任亞東，施猛，孫秋艷，劉志強(qiáng) （揚(yáng)子江藥業(yè)集團(tuán)廣州海瑞藥業(yè)有限公司，廣東 廣州 510663）

枸地氯雷他定 （Desloratadine Citrate Disodium）為長效三環(huán)類抗組胺藥，起效快，作用強(qiáng)，主要用于治療過敏性鼻炎，以及慢性特發(fā)性蕁麻疹等瘙癢性皮膚病。枸地氯雷他定為氯雷他定的主要活性代謝產(chǎn)物，起效更快，生物利用度更優(yōu)，具有強(qiáng)大的、選擇性的拮抗外周H受體作用和抗炎作用［1］。有實(shí)驗(yàn)表明，枸地氯雷他定比氯雷他定治療慢性蕁麻疹 （Chronic urticaria，CU）患者的療效更安全、有效，值得進(jìn)一步推廣使用［2］?，F(xiàn)擬建立枸地氯雷他定顆粒HPLC含量測定方法，為枸地氯雷他定顆粒的進(jìn)一步研究提供可靠的分析方法和理論依據(jù)。

1 試藥與儀器

1.1 試藥

地氯雷他定對照品，來源于中國食品藥品檢定研究院，枸地氯雷他定顆粒及空白輔料，由揚(yáng)子江藥業(yè)集團(tuán)廣州海瑞藥業(yè)有限公司提供；乙腈 （色譜純）、磷酸二氫鉀 （分析純）、磷酸 （分析純）、三乙胺（分析純）。

1.2 儀器

Agilent 1260型高效液相色譜儀，Agilent 1260VWD紫外吸收檢測器，XS 205電子天平。

2 含量測定方法

2.1 色譜條件

依照高效液相色譜法 （中國藥典2010年版二部附錄VD［3］），以十八烷基鍵合硅膠柱 （5μm，150mm×4.6mm）為色譜柱，以乙腈－0.01mol／L磷酸二氫鉀緩沖鹽溶液 （取磷酸二氫鉀1.37g，溶于900ml水中，加入三乙胺2.5ml，用磷酸調(diào)pH至2.5，用水定容至1000ml）（22∶78）為流動相；檢測波長為282nm，柱溫為35℃，流速為1.0ml／min，進(jìn)樣量為10μl。

2.2 樣品配制

供試品溶液：取本品內(nèi)容物10包，研細(xì)，取粉末適量 （約相當(dāng)于枸地氯雷他定2.2mg），精密稱定，置50ml量瓶中，加流動相適量使溶解，用流動相定容，搖勻，濾過，作為供試品溶液。

對照品溶液：取地氯雷他定對照品適量，精密稱定，加流動相溶解并稀釋成濃度為0.025mg／ml的溶液，作為對照品溶液。

2.3 含量測定

系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：照高效液相色譜法，精密量取供試品溶液與對照品溶液各10μl，注入色譜儀，記錄色譜圖；主峰按地氯雷他定計(jì)，塔板數(shù)不低于2500，主峰與相鄰雜質(zhì)峰的分離度應(yīng)符合要求。

樣品測定：精密量取供試品溶液與對照品溶液各10μl，注入色譜儀，記錄色譜圖；按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。

3 方法學(xué)研究

3.1 輔料干擾試驗(yàn)

按處方比例稱取空白輔料適量，按2.2項(xiàng)下供試品溶液配制，作為空白輔料溶劑；以流動相為空白溶劑；精密量取空白溶劑、空白輔料溶劑及2.2項(xiàng)下的供試品溶液各10μl，注入色譜儀，記錄圖譜。結(jié)果顯示，空白輔料溶液在供試品溶液的主峰位置無干擾峰，輔料對含量測定無干擾。

3.2 線性與范圍

取地氯雷他定對照品適量，按2.2項(xiàng)下對照品溶液配制方法配制成濃度分別為5、10、20、30、40μg／ml的地氯雷他定溶液，按含量測定方法測定峰面積，數(shù)據(jù)見表1。

表1 含量測定地氯雷他定線性試驗(yàn)結(jié)果

以進(jìn)樣濃度為橫坐標(biāo)，地氯雷他定峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果顯示，地氯雷他定在5.375～43.000μg／ml的濃度范圍內(nèi)與其峰響應(yīng)值呈線性關(guān)系，線性方程為Y＝0.0558X－0.0025，相關(guān)系數(shù)為r＝0.9999 （n＝5）。

3.3 準(zhǔn)確度

按處方比例取空白輔料，再分別稱取地氯雷他定對照品17、22、27mg，精密稱定，分別置于10ml量瓶中，加流動相適量溶解并定容至刻度，搖勻，濾過；分別量取續(xù)濾液1ml于50ml量瓶中，用流動相定容，配制成濃度分別為80%、100%、120%的供試品溶液，每個濃度各配制3份。照含量測定方法測定，記錄色譜圖，計(jì)算其回收率，結(jié)果見表2。

結(jié)果顯示，枸地氯雷他定的含量測定加樣回收率均在99%～101%之間，平均回收率為100.2%，RSD為0.6% （RSD≤2%），符合要求，說明該方法具有良好的準(zhǔn)確度。

表2 含量測定的回收率試驗(yàn)結(jié)果

3.4 精密度

精密量取2.2項(xiàng)下的供試品溶液10μl，注入色譜儀，連續(xù)進(jìn)樣6次，測定峰面積，結(jié)果見表3。結(jié)果顯示，各峰面積的RSD為0.2% （RSD≤2%），該含量測定方法的精密度良好。

表3 含量測定的精密度結(jié)果

3.5 重復(fù)性

按2.2項(xiàng)下的方法平行配制供試品溶液6份，對照品溶液1份，按含量測定項(xiàng)下方法測定峰面積，結(jié)果見表4，結(jié)果顯示，6份樣品的測定結(jié)果均在93.0%～107.0%之間，且RSD為0.3% （RSD≤2%），該含量測定方法具有良好的重復(fù)性。

表4 含量測定的重復(fù)性結(jié)果

3.6 溶液穩(wěn)定性

取2.2項(xiàng)下的供試品溶液1份，分別于配樣后0、1、2、4、8、12、24h進(jìn)樣，測定峰面積，結(jié)果見表5。結(jié)果表明樣品溶液至少在24h內(nèi)穩(wěn)定 （RSD≤2%）。

表5 含量測定的溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果

4 結(jié)語

取對照品溶液在200～400nm波長范圍內(nèi)進(jìn)行光譜掃描，結(jié)果在最大吸收波長為282nm，且在此波長下空白輔料無干擾，故選擇282nm作為枸地氯雷他定顆粒的檢測波長。

綜上所述，本方法測定結(jié)果準(zhǔn)確，精密度高，可以作為枸地氯雷他定顆粒的含量測定方法。

［1］羅建華，肖漢龍，王軍 .復(fù)方甘草酸苷聯(lián)合枸地氯雷他定治療慢性蕁麻疹 ［J］.實(shí)用醫(yī)藥雜志，2011，28（8）：697.

［2］趙靜，石慶，柳兵 .枸地氯雷他定和氯雷他定片治療慢性蕁麻疹的療效比較 ［J］.中國醫(yī)藥導(dǎo)刊，2012，14（4）：636，607.

［3］中華人民共和國藥典委員會 .中華人民共和國藥典·二部 ［S］.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010.