葉亞琳，王玉亮，王澤劍，殷 明，辛海量，張 磊 (.解放軍2醫(yī)院藥劑科，廣東 廣州 00；2.上海交通大學(xué)農(nóng)業(yè)與生物學(xué)院，上海 20020；.上海交通大學(xué)藥學(xué)院，上海 20020；.第二軍醫(yī)大學(xué)中醫(yī)系，上海 200；.第二軍醫(yī)大學(xué)藥學(xué)院，上海 200)

青蒿作為傳統(tǒng)的清熱解毒中藥，有舒肝解郁、清熱利膽的功效，是蒿芩清膽湯(出自清代醫(yī)家俞根初的《重訂通俗傷寒論》)的主藥之一，有清膽利濕、和胃化痰的功效。中醫(yī)認(rèn)為高血脂其病變當(dāng)責(zé)之于肝、脾，發(fā)病的關(guān)鍵是肝郁脾虛。痰、濕、瘀既是病理產(chǎn)物，又是繼發(fā)性致病因素。治療宜調(diào)肝降脂，健脾化濕，消滯化瘀，因此青蒿理論上可用于降血脂。在對青蒿中活性成分青蒿素及其衍生物的藥理作用研究中發(fā)現(xiàn)，其對與動脈粥樣硬化相關(guān)的多種免疫反應(yīng)有作用[1-7]。青蒿琥酯是青蒿中活性成分青蒿素的衍生物之一，與青蒿素相比，不僅效價高、毒性小，而且溶解性好，更有利于臨床應(yīng)用[8]。

熊果酸又名烏索酸(烏蘇酸)，屬五環(huán)三萜類化合物。它在自然界分布很廣，如存在于杜鵑花科植物熊果的葉、果實中，玄參科植物毛泡桐的葉中，以及木樨科植物女貞的葉中。熊果酸具有廣泛的生物活性，其中降血脂效果在多項研究中已被證實[9-11]。

筆者前期的實驗研究表明，青蒿琥酯和熊果酸復(fù)方可有效降低模型動物血清中甘油三酯和膽固醇的水平[12]。本研究通過均勻設(shè)計，應(yīng)用大鼠高脂模型，比較不同比例的青蒿琥酯和熊果酸的降血脂效果，尋找其最佳配比，為進一步的新藥開發(fā)提供實驗依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 供試品及其配制 青蒿琥酯(廣州漢方藥業(yè)，批號000129)，熊果酸(西安小草植物科技有限責(zé)任公司，批號XC091225)，非諾貝特片(上海黃海制藥有限責(zé)任公司，批號：100104)。配制方法：吐溫助溶，溶于生理鹽水，配成所需的濃度。

1.2 動物 雄性SD大鼠，體重：160～180 g[上海斯萊克實驗動物有限公司，動物合格證號：SCXK(滬)2007-0005]。

1.3 儀器 生化分析儀(AT-738PLUS，上海安泰分析儀器有限公司)，電子天平(JA1003N，上海精密科學(xué)儀器有限公司)，離心機(eppendorf, centrifuge 5415R)。

2 實驗方法

2.1 劑量設(shè)置 本次實驗中青蒿琥酯和熊果酸的劑量設(shè)置為高劑量(50 mg/kg)、中劑量(25 mg/kg)、低劑量(12.5 mg/kg)，通過不同配比組合形成16個組，另增加正常動物和陽性對照組(非諾貝特30 mg/kg)。

表1 大鼠實驗劑量設(shè)計與分組

2.2 造模方法及分組 雄性SD大鼠108只，體重160～180 g，適應(yīng)性喂養(yǎng)5 d，將動物按體重分組后應(yīng)用隨機數(shù)字表隨機分為18組，每組6只。高脂飼料配比如下：豬油10%，膽固醇2%，丙基硫氧嘧啶0.2%，豬膽鹽0.5%，基礎(chǔ)飼料87.3%。

動物在喂養(yǎng)高脂飼料造模(正常組除外)的同時給予不同藥品，連續(xù)3周。實驗期間每4天稱一次體重；每2 d加一次高脂飼料(正常組加普通全營養(yǎng)飼料)，計算攝食量。實驗第21 d，大鼠以25%烏拉坦麻醉(0.4 ml/100 g體重)，從第1組開始，至第18組，每組1只，循環(huán)經(jīng)腹主動脈采血，離心分離血清，測定TG、CHO、HDL-C、LDL-C、AST及ALT。

表2 分組及給藥方案

2.3 統(tǒng)計學(xué)分析 以上所有指標(biāo)均以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，并以t檢驗進行比較。

3 實驗結(jié)果

3.1 青蒿琥酯及熊果酸對模型大鼠血清CHO與TG的影響 實驗結(jié)果見表3。

表3 受試樣品預(yù)防給藥對脂代謝紊亂模型大鼠血脂含量的影響(n=6，mmol/L)

結(jié)果顯示模型組大鼠在給高脂飼料21 d后血清CHO較正常組有明顯升高(P<0.01)。與模型組比較，各給藥組均可降低大鼠血清中膽固醇和三酰甘油的含量，其中青蒿琥酯(高劑量)+熊果酸(高劑量)，青蒿琥酯(中劑量)+熊果酸(中劑量)效果最佳，且優(yōu)于陽性對照藥非諾貝特。

3.2 青蒿琥酯及熊果酸對模型大鼠高低密度脂蛋白膽固醇含量和比值的影響 實驗結(jié)果見表4。模型組大鼠在給予高脂飼料21 d后HDL-C較正常組沒有明顯影響，而LDL-C較正常組則明顯升高，H/L比值明顯降低(P<0.01)。青蒿琥酯(高劑量)+熊果酸(高劑量)可以顯著升高HDL-C(P<0.01，與模型組比較)，對LDL-C也有降低作用(P<0.05，與模型組比較)，具有一定的升高H/L值的作用(P<0.05)，與模型組比較有顯著性差異。

表4 受試樣品預(yù)防給藥對脂代謝紊亂模型大鼠高低密度脂蛋白膽固醇含量和比值的影響(n=6, mmol/L)

3.3 青蒿琥酯及熊果酸對模型大鼠肝功能的影響 實驗結(jié)果見表5。各受試樣品對脂質(zhì)紊亂大鼠肝功能沒有顯著影響(P>0.05，與正常組比較)。陽性對照藥非諾貝特組AST較正常組有所升高，但沒有顯著性差異(P>0.05)，ALT較正常組比較也有所升高(0.05

4 結(jié)論

青蒿琥酯(高劑量)+熊果酸(高劑量)對TG、CHO、LDL-C水平均有顯著的降低作用，可明顯升高HDL-C，對H/L值也有一定的升高作用。綜合降脂效果優(yōu)于陽性藥非諾貝特，也優(yōu)于同等劑量的青蒿琥酯和熊果酸單用。本次試驗結(jié)果顯示青蒿琥酯和熊果酸合用，且配比為1:1時降脂效果最佳。

表5 受試樣品預(yù)防給藥對脂代謝紊亂模型大鼠肝功能的影響(n=6)

【參考文獻】

[1] Xu H, He Y, Yang X,etal. Anti-malarial agent artesunate inhibits TNF-alpha-induced production of proinflammatory cytokines via inhibition of NF-kappaB and PI3 kinase/Akt signal pathway in human rheumatoid arthritis fibroblast-like synoviocytes[J]. Rheumatology，2007，46 (6)：920-926.

[2] Wang JX, Tang W, Zhou R,etal.The new water-soluble artemisinin derivative SM905 ameliorates collagen-induced arthritis by suppression of inflammatory and Th17 responses[J]. Br J Pharmacol, 2008, 153(6)： 1303-1310.

[3] Li WD, Dong YJ, Tu YY,etal.Dihydroarteannuin ameliorates lupus symptom of BXSB mice by inhibiting production of TNF-alpha and blocking the signaling pathway NF-kappa B translocation[J]. Int Immunopharmacol，2006，6 (8)： 1243-1250.

[4] Li B, Zhang R, Li J,etal. Antimalarial artesunate protects sepsis model mice against heat-killedEscherichiacolichallenge by decreasing TLR4, TLR9 mRNA expressions and transcription factor NF-kappa B activation[J]. Int Immunopharmacol, 2008, 8(3): 379-389.

[5] Li T,Chen H,Wei N,etal. Anti-inflammatory and immunomodulatory mechanisms of artemisinin on contact hypersensitivity[J]. Int Immunopharmacol, 2012, 12(1):144-150.

[6] Hou LF, He SJ, Li X,etal. Oral administration of artemisinin analog SM934 ameliorates lupus syndromes in MRL/lpr mice by inhibiting Th1 and Th17 cell responses[J]. Arthritis Rheum, 2011, 63(8): 2445-2455.

[7] Cheng C, Ho WE, Goh FY,etal. Anti-malarial drug artesunate attenuates experimental allergic asthma via inhibition of the phosphoinositide 3-kinase/Akt pathway[J]. PLoS One, 2011, 6(6): e20932.

[8] Li Y, Wu YL. An over four millennium story behind qinghaosu (artemisinin)-a fantastic antimalarial drug from a traditional Chinese herb[J]. Curr Med Chem, 2003, 10 (21):2197-2223.

[9] Jayaprakasam B, Olson LK, Schutzki RE,etal. Amelioration of obesity and glucose intolerance in high-fat-fed C57BL/6 mice by anthocyanins and ursolic acid in Cornelian cherry (Cornus mas)[J]. J Agric Food Chem，2006，54(1)：243-248.

[10] Somova LO, Nadar A, Rammanan P,etal. Cardiovascular, antihyperlipidemic and antioxidant effects of oleanolic and ursolic acids in experimental hypertension[J]. Phytomedicine，2003，10(2-3), 115-121．

[11] Ullevig SL, Zhao Q, Zamora D,etal. Ursolic acid protects diabetic mice against monocyte dysfunction and accelerated atherosclerosis[J]. Atherosclerosis，2011，219 (2), 409-416.

[12] 唐克軒，王玉亮，辛海量.降血脂的中藥組合物及其制備方法[P]. 中國專利，CN101507727，2009-08-19.