邱麗娟，張重陽，劉宇鵬

有機磷農藥的免疫毒性

邱麗娟，張重陽，劉宇鵬

我國是農業(yè)生產大國，有機磷農藥使用廣泛，近幾年有機磷中毒呈逐年上升趨勢，最新研究發(fā)現(xiàn)，有機磷中毒會影響人的免疫系統(tǒng)，有一定的免疫毒性，因此本文總結有機磷中毒的免疫毒性，從而在臨床上引起警覺，提高在免疫方面的治療手段。

有機磷農藥；中毒；免疫毒性

一些人群長期慢性或亞慢性暴露于許多廣泛使用的農藥中，給健康帶來了嚴重的危害，而這些農藥如敵敵畏、馬拉硫磷、對硫磷等均已被實驗證實會導致免疫功能異常改變，但其機制還尚不明確。急性有機磷農藥中毒可引起機體多臟器損害及多種生理、生化指標的改變，同時機體免疫功能改變。對農藥免疫毒性是一個重要的研究領域，現(xiàn)就目前研究做一闡述。

1 對免疫器官的毒性作用

胸腺和脾臟是體內重要的免疫器官，在淋巴細胞成熟過程中起重要作用，胸腺、脾臟指數(shù)是評價機體免疫功能狀況的重要指標之一[1]。樂果、甲基對硫磷及新開發(fā)的生物農藥都可以引起動物胸腺和（或）脾臟指數(shù)降低[2]。張成梅等[3]研究發(fā)現(xiàn)，參芪扶正粉針40～80mg/10 g（中-高劑量）靜脈給藥后，能夠促進小鼠免疫器官發(fā)育，提高小鼠胸、脾指數(shù)，顯著提高綿羊紅細胞誘導的小鼠遲發(fā)性變態(tài)反應能力；提高小鼠抗體生成細胞數(shù)和血清溶血素水平，溶血空斑數(shù)顯著升高。

2 對體液免疫的毒性作用

體液免疫是由B細胞介導的機體一種重要的免疫反應，主要涉及人體內可以與各種攻擊因子結合的抗體，是一類大分子蛋白質，稱作免疫球蛋白，包括IgG、IgA、IgM、IgD和IgE5種類型，所以免疫球蛋白主要反映體液免疫功能。

急性重度有機磷中毒患者體液免疫功能嚴重受損，可使機體抗感染免疫的功能降低，可能是中毒患者酶活力不升高、恢復時間緩慢、易合并感染等主要原因。眾多的臨床觀察發(fā)現(xiàn)急性農藥中毒患者血清的IgM、IgG、C3含量低于對照組或無顯著差異，而IgA含量變化或高或低，血液膽堿酯酶（ChE）抑制程度與Ig、C3含量降低的程度基本一致。急性農藥中毒患者的IgG、IgA、C3、C4濃度降低[4]。農藥噴灑人員血清中IgM滴度顯著降低。有機磷車間工人的IgA滴度下降[4]。在對敵敵畏生產和包裝車間的100名工人進行調查時，發(fā)現(xiàn)敵敵畏可以引起血清IgG、IgA濃度顯著下降[5]。

通常用抗體形成細胞（PFC）和抗體產生量來反映體液免疫功能，用于檢測人群體液免疫的指標主要有免疫球蛋白（Ig）、補體（C）、C反應蛋白（CRP）、血清和唾液溶菌酶、血清透明質酸（HA）、纖維連接蛋白（Fn）及抗胰蛋白酶等。臨床上傾向用IgG、IgA、IgM抗體產生量評估體液免疫功能。動物實驗發(fā)現(xiàn)，農藥的急性、亞慢性和慢性暴露均可抑制體液免疫功能。樂果、馬拉硫磷等可引起試驗動物的PFC下降[5]。對有機磷農藥聯(lián)合其他藥物中毒免疫毒性也進行過研究，樂果在以100倍的ADI（每天允許攝入量）單獨染毒時，沒有引起觀察參數(shù)的變化。聯(lián)合染毒時，硫丹+樂果組引起大鼠白細胞數(shù)和單核細胞數(shù)增加；樂果+西維因組引起大鼠紅細胞數(shù)增加。劑量為1000倍的ADI時，硫丹+樂果+西維因聯(lián)合染毒組動物中IgG、IgM滴度和白細胞、淋巴細胞計數(shù)都顯著地減少[6]。

3 對細胞免疫的毒性作用

細胞免疫功能在人體抗感染及內環(huán)境自身穩(wěn)定中具有極其重要的作用。大量資料表明，在職業(yè)性接觸毒物或意外中毒時，多種環(huán)境污染物和藥物能改變細胞免疫功能。細胞免疫主要涉及兩大類細胞：B細胞和T細胞，而T細胞是反映特異性細胞免疫能力的重要指標，T細胞還可以分成CD3、CD4、CD8和CD56+16等；CD3可在成熟T淋巴細胞中表達，是鑒定T細胞的重要標志。CD4為免疫應答中的主要反應細胞。CD8可對靶細胞產生細胞介導的細胞毒作用，同時對CD4具有調節(jié)性抑制作用。CD4與CD8的作用相互平衡，導致正常免疫應答。維持CD4/CD8比值的平衡是機體免疫系統(tǒng)正常的表現(xiàn)。CD56+16在免疫防御中是重要的細胞毒性效應細胞。檢測免疫功能的主要指標是血清免疫球蛋白（Ig）定量和T細胞亞群分析，而T細胞亞群中主要指標是CD4和CD8。如果Ig降低或者B細胞、T細胞數(shù)目降低或其比例異常，特別是CD4、CD8的數(shù)目或其比例異常都提示可能存在免疫功能下降。

張國林等[7]觀察到急性有機磷農藥中毒后機體細胞免疫功能急劇下降，中毒后CD3、CD4、CD8的改變與中毒程度有關，中、重度中毒低于正常對照，中毒后T淋巴細胞亞群的下降以CD4最顯著，以后隨著病情的恢復而逐漸恢復，其中以CD3、CD8恢復較快，而CD4恢復較慢，中毒后第7天仍低于正常對照。李強等[8]通過觀察52例急性有機磷農藥中毒患者中毒2天內、3天、7天、14天靜脈血，檢測T淋巴細胞亞群CD3、CD4、CD8、CD4／CD8比值，并以中毒程度分為輕度組、中度組、重度組，分別統(tǒng)計結果，以同樣方法檢查30例正常人做對照組。輕度組T淋巴細胞亞群與正常組相比差異無顯著性意義（P＞O.05）；中度組CD3與CD8于中毒2天與正常組相比差異顯著（P＜0.05），CD4于2天、3天、7天與正常組相比差異非常顯著或差異顯著（P＜0.001/P＜0.05）；重度組CD3于2天、3天，CD8于2天分別與正常組相比差異顯著（P＜0.05），CD4于2天、3天、7天分別與正常組相比差異非常顯著或差異顯著（P＜0.001/P＜0.05）。

從功能上簡單地說，B細胞可以生成各種抗體，而T細胞本身就能殺死或吞噬進入體內的各種病原體?？偠灾@些抗體和細胞在體內構成了一套非常復雜、有效和完整的防御體系。

急性有機磷農藥中毒可使患者T淋巴細胞亞群抗原表達受抑制細胞免疫功能嚴重受損，損害程度與患者中毒劑量及病情嚴重程度有關。中毒后T細胞各亞群的變化與中毒劑量、中毒后恢復所需時間以及T細胞亞群類型密切相關，其確切機制還有待進一步研究。動態(tài)檢測T淋巴細胞亞群可作為判斷中毒程度、了解機體免疫狀況、指導治療、觀察療效和判斷預后的客觀指標。此外，中毒患者細胞免疫功能嚴重受損，可使機體抗感染免疫的功能降低，可能是中毒患者易合并感染的主要原因，亦提示臨床在治療過程中，尤其在中毒兩周內，應注意提高患者的免疫力，并積極預防院內交叉感染。

4 對非特異性免疫功能的影響

檢測非特異性免疫功能的常用指標有免疫細胞的吞噬和自然殺傷功能。巨噬細胞不僅參與機體的特異性免疫反應和非特異性免疫反應，而且是兩種免疫反應的聯(lián)系細胞，具有提高抗原、吞噬消化以及分泌多種細胞因子等重要功能[9]。而農藥可通過減少單核和吞噬細胞產生的自由基及減弱它們的趨化功能兩個方面來抑制非特異性免疫功能。吞噬細胞產生的超氧陰離子自由基在殺滅外源微生物中具有重要作用，實驗發(fā)現(xiàn)，魚暴露在含0.8mg/L馬拉硫磷的水中14天后，其腎臟吞噬細胞產生的超氧陰離子自由基含量降低。馬拉硫磷亞慢性暴露減弱受試動物（小鼠、大鼠、兔）的白細胞抑制和巨噬細胞抑制現(xiàn)象。NK細胞（自然殺傷細胞）是機體參與免疫反應的淋巴細胞的一種，能在體內外殺傷腫瘤細胞和病毒感染的細胞，起到免疫監(jiān)視和抗感染的作用[10]皮下注射半數(shù)致死量20%和80%的敵敵畏顯著抑制大鼠的NK細胞活性和抗體依賴的細胞毒性作用[11]。已證實，人NK和細胞毒性T淋巴細胞（CTL）細胞表達A，B，3／K，H和M等5種顆粒酶，而OP是絲氨酸酯酶（包括顆粒酶）的強效抑制劑，因此推測NK和CTL細胞的活性降低可能是由于顆粒酶的活性被抑制。Li測定了敵敵畏對人顆粒酶活性的影響，發(fā)現(xiàn)敵敵畏顯著抑制顆粒酶A，3/K，H和M的活性。為了進一步驗證這一機制，Li等[12-13]又研究了絲氨酸蛋白酶抑制劑（p-ABSF）對NK和CTL細胞活性的影響，發(fā)現(xiàn)p-ABSF顯著降低人和鼠類NK細胞以及鼠CTL細胞活性，相同劑量下，使細胞活性降低的順序與敵敵畏得到的結果相同。另外，p-ABSF與敵敵畏聯(lián)合應用對上述效應細胞活性的抑制存在累加效應，從而證明敵敵畏和p-ABSF抑制NK、CTL細胞活性的機制是相同的。所以，敵敵畏抑制顆粒酶活性，抑制顆粒酶、顆粒溶素和穿孔素在人NK細胞中的表達，而且誘導NK細胞脫顆粒，造成腫瘤或病毒感染的靶細胞死亡。

有機磷農藥存在不可忽視的免疫毒性，損傷NK細胞和CTL細胞主要通過兩種機制，其一，胞吐途徑：通過胞吐作用直接釋放由穿孔素、顆粒酶和顆粒溶素組成的溶細胞顆粒殺傷靶細胞。其二，F(xiàn)asL／Fas途徑：通過FasL／Fas途徑，由殺傷細胞表面配體FasL（CD95L）與靶細胞表面配體Fas（CD 95）交聯(lián)，誘導靶細胞凋亡。

張國林等[7]動態(tài)觀察中毒患者中毒后T淋巴細胞亞群的變化有助于判斷中毒程度及觀察療效、判斷預后。中毒后由于機體細胞免疫功能降低，機體抗感染免疫的能力降低，易引起感染，中毒后外周血中T淋巴細胞數(shù)的減少與急性有機磷農藥中毒患者內分泌功能紊亂，對T淋巴細胞的調節(jié)失調及有機磷農藥對T淋巴細胞的直接損害作用有關。急性有機磷農藥中毒患者血液中白細胞介素-2濃度降低 ，而白細胞介素-2主要由T淋巴細胞產生，這為急性有機磷農藥中毒患者外周血中T淋巴細胞減少提供了理論依據(jù)。急性有機磷農藥中毒患者血清IgA升高，提示中毒患者機體局部黏膜體液免疫功能增強，且動態(tài)觀察中毒患者血清體液免疫有助于中毒分級診斷。

總之，有機磷中毒在導致乙酰膽堿蓄積并引起一系列臨床癥狀基礎上，會影響人體免疫系統(tǒng)，產生免疫毒性，產生一系列并發(fā)癥。因此，在未來有機磷農藥中毒的治療中，應當對有機磷農藥的免疫毒性給予重視。

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（收稿：2015-09-02 修回：2015-10-22 編校：齊 彤）

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2095-3496（2015）04-0261-03

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