢測,結(jié)果顯示使用回陽玉龍膏后,模型大鼠的肝、腎功能無明顯變化,無心肌纖維的破壞,細胞間隙正常,未見水腫。由此可見,回陽玉龍膏對于乳腺增生的大鼠不僅具治療作用,且較為安全,但能否用于臨床治療乳腺增生,尚需進一步的臨床研究。

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[3]褚紅梅.中西醫(yī)結(jié)合治療乳腺增生癥2 000例[J].中國性科學,2010,19(2):39-40.

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[6]許能.沖任失調(diào)而致乳癖與周期性激素分泌失調(diào)的關(guān)系[J].上海中醫(yī)藥雜志,1996,7(1):16-17.

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