惠參軍，査光明，吳文峰，焦顯芹，楊國宇

（1.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 牧醫(yī)工程學(xué)院，河南 鄭州 450002；2.鄭州大學(xué) 第二附屬醫(yī)院，河南 鄭州 450014）

媒體和網(wǎng)絡(luò)以“校園生物安全還有哪些漏洞”及“杜絕高校實驗室安全隱患路有多遠”為題，報道了2010年12月某大學(xué)的一次“羊活體解剖學(xué)實驗”讓28名師生染上了布魯氏菌病的生物安全事故。在《中華人民共和國傳染病防治法》中，布魯氏菌病與艾滋病、非典、炭疽等同被列為乙類傳染病，是繼“SARS”以來的又一例人畜共患病。該起事故為全國高校的動物實驗教學(xué)敲響了警鐘，使得許多學(xué)校更加重視動物生物安全問題，進一步強化了對實驗教學(xué)工作的檢查與監(jiān)督。為此，筆者依據(jù)多年的教學(xué)經(jīng)歷和常年對教學(xué)用實驗動物管理的經(jīng)驗，提出教學(xué)實驗用動物進入實踐教學(xué)的3個重要環(huán)節(jié)，以及動物實驗中生物安全防護管理的措施。

1 教學(xué)用動物與動物實驗

教學(xué)用動物即實驗用動物，有別于人們常說的實驗動物。高校依據(jù)自身教學(xué)環(huán)節(jié)進行的實驗教學(xué)和某些科學(xué)實驗為了達到更好的效果，就不得不選擇實驗用動物。目前，我國農(nóng)業(yè)高校教學(xué)常用的實驗用動物有產(chǎn)業(yè)家畜（豬、馬、牛、羊、雞、鴨、鵝、鴿、兔、魚、蝦、蛙、龜?shù)龋┖蜕鐣倚螅ㄈ?、貓、金魚等）[1]。

動物實驗是醫(yī)學(xué)研究常用的方法和手段。實驗醫(yī)學(xué)的興起揭開了生命的奧秘，在人類疾病的調(diào)查和防治研究等諸多方面發(fā)揮著巨大作用。例如果蠅對遺傳學(xué)的貢獻、青蛙對生理學(xué)的貢獻、犬對實驗外科的貢獻、各種嚙齒類動物對人類疾病研究的貢獻[2]，均說明用于教學(xué)和科研的實驗用動物功不可沒。而高等學(xué)校的動物實驗課是對學(xué)生進行科學(xué)實驗方法、技能、作風(fēng)等培養(yǎng)和訓(xùn)練的主要渠道。它不僅能讓學(xué)生從活生生的、豐富多彩的生命現(xiàn)象中認識和探索生命現(xiàn)象的本質(zhì)，還可以大大提高學(xué)習(xí)興趣，加深對理論知識的理解，有利于培養(yǎng)學(xué)生的創(chuàng)新能力和對真理永無止境的探求精神。

1.1 動物實驗的意義

動物實驗（animal experiment）是指在實驗室內(nèi)，為了獲得有關(guān)生物學(xué)、醫(yī)學(xué)等方面的新知識或解決具體問題而使用動物進行的科學(xué)研究，包括各種實驗方法、技術(shù)操作及人類疾病的動物模型復(fù)制等[3]。動物實驗的最終目的是通過對動物本身生命現(xiàn)象的研究，進而推用到人類，探索生命奧秘，進而控制人類的疾病和衰老。因此，實驗用動物的重要性愈來愈被人們所認識，它已被認為是人類追求幸福生活的支柱，故實驗動物科學(xué)亦被稱為生命科學(xué)。

隨著醫(yī)學(xué)生物科學(xué)的快速發(fā)展，人們認識到公害問題不僅造成糧食、人口、老年人等重大社會問題，而且還涉及到地球上生活著的動物生存問題，例如產(chǎn)業(yè)公害、食品公害、藥品毒性等，均直接影響人體健康。對這些問題的研究，最終要通過動物實驗來闡明并加以解決。另者，幾乎所有的生命科學(xué)領(lǐng)域的科研、教學(xué)、生產(chǎn)、檢定、安全評價和成果評定都離不開動物實驗，我國僅生物醫(yī)學(xué)科研課題就有60%以上需要動物實驗[4]。先進國家對實驗動物科學(xué)的發(fā)展均給予了高度的重視，所投入的財力、物資和技術(shù)力量幾乎可與發(fā)展原子能科學(xué)相提并論，其重要意義不言而喻。

1.2 實驗用動物管理現(xiàn)狀

為了加強實驗用動物的管理，保證實驗用動物質(zhì)量，以適應(yīng)實驗教學(xué)、科學(xué)研究、經(jīng)濟建設(shè)、社會發(fā)展及國際交流的需要，各有關(guān)高等院校、科研機構(gòu)或相關(guān)部門亦建立了不同規(guī)格、不同層次、不同形式、不同用途的實驗動物中心或?qū)嶒瀯游锸襕5]。

目前全國高校教學(xué)實驗用動物管理模式有：

（1）政府分級管理。由政府職能部門投入資金，相應(yīng)的科學(xué)技術(shù)委員會主管，規(guī)模較大、檔次較高，執(zhí)行實驗動物管理國際準則，力求實驗用動物標準化、飼養(yǎng)規(guī)范化、配置現(xiàn)代化、管理科學(xué)化。

（2）經(jīng)費下?lián)?。此種模式主要在農(nóng)業(yè)高校相關(guān)醫(yī)學(xué)專業(yè)，由校方把教學(xué)經(jīng)費按實驗學(xué)時下?lián)芨鱾€課程組，由各課程組自由安排教學(xué)實驗及實驗用動物的購買與使用。

（3）私人經(jīng)營承包。此種方式與經(jīng)費下?lián)苁接邢嗨浦?，除?jīng)費下?lián)芡猓７教峁﹦游镲曫B(yǎng)場所，由私人承包，按市場化規(guī)則進行教學(xué)實驗動物的交易與管理。

（4）責(zé)任合同式。為節(jié)省經(jīng)費開支，減少中間環(huán)節(jié)并保證教學(xué)實驗動物的使用，力求教學(xué)、科研的有機結(jié)合，與相關(guān)科室或科技人員建立教學(xué)實驗動物責(zé)任合同式管理模式，以期達到教學(xué)與動物實驗安全的目的。

1.3 動物實驗中存在的問題

教學(xué)動物實驗所涉及的實驗用動物品種多，數(shù)量多，大部分是從市場上購買或直接從野外捕捉，中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)實驗動物研究所所長秦川教授說：實驗用動物“來源和攜帶病原情況具有很多的不確定性……而目前我國尚缺少明確的法律法規(guī)對其可能帶來的生物安全的高風(fēng)險進行控制”。

目前國內(nèi)高校，尤其是農(nóng)業(yè)院校對教學(xué)實驗動物的管理很不到位，實驗用動物的管理往往歸屬于某學(xué)科或某個人。實驗用動物經(jīng)費的投入與物價上漲存在很大差距，實驗用動物經(jīng)費劃撥少且多年未變，大多高校采用經(jīng)費下?lián)芑蛩饺私?jīng)營承包的運行模式。為節(jié)省教學(xué)經(jīng)費，有些學(xué)校購買農(nóng)民所飼養(yǎng)的廉價動物，而這些動物不可能經(jīng)過合格的衛(wèi)生檢疫，就被搬到了手術(shù)臺上。另者，動物實驗的操作沒有正規(guī)的防護措施，大多是徒手進行，最終釀成生物安全的悲劇在所難免。

管理不到位、經(jīng)費限制以及防護措施缺失，是高校教學(xué)用動物及動物實驗中存在的三大突出問題。

2 動物實驗中的3個重要環(huán)節(jié)

2.1 高校實驗用動物的來源

目前，我國高校教學(xué)用實驗動物除少量是自繁、自養(yǎng)外，大多是從散養(yǎng)農(nóng)戶或小型飼養(yǎng)場購進，是未經(jīng)微生物學(xué)嚴格控制的帶菌動物。此類動物是在微生物控制上要求最低的實驗用動物，允許帶有細菌和寄生蟲，但不允許帶有人畜﹙獸﹚共患疾病的病原體及體外寄生蟲。由于教學(xué)實驗用動物通常來源于自然環(huán)境中，飼養(yǎng)粗放，設(shè)備簡陋并缺少嚴格的遺傳學(xué)控制和微生物檢測，且品種繁多，使用量大，存在著較大的品系、種群、個體之間的差異，故實驗的可比性、重復(fù)性、反應(yīng)的一致性較差是其顯著特點[6]。

因為高校實驗教學(xué)投入資金不足，對教學(xué)用實驗動物要求不高，動物質(zhì)量的差異性很大，且檢疫環(huán)節(jié)常被忽略，實驗當中又缺少正規(guī)的防護措施，潛在的生物安全隱患是動物實驗中特別要關(guān)注的。

2.2 實驗室的生物安全防護

生物安全（biosafety）是隨著生物技術(shù)發(fā)展而出現(xiàn)的概念，它涉及糧食安全、動植物生命與衛(wèi)生等多個領(lǐng)域，涉及林業(yè)和畜牧業(yè)所有生物和環(huán)境風(fēng)險，是國際社會所面臨的最緊迫的問題之一。

我們通常所說的實驗室生物安全是針對微生物實驗室而言的，實驗室生物安全的范圍限定在涉及各種生物因子實驗的實驗室內(nèi)，其安全防護貫穿于整個實驗過程。實驗室生物安全防護是一種綜合行為，其涵蓋了實驗室建筑設(shè)計、安全設(shè)備和防護裝置的硬件建設(shè)，也包括管理制度和人員素質(zhì)等軟件支撐[7]。動物實驗教學(xué)并不單指微生物學(xué)實驗，它涉及的學(xué)科很多；而動物實驗教學(xué)中的生物安全防護亦應(yīng)視為畜牧業(yè)生物安全體系內(nèi)容在教學(xué)場所實驗室的延續(xù)。教學(xué)實驗室應(yīng)該做到防止病毒、細菌、真菌、寄生蟲、昆蟲、有害的嚙齒動物和鳥類等生物感染，威脅正常教學(xué)，實驗操作者應(yīng)采取一系列的安全措施。

2.3 動物實驗中的個人防護

個人防護是指實驗室工作人員在處理含有致病微生物、病原或毒素的實驗對象時，使用防護性手套、防護服和防護面具等個人防護裝置，嚴格遵守標準化的工作及操作程序和規(guī)程，確保自身不受實驗對象的侵染，同時防止工作人員受到工作場中其他物理和化學(xué)有害因子的傷害而采取的防護措施[8]。然而有些高校教學(xué)實驗中的動物實驗?zāi)壳昂懿灰?guī)范，實驗的操作缺少最基本的防護措施，甚至動物未經(jīng)消毒麻醉，學(xué)生便開始實驗，大多未養(yǎng)成戴手套的習(xí)慣，師生安全意識淡薄已成為高校實驗教學(xué)安全的隱患。人們必須牢記生物安全無小事，個人防護要注意；警鐘時刻應(yīng)敲響，防患未然別大意。

3 動物實驗生物安全防護的管理方法

3.1 嚴把實驗用動物質(zhì)量關(guān)

大凡購進的實驗用動物應(yīng)盡可能由正規(guī)飼養(yǎng)場所提供，如教學(xué)用小白鼠應(yīng)從省實驗動物中心購買，其他動物目前大多從市場或散養(yǎng)農(nóng)戶購買。對于那些小規(guī)模散養(yǎng)農(nóng)戶來講，畜牧業(yè)多是家庭副業(yè)，也不具備進行動物疫病防治的能力，一旦購進疫病動物，就可能發(fā)生大面積傳播。

為此，我們按照“一看（看精神、看毛色、看糞便）、二摸（摸耳、摸膘、視體況測體溫）、三查（查心率、觀黏模、聽呼吸）、四隔（動物購進后隔離數(shù)日）、五防（預(yù)防接種）、六養(yǎng)（飼養(yǎng)一段時期）、七用（用于實驗教學(xué)環(huán)節(jié)）”的教學(xué)實驗動物管理程序，嚴把購進動物質(zhì)量關(guān)，確保實驗用動物健康、無病、無異常、無怪廦，以保證實驗教學(xué)安全、順利進行。

3.2 注重實驗室消毒與滅菌

高校教學(xué)實驗室所用設(shè)施、設(shè)備和材料均應(yīng)符合國家相關(guān)的標準和要求，應(yīng)有符合安全和工作要求的一級生物安全（BSL－1）水平。實驗室要有相應(yīng)的避免危險因子造成實驗室人員暴露、向?qū)嶒炇彝鈹U散并導(dǎo)致危害的綜合措施。我們依據(jù)教學(xué)內(nèi)容和動物特性，采用不同方式預(yù)防疫病，履行了嚴格的消毒制度，應(yīng)用消毒劑、紫外線等殺滅教學(xué)實驗動物攜帶的病原體，切斷各種疾病的傳播途徑。具體操作是：

（1）實驗室空氣消毒采用紫外線滅菌法，按1.5 W／m2懸掛紫外線燈，每次實驗前后照射30min；

（2）教學(xué)用實驗動物進入實驗室前在專用房間進行噴霧或照射消毒，噴霧劑用0.1%的新潔爾滅（溴芐烷銨）水溶液；

（3）實驗室環(huán)境消毒用稀釋20倍的碘伏水溶液按3～9mL／m2噴霧消毒；

（4）實驗室地面、桌椅用巴氏滅菌法定期消毒；

（5）實驗用動物尸體及廢棄物噴霧消毒后用塑料袋包裹深埋或焚燒。

多年來我校一直重視動物實驗教學(xué)的安全，為防事故發(fā)生及環(huán)境污染，把實驗室安全作為教學(xué)工作的大事來抓，除加強對師生進行安全意識教育外，還強化了安全制度的建設(shè)，對已有制度的落實情況進行監(jiān)督檢查，未發(fā)生動物實驗生物安全事故。

3.3 強調(diào)動物實驗的安全防護

動物實驗存在的生物安全危險來自于實驗用動物本身攜帶的人畜共患病感染、動物實驗實驗室獲得性疾病感染以及動物性氣溶膠。做好實驗室的安全操作和管理，要從病原微生物傳播的“三要素”抓起，即傳染源、傳播途徑和易感者。

實驗室是高等院校實驗教學(xué)和科學(xué)研究的重要場所，它的安全關(guān)系到師生的人身安全及國家財產(chǎn)安全[9]。事實證明，實驗室的各種安全問題大多與師生的安全意識淡薄有關(guān)。對此，我們的具體做法是采用“預(yù)先告知防護、強化自身防護、配備醫(yī)療箱防護”及建立“課堂準入制、用物登記制、安全評比制、建檔管理制”的“三防四制”防護措施，收到了很好的效果。

（1）預(yù)先告知防護。實驗過程中有時會出現(xiàn)難以預(yù)料的情況，預(yù)先告誡學(xué)生，使之有充分的認識和心理準備。在實驗過程中，經(jīng)常提醒學(xué)生按照實驗步驟和規(guī)范操作，如實驗用動物的正確抓取、保定[10]；實驗用動物受到刺激后釋放毒素（蟾酥等）的處理方法；大動物急、慢性實驗（動物解剖、病料采集等）如何避免微生物氣溶膠吸入的侵害等，以避免學(xué)生在實驗中不清楚動物生物安全常識而發(fā)生安全事故。

（2）強化自身防護。強化自身防護是指個人防護裝備的配置與使用、嚴格遵從標準化的工作操作程序和管理規(guī)程等。通過強化自身防護綜合措施以達到保護實驗室工作人員不受實驗對象的傷害、保護樣品不交叉?zhèn)魅炯爸車h(huán)境不污染的目的。實驗項目管理規(guī)程及實驗的步驟、方法都有具體要求，在此不贅述。動物實驗教學(xué)中個人防護涉及的部位包括眼睛、面部、手足、呼吸道及軀體。多年來我們一直注重強化自身防護，增加教學(xué)實驗經(jīng)費用來購置個人防護裝備，先后配備了眼鏡、口罩、一次性防護手套、防護服（不同實驗不同服裝）、鞋套、防護面具等，針對不同實驗內(nèi)容或按照個人防護分級選擇適宜、科學(xué)的個人防護措施。

（3）配備醫(yī)療箱防護。大學(xué)生具有活躍性、群體性、敢為性等特質(zhì)，易造成安全事件的發(fā)生[11]。多年來，我們在實驗室配備了裝有血壓計、聽診器、碘伏、雙氧水、沖洗液、創(chuàng)可貼、止痛膏、防護手套、輔料帶及抗過敏性藥物的醫(yī)療箱[12]，以應(yīng)對可能出現(xiàn)的動物病原體危害及被玻璃器皿劃傷、動物抓傷、電器灼傷、過敏性瘙癢或血暈患者的應(yīng)急安全處理。實驗室還擺放了鮮花綠草，營造出美好的環(huán)境，更體現(xiàn)出人性化管理的層面，很受學(xué)生的歡迎。

（4）實驗課“四制”防護。著力推行動物實驗課安全管理的“四制防護”，即“課堂準入制、用物登記制、安全評比制、建檔管理制”，并貫穿于整個實驗課的教學(xué)環(huán)節(jié)之中，確保實驗課不發(fā)生任何安全責(zé)任事故，使實驗課真正成為培養(yǎng)學(xué)生的科學(xué)化、規(guī)范化[13]的課堂。①課堂準入制。要求進入實驗室的學(xué)生必須接受實驗安全教育，掌握相關(guān)實驗安全知識，了解實驗的基本情況并熟悉實驗儀器的操作規(guī)程，自身達到一級安全防護方可進入實驗課堂。②用物登記制。切實做到實驗前用物登記（實驗用動物基本情況登記、手術(shù)器械登記和儀器使用登記），用后妥善處理，回收歸位，前后對應(yīng)，填寫實驗日記。③安全評比制。每次實驗課要進行組間安全評比，整個實驗教學(xué)結(jié)束后進行班組安全評比。④建檔管理制。建檔存留上報學(xué)院，作為評比先進班集體的條件之一來完善實驗課的“防護安全”管理。

4 結(jié)束語

教學(xué)實驗動物生物安全防護是舉措，動物本身的安全才是根本。動物實驗的生物安全必須從源頭抓起。建議由教育行政職能部門投資建立教學(xué)實驗用動物配送中心，并納入當?shù)馗咝：笄诠芾砉ぷ骼硎聲捏w制運作，向高校提供規(guī)范、安全、上等級的教學(xué)實驗用動物。只有在教學(xué)動物實驗中確保了實驗用動物的安全，才能防止教學(xué)事故的發(fā)生，才能使動物實驗教學(xué)順利進行，才能構(gòu)筑校園安全、和諧的學(xué)習(xí)氛圍。

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