苑利，張敏愛，張麗娜，張建軍*

（1.山西出入境檢驗(yàn)檢疫局技術(shù)中心，山西太原030024；2.吉林出入境檢驗(yàn)檢疫局技術(shù)中心，吉林長春130062）

透明質(zhì)酸鈉在白酒中的穩(wěn)定性探討

苑利1，張敏愛1，張麗娜2，張建軍1*

（1.山西出入境檢驗(yàn)檢疫局技術(shù)中心，山西太原030024；2.吉林出入境檢驗(yàn)檢疫局技術(shù)中心，吉林長春130062）

通過對(duì)白酒中透明質(zhì)酸鈉含量的穩(wěn)定性試驗(yàn)，為白酒中添加透明質(zhì)酸鈉的生產(chǎn)應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。根據(jù)衛(wèi)生部《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》（2003年版）的穩(wěn)定性試驗(yàn)規(guī)范要求，將試驗(yàn)酒樣置于37～40℃和相對(duì)濕度75%的條件下，以透明質(zhì)酸鈉的含量為指標(biāo)，對(duì)定量添加透明質(zhì)酸鈉的試驗(yàn)酒樣進(jìn)行連續(xù)跟蹤檢測(cè)，監(jiān)測(cè)酒樣中透明質(zhì)酸鈉的穩(wěn)定程度。結(jié)果表明，試驗(yàn)酒樣中透明質(zhì)酸鈉的終點(diǎn)值和初始值相比，其平均衰減值為7.73%≤10%，滿足《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》的要求。

白酒；透明質(zhì)酸鈉；穩(wěn)定性；分光光度法

透明質(zhì)酸鈉是近年來迅速發(fā)展起來的新型保健食品添加劑，是由葡糖醛酸-N-乙酰氨基葡糖為雙糖單位重復(fù)連接而成的直鏈高分子黏多糖，是一種優(yōu)良的天然保濕劑，廣泛應(yīng)用于化妝品、食品、藥品和臨床醫(yī)學(xué)[1-8]。目前，對(duì)于透明質(zhì)酸鈉的各方面研究也已展開[9-21]。2008年，衛(wèi)生部將透明質(zhì)酸鈉正式定為國家第一批新資源食品添加劑（見中華人民共和國衛(wèi)生部公告[2008年第12號(hào)][22]），允許在各類保健食品中添加透明質(zhì)酸鈉。各大知名品牌白酒也在低度花香酒中加入透明質(zhì)酸鈉，期望打造女士適飲的保濕美容類白酒。目前，已有含透明質(zhì)酸鈉的白酒在市面上出售，但這類功效因子能否在白酒中穩(wěn)定存在，尚未見相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道。

本研究通過對(duì)白酒中透明質(zhì)酸鈉含量的穩(wěn)定性試驗(yàn)，確定在白酒中添加透明質(zhì)酸鈉是否可以達(dá)到預(yù)期的保健效果，為酒類生產(chǎn)提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

試驗(yàn)酒樣（玫瑰酒）：山西杏花村汾酒集團(tuán)；硫酸（分析純，體積分?jǐn)?shù)95%～98%），咔唑（指示劑）：棕色瓶放置；四硼酸鈉（分析純）；無水乙醇（分析純）：天津科密歐化學(xué)試劑有限公司；D-葡萄糖醛酸標(biāo)準(zhǔn)品（試劑級(jí)）：山東福瑞達(dá)生物醫(yī)藥有限公司。

硫酸硼砂溶液：稱取4.77 g四硼酸鈉，溶于500 mL濃硫酸（體積分?jǐn)?shù)95%～98%）中，溶解完全搖勻備用，保存于密閉玻璃瓶中備用。

酒精咔唑溶液：稱取0.125 g咔唑，溶于100 mL無水乙醇中，搖勻，置于棕色磨口瓶中，4～8℃條件下保存期為兩個(gè)月。

標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖醛酸溶液（200 mg/L）：準(zhǔn)確稱取葡萄糖醛酸20.0 mg，置于100 mL容量瓶中，加去離子水定容，搖勻備用。

1.2 儀器與設(shè)備

IKA Lab Dancer渦旋混合器：德國IKA公司；7230G可見分光光度計(jì)：上海光譜儀器有限公司；MLR-350H恒溫恒濕培養(yǎng)箱：日本SANYO公司；XS204分析天平（感量0.1mg）：

瑞士METTLER公司；KQ-300E型超聲波清洗器：昆山市超

聲儀器有限公司。

1.3 方法

1.3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

準(zhǔn)確移取葡萄糖醛酸標(biāo)準(zhǔn)溶液0、0.5mL、1.0mL、1.5mL、2.0 mL、2.5 mL葡萄糖醛酸溶液分別置于10 mL容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻備用。得到0、10 μg/mL、20 μg/mL、30 μg/mL、40 μg/mL和50 μg/mL質(zhì)量濃度的葡萄糖醛酸標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

準(zhǔn)確移取上述葡萄糖醛酸標(biāo)準(zhǔn)品溶液1.0 mL置于容量瓶中，分別加入5.0 mL硫酸硼砂溶液，置于冰水浴中冷卻至4℃左右，輕輕搖振，用渦旋混合器混合均勻，然后置沸水浴中加熱10 min，取出后冷卻至室溫。分別向各容量瓶中依次加入0.2 mL酒精咔唑溶液，再次用渦旋混合器充分混合均勻，置沸水浴中加熱15 min，取出冷卻至室溫，定容至刻度，搖勻。用7230分光光度計(jì)于波長530 nm處測(cè)定其吸光度值A(chǔ)。以濃度C為縱坐標(biāo)，吸光度值A(chǔ)為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線或求出線性方程。

1.3.2 白酒中的透明質(zhì)酸鈉含量的測(cè)定

將樣品酒置于（20±0.1）℃的水浴中保溫30 min以上，準(zhǔn)確移取1.0 mL保溫后的酒樣于10 mL容量瓶中，再準(zhǔn)確加入2.0 mL去離子水，輕輕振搖，用渦旋混合器混合均勻。準(zhǔn)確移取1.0mL該酒樣于另一個(gè)10mL容量瓶中，查找標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)應(yīng)葡萄糖醛酸質(zhì)量濃度或按線性方程計(jì)算結(jié)果。

1.3.3 穩(wěn)定性試驗(yàn)方法

試驗(yàn)酒樣加入了功能因子—透明質(zhì)酸鈉。酒體為帶有玫瑰香味并含有透明質(zhì)酸鈉的無色配制酒，玫瑰香味為風(fēng)味物質(zhì)，透明質(zhì)酸鈉為功能因子。

將試驗(yàn)酒樣置于溫度37～40℃和相對(duì)濕度75%的條件下保存，對(duì)3組試驗(yàn)酒樣中的透明質(zhì)酸鈉含量指標(biāo)進(jìn)行連續(xù)3個(gè)月的跟蹤檢測(cè)，檢測(cè)方法依照1.3.2進(jìn)行，每組酒樣平行檢測(cè)3次。首次檢測(cè)值是樣酒中透明質(zhì)酸鈉的初始含量，以后每隔一個(gè)周期檢測(cè)一次，連續(xù)檢測(cè)3個(gè)周期，共檢測(cè)4次。

1.4 透明質(zhì)酸鈉含量計(jì)算公式

X=3×2.067×A

式中：X為透明質(zhì)酸鈉的含量，mg/L；A為標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出的葡萄糖醛酸質(zhì)量濃度，mg/L；2.067為換算系數(shù)；3為稀釋倍數(shù)。

2 結(jié)果與分析

2.1 試驗(yàn)結(jié)果

2.1.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線

標(biāo)準(zhǔn)工作曲線的原始數(shù)據(jù)及所得方程見表1。

2.1.2 穩(wěn)定性檢測(cè)結(jié)果

試驗(yàn)酒樣中的透明質(zhì)酸鈉初始平均值為131.97 mg/L，終點(diǎn)平均值為121.78 mg/L；試驗(yàn)酒樣在溫度37～40℃和相對(duì)濕度75%的條件下，連續(xù)保存3個(gè)月，酒中透明質(zhì)酸鈉的終點(diǎn)值和初始值相比，其平均衰減值為7.73%，結(jié)果見表2。

表1 葡萄糖醛酸標(biāo)準(zhǔn)曲線的原始數(shù)據(jù)Table 1 Original data of the standard curve of glucuronic acid

表2 樣品酒透明質(zhì)酸鈉檢測(cè)結(jié)果Table 2 Testing results of sodium hyaluronate in liquor samples

2.2 結(jié)果分析

結(jié)果表明，試驗(yàn)酒樣的透明質(zhì)酸鈉的初始含量平均值131.97mg/L≥120mg/L，最終含量（90d）平均值121.78mg/L≥100 mg/L，符合企業(yè)產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的要求；試驗(yàn)酒樣中透明質(zhì)酸鈉的衰減值分別為7.06%、8.16%、7.96%，平均衰減值為7.73%≤10%，符合《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》（2003年版）中對(duì)產(chǎn)品穩(wěn)定性試驗(yàn)規(guī)范的要求。因此，酒樣中所添加的透明質(zhì)酸鈉可以起到其保濕、潤滑的保健功效。3結(jié)論

本試驗(yàn)根據(jù)衛(wèi)生部《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》（2003年版）的穩(wěn)定性試驗(yàn)規(guī)范要求，將試驗(yàn)酒樣置于一定溫度和相對(duì)濕度的條件下，以透明質(zhì)酸鈉的含量為檢測(cè)指標(biāo)，對(duì)3組定量添加透明質(zhì)酸鈉的試驗(yàn)酒樣進(jìn)行連續(xù)跟蹤測(cè)試。檢測(cè)方法采用硫酸酸解透明質(zhì)酸鈉，解離出的等量葡萄糖醛酸和咔唑生成紫紅色有機(jī)配合物，在分光光度計(jì)波長530 nm處有吸收，與透明質(zhì)酸鈉含量成正比關(guān)系，以此確定透明質(zhì)酸鈉的含量[23-25]。

綜上所述，按《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》（2003年版）的測(cè)試要求，透明質(zhì)酸鈉能在試樣酒中較穩(wěn)定存在。

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Stability of sodium hyaluronate in Chinese liquor

YUAN Li1,ZHANG Min'ai1,ZHANG Li'na2,ZHANG Jianjun1*

(1.Shanxi Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau,Taiyuan 030024,China; 2.Jilin Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau,Changchun 130062,China)

The stability of sodium hyaluronate in Chinese liquor was studied by stable experiment at different conditions,which could provide scientific basis in the production.All manipulations of the stability experiments were carried out according to the Standards of Inspecting and Evaluating Health-Care Food(2003 version)issued by Ministry of Health.The liquor samples were placed at 37-40℃with relative humidity of 75%.Using sodium hyaluronate content as indexes,the liquor with quantitative addition of sodium hyaluronate were continuously tracked to investigate the stability of sodium hyaluronate by measuring the corresponding remained quantity.By comparing the endpoint and initial values of sodium hyaluronate content in liquor,it showed that the average attenuation values was 7.73%,less than 10%,conforming to the standards of Inspecting and Evaluating Health-Care Food.

Chinese liquor;sodium hyaluronate;stability;spectrophotometry

TS202.3

A

0254-5071（2014）07-0141-03

10.11882/j.issn.0254-5071.2014.07.032

2014-05-20

苑利（1972-），女，高級(jí)工程師，本科，研究方向?yàn)闄z驗(yàn)檢疫檢測(cè)。

*通訊作者：張建軍（1978-），男，工程師，本科，研究方向?yàn)槲⑸餀z測(cè)。