田 勇，王 衛(wèi)

(天津市藥品檢驗(yàn)所，天津 300070)

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毛細(xì)管氣相色譜法測定富馬酸福莫特羅中的殘留溶劑

田 勇，王 衛(wèi)

(天津市藥品檢驗(yàn)所，天津 300070)

目的：建立毛細(xì)管氣相色譜法檢測富馬酸福莫特羅中乙醇、異丙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯和N,N-二甲基甲酰胺的方法。方法：采用DB-624毛細(xì)管色譜柱；柱溫采用程序升溫的方法；載氣為氮?dú)?；FID檢測器。結(jié)果：本色譜條件下，乙醇、異丙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯和N,N-二甲基甲酰胺線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)均在0.999 6以上，平均回收率分別為101.0%、100.9%、102.8%、97.1%及100.5%。檢出限分別為5、5、3、5及1.8 μg/ml。結(jié)論：本法靈敏、準(zhǔn)確，適用于富馬酸福莫特羅殘留溶劑的檢測。

富馬酸福莫特羅，毛細(xì)管氣相色譜法，殘留溶劑

富馬酸福莫特羅是日本山之內(nèi)制藥株式會(huì)社研發(fā)的第三代β2腎上腺素受體激動(dòng)劑類平喘藥，用于緩解由支氣管哮喘、急性支氣管炎、喘息性支氣管炎或肺氣腫等氣道阻塞性疾病引起的呼吸困難等癥狀[1]。本品在合成工藝中使用了乙醇、異丙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯和N，N-二甲基甲酰胺5種有機(jī)溶劑，在生產(chǎn)過程中無法完全去除，故需要確保產(chǎn)品中這些溶劑殘留量符合《中國藥典》和ICH的規(guī)定[2，3]，以保證這些溶劑殘留量是人體可以接受的。本項(xiàng)目為國家藥典委員會(huì)國家基本藥物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提高項(xiàng)目，為了提高對(duì)富馬酸福莫特羅的質(zhì)量控制，建立了毛細(xì)管氣相色譜法測定產(chǎn)品中的殘留溶劑，并進(jìn)行了方法學(xué)驗(yàn)證研究。該方法準(zhǔn)確、專屬性強(qiáng)，可用于富馬酸福莫特羅中殘留溶劑的控制。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 Agilent 7890A氣相色譜儀；FID檢測器。

1.2 試藥 富馬酸福莫特羅(天津力生制藥有限公司，批號(hào)1072-10-02-03-2、1072-10-02-03-5及1072-10-02-03-6)，乙醇、異丙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯及N,N-二甲基甲酰胺均為分析醇，二甲亞砜為色譜純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件及系統(tǒng)適用性 色譜柱為DB-624毛細(xì)管柱[(94%二甲基聚硅氧烷-6%氰丙基苯聚硅氧烷)，(30 m×0.32 mm，1.8 μm)]，載氣為氮?dú)?，流速? ml/min，起始柱溫50 ℃，維持5 min，以10 ℃/min速率升溫至200 ℃，維持5 min，進(jìn)樣口溫度200 ℃，檢測器溫度250 ℃，分流比10∶1，進(jìn)樣量1 μl。在該色譜條件下，乙醇、異丙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯和N,N-二甲基甲酰胺5種溶劑峰均得到良好的分離，分離度符合《中國藥典》的規(guī)定。

2.2 溶液的制備

2.2.1 對(duì)照品溶液 精密稱取乙醇、異丙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯及N，N-二甲基甲酰胺適量，用二甲亞砜定量稀釋制成每1 ml中含乙醇、異丙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯及N，N-二甲基甲酰胺分別為250、250、30、250和44 μg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

2.2.2 供試品溶液 精密稱取樣品0.5 g，置10 ml量瓶中，加二甲基亞砜溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

2.2.3 陰性溶液 以溶劑二甲基亞砜作為陰性溶液。 精密量取對(duì)照品溶液、供試品溶液和陰性溶液各1 μl，依“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣，記錄色譜圖，見圖1。

2.3 線性試驗(yàn) 分別精密稱取各殘留溶劑適量，用二甲亞砜溶解并稀釋制成每1 ml中含乙醇1.25 mg、異丙醇1.25 mg、二氯甲烷0.15 mg、乙酸乙酯1.25 mg和N，N-二甲基甲酰胺0.22 mg的對(duì)照品貯備液，用二甲亞砜逐步稀釋制成梯度濃度。分別精密量取上述溶液1 μl，注入氣相色譜儀，記錄色譜圖。以濃度(C)為橫坐標(biāo)，峰面積(A)為縱坐標(biāo)，分別進(jìn)行線性回歸，結(jié)果見表1。

1.乙醇 2.異丙醇 3.二氯甲烷

溶劑回歸方程r線性范圍(μg/ml)乙醇A=0.9284C-0.00190.999950～500異丙醇A=0.9848C+0.81170.999950～500二氯甲烷A=0.2560C-0.10060.99966～60乙酸乙酯A=0.8459C+0.05700.999950～500N,N-二甲基甲酰胺A=0.6599C+0.92300.99998.8～88

2.4 檢出限試驗(yàn) 取對(duì)照品溶液，用二甲亞砜稀釋至信噪比約為3時(shí)，測得乙醇、異丙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯及N,N-二甲基甲酰胺的檢出限分別為5、5、3、5和1.8 μg/ml。

2.5 重復(fù)性試驗(yàn) 取同一批號(hào)樣品適量，照“2.2.2”項(xiàng)下供試品溶液配制方法平行配制6份，進(jìn)樣分析，計(jì)算乙醇、異丙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯及N,N-二甲基甲酰胺的含量，結(jié)果顯示，重復(fù)性良好。

2.6 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取對(duì)照品溶液和供試品溶液于0、12和24 h分別進(jìn)樣測定，結(jié)果表明：對(duì)照品溶液和供試品溶液24 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.7 回收率試驗(yàn) 精密稱取樣品0.5 g，共9份，置10 ml量瓶中，分別用相當(dāng)于各溶劑檢查限度80%、100%和120%對(duì)照品溶液溶解并稀釋至刻度，進(jìn)樣分析，按外標(biāo)法計(jì)算乙醇、異丙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯及N,N-二甲基甲酰胺的平均回收率分別為101.0%、100.9%、102.8%、97.1%和100.5%，RSD分別為0.6%、0.8%、2.0%、2.1%和2.1%。見表2-表6。

表2 乙醇?xì)埩羧軇┗厥章?/p>

表3 異丙醇?xì)埩羧軇┗厥章?/p>

表4 二氯甲烷殘留溶劑回收率

表5 乙酸乙酯殘留溶劑回收率

表6 N,N-二甲基甲酰胺殘留溶劑回收率

2.8 樣品測定 取三批樣品適量，照“2.2.2”項(xiàng)下供試品溶液配制方法，按上述色譜條件測定，結(jié)果三批樣品中異丙醇均為0.01%，其他幾種溶劑均未檢出。

3 討論

3.1 進(jìn)樣方式選擇 采用頂空進(jìn)樣法測定殘留溶劑，對(duì)測定干擾小，對(duì)儀器污染少，因此低沸點(diǎn)的乙醇、異丙醇、二氯甲烷及乙酸乙酯測定首選頂空進(jìn)樣。但N，N-二甲基甲酰胺的沸點(diǎn)較高，不宜采用頂空進(jìn)樣法測定，故采用直接進(jìn)樣測定。

3.2 色譜柱選擇 試驗(yàn)考查了DB-5、DB-624及DB-WAX三種不同極性的毛細(xì)管柱，采用DB-5及DB-WAX毛細(xì)管柱分離時(shí)，未能將各組分完全分離，而采用DB-624柱滿足檢測分離條件，并且相關(guān)色譜峰峰形最佳。

本品原生產(chǎn)廠家采用干燥失重統(tǒng)一控制水分及殘留溶劑量，此次，按照國家藥典委員會(huì)要求，為了加強(qiáng)對(duì)產(chǎn)品的質(zhì)量控制，建立了毛細(xì)管氣相色譜法測定富馬酸福莫特羅殘留溶劑方法，提高了產(chǎn)品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，有利于控制產(chǎn)品的內(nèi)在質(zhì)量。

1 金勇, 張少輝. 富馬酸福莫特羅[J]. 藥學(xué)進(jìn)展，1998，22(3)：187-189

2 中國藥典[S].二部.2010:附錄61

3 周海鈞.藥品注冊(cè)的國際技術(shù)要求(質(zhì)量部分)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2007：126-144

Capillary gas chromatograghy for determination of residual solvents in formoterol fumarate

Tian Yong, Wang Wei

(Tianjin Institute of Drug Control,Tianjin 300070)

Objective:To establish a sample capillary gas chromatography method for the analysis of residual ethanol,isopropanol,dichlormethane ethyl acetate and N,N-dimethyl formamide in formoterol fumarate.Methods:The method included chromatogram systems,using DB-624 capillary chromatograghic column (30 m×0.32 mm,1.8 μm) with procedural column temperature control ,was established.Nitrogen gas was used as carrier gas and FID as detector.Resuits:The correlation coefficient in ethanol,isopropanol,dichlormethane ethyl acetate and N,N-dimethyl formamide were all higher than 0.999 6.The recoveries were 101.0%，100.9%,102.8%,97.1%,100.5%,respectively.The limit detection respectively were 5,5,3,5,1.8 μg/ml.Cconclustion:This method is sensitive,accurate and can be used for quality control.

formoterol fumarate, capillary gas chromatography, residual solvents

2014-06-25

R927.11

A

1006-5687(2015)01-0014-04