国产日韩欧美一区二区三区三州_亚洲少妇熟女av_久久久久亚洲av国产精品_波多野结衣网站一区二区_亚洲欧美色片在线91_国产亚洲精品精品国产优播av_日本一区二区三区波多野结衣 _久久国产av不卡

?

我國(guó)HIV/TB雙重感染者血清細(xì)胞因子水平的研究

2014-05-25 01:44傅雅靜張子寧劉飛鷹成詩(shī)明周林賴鈺基唐甜徐俊杰韓曉旭姜擁軍尚紅
關(guān)鍵詞:感者感染者細(xì)胞因子

傅雅靜,張子寧,劉飛鷹,成詩(shī)明,周林,賴鈺基,唐甜,徐俊杰,韓曉旭,姜擁軍,尚紅

(1.中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院檢驗(yàn)科,衛(wèi)生部艾滋病免疫學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,沈陽(yáng) 110001;2.廣西壯族自治區(qū)疾病預(yù)防控制中心,南寧530000;3.中國(guó)疾病預(yù)防控制中心結(jié)核病預(yù)防控制中心,北京 100000)

結(jié)核分枝桿菌(mycobacterium tuberculosis,MTB)感染是人類免疫缺陷病毒(human immunodefi?ciency virus,HIV)感染者最為常見(jiàn)的機(jī)會(huì)性感染,兩者共感染可加速各自的疾病進(jìn)程。根據(jù)最新的Me?ta分析結(jié)果顯示,我國(guó)HIV感染者的單純結(jié)核(tu?berculosis,TB)感染率為7.2%,而進(jìn)入艾滋病期患者的TB感染率高達(dá)22.8%[1]。可見(jiàn),HIV/TB雙重感染(簡(jiǎn)稱雙感)是艾滋病及結(jié)核防治工作的重大問(wèn)題之一。

細(xì)胞因子是介導(dǎo)免疫及炎性反應(yīng)的信號(hào)蛋白,具有調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答、誘導(dǎo)炎性反應(yīng)、影響造血功能、組織細(xì)胞增殖及神經(jīng)—內(nèi)分泌樣效應(yīng)等多種生物學(xué)功能。HIV及TB的感染及發(fā)病均涉及復(fù)雜的細(xì)胞因子變化。研究認(rèn)為,細(xì)胞因子失平衡是TB促進(jìn)HIV病毒復(fù)制和疾病進(jìn)展的機(jī)制之一[2],但目前對(duì)我國(guó)HIV/TB雙感人群細(xì)胞因子的表達(dá)情況還未見(jiàn)報(bào)道。本研究以HIV及TB流行較嚴(yán)重的廣西地區(qū)為代表,對(duì)單純TB患者、HIV感染者、HIV/TB雙感者及健康對(duì)照人群血清細(xì)胞因子水平進(jìn)行研究及比較,探討了我國(guó)HIV/TB雙感者細(xì)胞因子變化趨勢(shì)及特征,為雙感者的治療從細(xì)胞因子角度提供可靠依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

研究對(duì)象:2010年4月至2010年9月間在廣西招募HIV感染者465例,TB患者600例。在HIV感染者中以胸片、痰培養(yǎng)、臨床診斷等方法檢出TB患者。在TB患者中,以第3代ELISA方法篩查并進(jìn)行抗體確認(rèn)實(shí)驗(yàn)檢出HIV感染者。如感染者符合中國(guó)疾病預(yù)防與控制中心于2002年頒布的《艾滋病診斷與治療指導(dǎo)方案》開(kāi)始治療標(biāo)準(zhǔn),則在征得本人同意后,開(kāi)展標(biāo)準(zhǔn)化HAART治療。依據(jù)上述程序,納入未接受HAART治療且愿意參加本研究的HIV/TB雙感者15例,接受HAART治療雙感者5例;單純HIV感染者13例,接受治療單純HIV感染者4例;單純TB患者10例及健康對(duì)照17例(表1)。截止采樣時(shí)間點(diǎn),所有接受HAART治療感染者治療持續(xù)時(shí)間均在1年以內(nèi)。收集HIV/TB雙感、單純HIV感染及單純TB患者人口學(xué)信息、HIV及TB感染的流行病學(xué)信息、結(jié)核痰涂片鏡檢結(jié)果等臨床檢測(cè)信息。采集EDTA抗凝全血、血清及血漿標(biāo)本。本研究?jī)?nèi)容獲得參加者的書(shū)面知情同意。

表1 研究對(duì)象的基本信息Tab.1 The characteristics of study subjects

1.2 方法

1.2.1 8種細(xì)胞因子的檢測(cè):取25μL血清標(biāo)本,選用Bio Plex懸浮芯片檢測(cè)儀器及試劑(BIO RAD公司,美國(guó))統(tǒng)一測(cè)定IL?2、IL?4、IL?6、IL?8、IL?10、IFN?γ、TNF?α、GM?CSF等8種血清細(xì)胞因子水平并設(shè)平行孔。全部操作按照操作說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.2.2 CD4+T細(xì)胞絕對(duì)值檢測(cè):CD4+T細(xì)胞絕對(duì)值依據(jù)1997年美國(guó)CDC關(guān)于HIV感染者CD4+T細(xì)胞檢測(cè)指導(dǎo)方法,應(yīng)用TruCOUNT管、FACSCalibur流式細(xì)胞儀及MULTISET軟件(BD公司,美國(guó))檢測(cè)。

1.2.3 HIV病毒載量檢測(cè):取1 mLEDTA抗凝血漿,采用COBAS@AmpliPrep@/COBAS@TaqMan@System自動(dòng)載量?jī)x及COBAS@AmpliPrep/COBAS@Taq?Man@HIV?1Test試劑盒(Roche公司,德國(guó))測(cè)定病毒載量,全部操作按照操作說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。檢測(cè)范圍為40 拷貝/mL~1×107拷貝/mL。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSSl7.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。細(xì)胞因子數(shù)據(jù)用x±s表示,采用Mann?Whitney U檢驗(yàn)分析比較各組間的實(shí)驗(yàn)指標(biāo),采用Spearman秩相關(guān)做相關(guān)性分析。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 單純HIV感染者與健康對(duì)照血清細(xì)胞因子水平的比較

在13例單純HIV感染者及17例健康對(duì)照者8種血清細(xì)胞因子的比較中,發(fā)現(xiàn)HIV感染者血清IL?8為(117.36±27.60)pg/mL,健康對(duì)照為(892.63±291.93)pg/mL(表2),2組人群比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)(圖1A)。其他7種血清細(xì)胞因子比較差異未見(jiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.2 單純TB患者及HIV/TB雙感者與健康對(duì)照血清細(xì)胞因子水平的比較

在10例單純TB患者、15例HIV/TB雙感者與17例健康對(duì)照者8種血清細(xì)胞因子的比較中,發(fā)現(xiàn)TB患者血清IL?10及TNF?α水平分別為(0.50±0.29)pg/mL及(117.68±56.47)pg/mL,HIV/TB雙感者分別為(1.85±0.84)pg/mL及(157.23±84.01)pg/mL,健康對(duì)照2種細(xì)胞因子分別為0及(35.89±26.94)pg/mL(表2),TB患者及HIV/TB雙感者較健康對(duì)照IL?10及TNF?α 2種細(xì)胞因子均顯著升高(TB:P=0.02,P=0.01;HIV/TB:P=0.02,P<0.00;圖1B、1C)。其他6種血清細(xì)胞因子水平未見(jiàn)明顯差異。

2.3 HIV/TB雙感者TB痰涂片鏡檢結(jié)果與血清細(xì)胞因子水平的關(guān)系

經(jīng)TB痰涂片鏡檢,15例HIV/TB雙感者中8例為T(mén)B痰涂片鏡檢陽(yáng)性,7例為陰性,根據(jù)鏡檢結(jié)果將雙感者分為痰涂陽(yáng)和痰涂陰2組,比較2組間血清細(xì)胞因子水平。結(jié)果顯示,HIV/TB雙感者GM?CSF水平顯著升高(P=0.04),IL?10、TNF?α及其他5種細(xì)胞因子未見(jiàn)明顯組間差異。

表2 單純HIV感染者、TB患者、HIV/TB雙感者及健康對(duì)照血清8種細(xì)胞因子水平(pg/mL)Tab.2 The eight serum cytokine levels in HIV,TB and HIV/TB co?infection patients(pg/mL)

圖1 單純HIV感染者、TB患者及HIV/TB雙感者與健康對(duì)照細(xì)胞因子水平的比較Fig.1 Comparisons of cytokine levels among HIV,TB,HIV/TB patients and healthy controls

2.4 單純HIV感染者與HIV/TB雙感者HIV病毒載量及血清細(xì)胞因子水平的比較

比較13例單純HIV感染者與15例HIV/TB雙感者HIV病毒載量及血清細(xì)胞因子水平,發(fā)現(xiàn)雙感者HIV病毒載量顯著高于單純HIV感染者(P=0.02)(圖2A),血清IL?6、IL?8、IFN?γ、TNF?α等4種前炎性因子在HIV/TB雙感者組中顯著升高(P=0.02,P=0.01,P=0.02,P<0.00,圖2B~2E)。

圖2 單純HIV感染者與HIV/TB雙感者HIV病毒載量及血清細(xì)胞因子水平的比較Fig.2 Comparisons of cytokine levels and HIV viral load between HIV and HIV/TB co?infection patients

2.5 HAART治療對(duì)單純HIV感染者及HIV/TB雙感者血清細(xì)胞因子水平的改善

在單純HIV感染者及HIV/TB雙感者2組中,將研究對(duì)象按照是否接受HAART治療分別分為2組,組間進(jìn)行8種血清細(xì)胞因子檢測(cè)結(jié)果的比較。結(jié)果發(fā)現(xiàn),相較未治療者,接受治療的HIV/TB雙感者血清TNF?α水平出現(xiàn)下降趨勢(shì),但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(表3)。

表3 HAART治療對(duì)單純HIV感染者及HIV/TB雙感者血清細(xì)胞因子水平的改善(pg/mL)Tab.3 The influence of HAART on the cytokine levels in HIV and HIV/TB co?infection patients(pg/mL)

3 討論

MTB與HIV能夠相互促進(jìn)疾病進(jìn)展,造成雙感者高感染率及死亡率[3,4]。細(xì)胞因子在HIV/TB雙感者疾病進(jìn)展過(guò)程中發(fā)揮重要作用,但目前對(duì)雙感者細(xì)胞因子的分泌表達(dá)模式尚存在爭(zhēng)議。研究顯示,美國(guó)HIV/TB雙感者外周血單個(gè)核細(xì)胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)主要以Th1類細(xì)胞因子分泌為主,同時(shí)伴有Th2類細(xì)胞因子的下降。另有對(duì)歐美人群的研究發(fā)現(xiàn)HIV/TB雙感者全血及肺泡灌洗液以IL?4等Th2細(xì)胞因子為主[5]。Wallis等[6]對(duì)烏干達(dá)HIV/TB雙感者的研究中發(fā)現(xiàn)HIV/TB雙感者較單純HIV感染者TNF?α增高3~10倍。但Sauk?konen等[7]的體外研究卻顯示,HIV感染者的細(xì)胞感染TB后TNF?α分泌量明顯下降。提示研究對(duì)象及樣本來(lái)源都會(huì)對(duì)細(xì)胞因子的研究結(jié)果產(chǎn)生影響。

本研究對(duì)我國(guó)廣西地區(qū)HIV/TB雙感、單純感染及健康對(duì)照者血清細(xì)胞因子進(jìn)行直接檢測(cè)及比較,結(jié)果發(fā)現(xiàn)單純HIV感染者前炎性因子IL?8水平低于健康對(duì)照,與國(guó)外研究結(jié)果類似[10,11]。單純TB及HIV/TB雙感者與健康對(duì)照比較,單純TB感染者IL?10及TNF?α水平明顯升高,HIV/TB雙感者上升更加顯著,提示TB使機(jī)體傾向于這2種細(xì)胞因子的分泌及表達(dá)失平衡。TNF?α是加速結(jié)核性肉芽腫形成的主要細(xì)胞因子,而且作為前炎性因子,能導(dǎo)致T細(xì)胞活化水平的升高及組織細(xì)胞損傷、壞死;IL?10作為抑制性細(xì)胞因子,可以抑制Th1類免疫反應(yīng),促進(jìn)TNF?α作用及纖維化[2,12]。 North等[8]發(fā)現(xiàn)不產(chǎn)生IL?10的小鼠可以抵抗MTB的感染,因此HIV/TB雙感者高水平的IL?10及TNF?α可能加速了HIV及TB疾病進(jìn)展及惡化,是雙感者疾病進(jìn)展快、死亡率高的機(jī)制之一。本研究組進(jìn)一步研究了雙感者體內(nèi)MTB活躍程度對(duì)細(xì)胞因子水平的影響。按照TB痰涂片鏡檢結(jié)果,將HIV/TB雙感人群分為痰涂片鏡檢陽(yáng)性及陰性2組,僅發(fā)現(xiàn)痰涂片鏡檢陽(yáng)性者炎性因子GM?CSF高于陰性者,其他細(xì)胞因子均未見(jiàn)顯著差異,提示TB的活躍程度與HIV/TB雙感者血清IL?10及TNF?α的升高無(wú)明顯的相關(guān)性。Amirayan?Chevillard等[9]亦報(bào)道單純HIV感染即可導(dǎo)致IL?10及TNF?α水平的升高,提示雙感者體內(nèi)IL?10及TNF?α2種細(xì)胞因子的顯著升高不僅是MTB活躍程度的表現(xiàn),也可能是MTB和HIV之間復(fù)雜的相互的結(jié)果。

Alberti等[10]的研究證實(shí)CD4+T細(xì)胞數(shù)量本身即可造成細(xì)胞因子分泌及表達(dá)水平的差異。以往針對(duì)HIV/TB雙感者細(xì)胞因子的研究?jī)H注重細(xì)胞因子本身的變化,忽略了CD4+T細(xì)胞數(shù)量對(duì)機(jī)體細(xì)胞因子平衡的影響。因此,本研究在研究對(duì)象的選擇上,將HIV/TB雙感與單純HIV感染者CD4+T細(xì)胞數(shù)量進(jìn)行匹配,以消除細(xì)胞數(shù)量本身對(duì)于研究結(jié)果的影響。與Bal等[11]的研究結(jié)果相似,在單純HIV感染及HIV/TB雙感2組的比較中,發(fā)現(xiàn)IL?6、IL?8、IFN?γ、TNF?α等前炎性因子在雙感者體內(nèi)顯著升高。在2組間CD4+T細(xì)胞數(shù)量沒(méi)有明顯差異的情況下,HIV/TB雙感者HIV病毒載量顯著高于單純HIV感染者組,提示MTB與HIV共同作用產(chǎn)生了大量前炎性因子,這些異常增高的前炎性因子在促進(jìn)細(xì)胞活化及炎癥等免疫反應(yīng)的同時(shí),加速了HIV病毒復(fù)制,導(dǎo)致疾病進(jìn)展。

有效的HAART治療可以將HIV病毒控制在檢測(cè)限以下,降低HIV相關(guān)機(jī)會(huì)性感染的發(fā)病率和死亡率,患者CD4+T細(xì)胞數(shù)量上升,但在一定程度上無(wú)法恢復(fù)病毒造成的T細(xì)胞功能損傷。細(xì)胞因子失平衡造成免疫反應(yīng)異常,是T細(xì)胞功能損傷的機(jī)制之一[12]。Aiuti等[13]亦認(rèn)為HAART治療后細(xì)胞因子平衡的恢復(fù)是免疫重建的標(biāo)志。目前就HAART治療對(duì)細(xì)胞因子表達(dá)譜的恢復(fù)情況尚存在爭(zhēng)議,Amirayan?Chevillard等[9]報(bào)道HAART治療能夠恢復(fù)HIV感染者TNF、IL?1、IL?6及IL?10等細(xì)胞因子水平,有研究則顯示HAART治療并沒(méi)有使感染者TNF?α水平得到恢復(fù)。HAART治療是否可以改善HIV/TB雙感者體內(nèi)細(xì)胞因子的失平衡狀態(tài)尚未見(jiàn)報(bào)道。本研究在HIV及HIV/TB兩人群中按照是否接受HAART治療分別分為2組,發(fā)現(xiàn)接受治療的HIV/TB雙感者與未治療者相比,血清TNF?α水平出現(xiàn)下降趨勢(shì),但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,可能與本研究中感染者治療時(shí)間短有關(guān)。提示對(duì)于HIV/TB雙感者施以有效的HAART治療可能有助于感染者體內(nèi)部分細(xì)胞因子水平的恢復(fù),但需要長(zhǎng)期有效治療。

綜上所述,本研究對(duì)我國(guó)廣西地區(qū)細(xì)胞因子在單純TB、HIV及HIV/TB雙感者血清細(xì)胞因子水平進(jìn)行了比較系統(tǒng)的研究及分析,發(fā)現(xiàn)細(xì)胞因子的失衡在HIV及HIV/TB雙重感染疾病進(jìn)展中均發(fā)揮了重要作用,為探討HIV感染中機(jī)會(huì)性感染的發(fā)生機(jī)制等提供了有效信息。

[1]Gao L,Zhou F,Li XW,et al.HIV/TB co?infection in mainland Chi?na:smeta?analysis[J].PLoSOne,2010,5(5):e10379.

[2]JiaoYM,Zhang T,Wang R,et al.Plasma IP?10 is associated with rapid disease progression in early HIV?1 infection[J].Viral Immu?nol,2012,25(4):333-337.

[3]Cavanaugh J,Genga K,Marigu I,et al.Tuberculosis among children in Kenya:epidemiology and impact of HIV in two provinces[J].J Trop Pediatr,2012,58(4):292-296.

[4]Getahun H,Gunneberg C,Granich R,et al.HIV infection?associat?ed tuberculosis:the epidemiology and the response[J].Clin Infect Dis,2010,50(Suppl 3):S201-S207.

[5]Dheda K,Chang JS,Breen RA,et al.Expression of anovel cytokine,IL?4delta2,in HIV and HIV?tuberculosis co?infection[J].AIDS,2005,19(15):1601-1606.

[6]Wallis RS,Vjecha M,Amir?Tahmasseb M,et al.Influence of tuber?culosis on human immunodeficiency virus(HIV?1):enhanced cyto?kine expression and elevated β2?microglobulin in HIV?1?associated tuberculosis[J].JInfect Dis,1993,167(1):43-48.

[7]Saukkonen JJ,Bazydlo B,Thomas M,et al.β?chemokines are in?duced by mycobacterium tuberculosis and inhibit its growth[J].In?fect Immun,2002,70(4):1684-1693.

[8]North RJ.Miceincapable of making IL?4 or IL?10 display normal re?sistance to infection with Mycobacterium tuberculosis[J].Clin Exp Immunol,1998,113(1):55-58.

[9]Amirayan?Chevillard N,Tissot?dupont H,Capo C,et al.Impact of highly active anti?retroviral therapy(HAART)on cytokine produc?tion and monocyte subsets in HIV?infected patients[J].Clin Exp Immunol,2000,120(1):107-112.

[10]Alberti S,Cevenini E,Ostan R,et al.Age?dependent modifications of type 1 and type 2 cytokines within virgin and memory CD4+T cellsin humans[J].Mech Ageing Dev,2006,127(6):560-566.

[11]Bal AM,Lakhashe SK,Thakar MR,et al.Dysregulation of proin?flammatory and regulatory cytokines in HIV infected persons with activetuberculosis[J].Cytokine,2005,30(5):275-281.

[12]Clark S,Page E,F(xiàn)ord T,et al.Reduced T(H)1/T(H)17 CD4 T?cell numbers are associated with impaired purified protein deriva?tive?specific cytokine responses in patients with HIV?1 infection[J].JAllergy Clin Immunol,2011,128(4):838-846.

[13]Aiuti F,Mezzaroma I.Failure to reconstitute CD4+T?cells despite suppression of HIV replication under HAART[J].AIDS Rev,2006,8(2):88-97.

猜你喜歡
感者感染者細(xì)胞因子
受媒體報(bào)道和疫苗接種影響的傳染病模型分析
帶有自愿隔離博弈的SVIR傳染病模型研究
非線性SEIR流行病模型的平穩(wěn)分布
成人HPS臨床特征及多種細(xì)胞因子水平與預(yù)后的相關(guān)性
抗GD2抗體聯(lián)合細(xì)胞因子在高危NB治療中的研究進(jìn)展
艾滋病感染者就醫(yī)和就業(yè)歧視狀況調(diào)查
警惕新冠病毒無(wú)癥狀感染者
分析采取措施對(duì)性病傳播動(dòng)態(tài)的影響
細(xì)胞因子在慢性腎缺血與腎小管-間質(zhì)纖維化過(guò)程中的作用
艾滋病感染者管理新模式