張冬霞，史立英，李 影，于 紅，黃士敏，李凌波

（1.吉林省腫瘤醫(yī)院輸血科，吉林長春130012；2.長春博迅生物技術有限責任公司）

抗－Ce合并抗－e混合抗體致交叉配血不合1例分析

張冬霞1，史立英1，李 影1，于 紅1，黃士敏1，李凌波2＊

（1.吉林省腫瘤醫(yī)院輸血科，吉林長春130012；2.長春博迅生物技術有限責任公司）

1 臨床資料

患者，女，38歲，2013年11月在我院診斷為卵巢癌術后化療后（Ⅳ期）?；颊咴?年9個月余前在某醫(yī)院行全子宮及雙側附件切除術，并于2012年12月、2013年1月兩次分別輸注去白細胞洗滌紅細胞懸液2U，自述未發(fā)生溶血性輸血反應。入本院后給予輸血、升血對癥治療。患者血型鑒定為B型，RhD陽性。應用卡式抗人球蛋白試驗對患者血清進行不規(guī)則抗體篩選為陽性，且輸血前行卡式法交叉配血時，發(fā)現(xiàn)連續(xù)配血4份（均為B型RhD陽）均出現(xiàn)主側凝集，遂對患者血清不規(guī)則抗體進行鑒定，發(fā)現(xiàn)患者血清出現(xiàn)IgG類抗－Ce和IgG類抗－e混合抗體。

ABO、RhD血型定型檢測卡（單克隆抗體）；抗人球蛋白檢測卡；Rh血型抗原檢測卡（單克隆抗體）；ABO血型反定型試劑盒（人血紅細胞）；不規(guī)則抗體檢測試劑（人血紅細胞）；低離子強度鹽溶液（LISS）。以上均由長春博迅生物技術有限責任公司生產。紅細胞血型抗體鑒定譜細胞，10人份，上海血液生物醫(yī)藥有限責任公司生產。以上所有試劑均在效期內使用。

血型鑒定：采用卡式法，按生產廠家使用說明書進行操作和判讀。

不規(guī)則抗體篩查：采用鹽水法及卡式抗人球蛋白試驗兩種方法，卡式法按廠家使用說明書進行操作和判讀。

不規(guī)則抗體鑒定：采用鹽水法及卡式抗人球蛋白試驗，分別將標本血清與由10人份O型紅細胞組成的譜紅細胞及自身紅細胞（卡式法中使用紅細胞均由低離子強度鹽溶液稀釋成0.8%濃度）反應。與譜紅細胞中1至數(shù)人份凝集，與自身紅細胞不凝集者為抗體陽性，并根據與譜紅細胞的反應格局判定抗體特異性。

吸收放散試驗及抗體效價測定 吸收放散試驗及抗體效價測定均按文獻［1］進行。

2 結果

患者ABO血型為B型，Rh血型表型為DccEE?；颊哐逶谏睇}水介質中，與所有篩檢細胞均產生陰性反應；在卡式抗人球蛋白試驗中與1號、3號細胞分別呈3＋、2＋的陽性反應，與2號細胞呈陰性反應，提示患者血清檢出ABO系統(tǒng)外的IgG類的不規(guī)則抗體。篩檢細胞的1號、2號和3號的Rh血型分別為DCCee、DccEE、DCcEe?；颊哐逶谏睇}水介質中與所有的譜細胞及自身對照細胞均產生陰性反應；在卡式抗人球蛋白試驗中，除與第2號（Rh血型DccEE）、第10號（Rh血型DccEE）譜細胞以及自身對照細胞反應結果為陰性以外，其余的反應結果均為陽性。結果表明患者血清中可能存在抗－Ce、抗C和抗－e抗體，需進一步鑒定抗體特異性。由于此抗體在室溫生理鹽水介質中沒有反應活性，可判斷為IgG性質抗體。吸收放散試驗：選取前述譜細胞中Rh表型dccee型細胞吸收患者血清，直到吸收后血清與該細胞反應陰性為止，表明已完全去除了可能存在的抗－e和（或）抗－Ce抗體，再用上述譜細胞檢測吸收后患者血清，發(fā)現(xiàn)與C抗原相關的DCCee、DCcEe型譜細胞均呈陰性，表明患者血清中不存在單特異性抗－C抗體。對吸收抗體后的dccee細胞進行放散，應用譜細胞、自身細胞檢測放散液，除DccEE型譜細胞以及自身細胞結果陰性以外，其余的結果均為陽性；將放散液與本室篩出的O型DCcEE型獻血者細胞反應，結果為陽性，排除患者血清中單獨存在單特異性的抗－e抗體，表明存在抗－Ce復合抗體或抗－Ce、抗－e混合抗體?？贵w效價測定：用篩出的DCcEE型獻血者細胞吸收患者血清，直到吸收后血清與該細胞反應陰性為止，吸收后血清與譜細胞中DccEe、Dccee、dccee型細胞均呈陽性反應，表明患者血清中應存在抗－Ce、抗－e混合抗體；應用O型Dccee型細胞檢測吸收后患者血清抗體效價，測得IgG抗－e效價為8。對吸收患者血清后的DCcEE細胞進行放散，應用O型DCCee型細胞對放散液中抗體進行檢測，測得IgG抗－Ce效價為16。

3 討論

Rh血型是人類已知的紅細胞血型中最為復雜的一個，現(xiàn)已確定的Rh血型抗原總共有50多個［2］。臨床上Rh血型抗原抗體的不相容均可致溶血性輸血反應、新生兒溶血病以及自身免疫性溶血性貧血［3］，其臨床意義僅次于ABO血型。Rh血型抗體主要是由妊娠、輸血或其他明確原因產生的同種異型免疫抗體，其中抗－D曾是最常見的抗體，但隨著近年來對RhD血型的常規(guī)檢測并對供受者的RhD配型以及將抗RhD免疫球蛋白用于預防的出現(xiàn)，其發(fā)生率已顯著下降。一項國內的研究顯示［4］，對5 050名患者Rh血型抗原及不規(guī)則抗體進行檢測，共檢出抗體70例，其中抗－E、抗－c、抗－C的檢出頻率均超過抗－D，并檢出抗－cE與抗－Ce復合抗體各1例，并認為這與檢測的患者Rh系統(tǒng)抗原分布頻率等因素有關。

Rh系統(tǒng)不規(guī)則抗體的出現(xiàn)，在輸血前相容性檢測中還可導致反復交叉配血不合，本例患者曾因卵巢癌術后多次輸注去白細胞洗滌紅細胞懸液，由于患者Rh血型表型為DccEE，其在多次輸血免疫刺激下產生了不規(guī)則抗體，給交叉配血造成了很大困難，經鑒定該患者產生的抗體為IgG類抗－Ce合并抗－e混合抗體，我們根據鑒定結果為該患篩選B型DccEE表型的獻血者進行配血相合后輸注取得了良好效果，但篩選過程中發(fā)現(xiàn)相合率不高大概為3%－4%左右，這應與中國北方人Rh血型DcE單倍型頻率（0.2417）相對不高有關［5］。由于患者前幾次輸血均在其他醫(yī)院進行，其獻血者的血液已不可考，不能證實是哪一次輸血免疫產生了抗體。抗－e抗體并不常見，因為只有大約3%的人為e抗原陰性，且抗－e往往和抗－Ce同時存在［6］，本例患者推測應是多次輸注了DCCee等表型的獻血者血液導致產生了抗－Ce和抗－e混合抗體，這也與諸多研究顯示的我國DCe單倍型頻率（0.6583［4］、0.5901［5］、0.6405［7］）較高有關。

Ce復合抗原，現(xiàn)ISBT（國際輸血協(xié)會）命名為RH7，以及類似的抗原RH41，均為C和e在同一復合物中，被同一基因所編碼［6］。最初的抗－Ce（同時伴有很弱的抗e）是從一位經免疫的婦女血清中發(fā)現(xiàn)的，其表型即為DccEE［8］。抗－Ce、抗－e混合抗體的出現(xiàn)，臨床上可引起新生兒溶血病及溶血性輸血反應［9，10］，也是導致交叉配血不合的一個重要因素［9，11］。因此，在輸血前對具有輸血史和妊娠史的患者應進行抗體篩選，進而采取相應的方法對含有不規(guī)則抗體的患者進行抗體鑒定，可有效提高配血效率，并根據鑒定結果為患者尋找相配合的血液進行輸注，以減少輸血反應的發(fā)生。

［1］葉應嫵，王毓三，申子瑜.全國臨床檢驗操作規(guī)程［M］.第3版，南京：東南大學出版社，2006：255－258.

［2］考杉斯基主編.陳 竺，陳賽娟主譯.威廉姆斯血液學［M］.第8版，北京：人民衛(wèi)生出版社，2011：2090－2091.

［3］Avent ND，Reid ME.The Rh blood group system：a review［J］.Blood，2000，95（2）：375.

［4］于天華，遇紅梅，梁海英，等.5050名患者Rh分型及不規(guī)則抗體鑒定結果分析［J］.中國輸血雜志，2012，25（8）：756.

［5］趙桐茂編著.人類血型遺傳學［M］.北京：科學出版社，1987：366.

［6］李 勇，馬學嚴.實用血液免疫學血型理論和實驗技術［M］.北京：科學出版社，2006：197.

［7］楊天楹，楊成民，田兆嵩.臨床輸血學［M］.北京：北京醫(yī)科大學中國協(xié)和醫(yī)科大學聯(lián)合出版社，1993：41－42.

［8］Rosenfield RE，Haber GV.An Rh blood factor，rhi（Ce），and its relationship to hr（ce）［J］.Am J Hum Genet，1958；10（4）：474.

［9］陳月寬，張紹基，鐘吉康，等.IgG抗－Ce、抗－e聯(lián)合抗體致遲發(fā)性溶血反應1例［J］.第三軍醫(yī)大學學報，2009，31（1）：92.

［10］孫國棟，尹志柱，張彥平，等.抗－Ce、抗－e致新生兒溶血病1例［J］.中國輸血雜志，2006，19（2）：147.

［11］劉福昌，姜珍一，王 麗.長期輸血治療患者的免疫血清學分析1例［J］.中國輸血雜志，2013，26（10）：1035.

2014－03－15）

1007－4287（2015）02－0324－02

＊通訊作者