李彥博, 李　新, 譚爰麗, 吳德兵, 洪　莉

(武漢大學(xué)人民醫(yī)院 婦產(chǎn)科, 湖北 武漢, 430060)

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神經(jīng)生長(zhǎng)因子的分布情況與子宮內(nèi)膜異位癥疼痛的相關(guān)性研究

李彥博, 李新, 譚爰麗, 吳德兵, 洪莉

(武漢大學(xué)人民醫(yī)院 婦產(chǎn)科, 湖北 武漢, 430060)

摘要:目的分析患有子宮腺肌病的患者異位和在位2種情況時(shí)內(nèi)膜組織表達(dá)神經(jīng)生長(zhǎng)因子的水平的影響，分析子宮內(nèi)異癥患者與正常子宮內(nèi)膜的患者之間的區(qū)別，以及這種區(qū)別與痛經(jīng)的關(guān)系。方法收集本院從2014年1月—2014年12月期間收治的患有子宮肌病的患者22例為實(shí)驗(yàn)組。選取同期行絕育術(shù)者或子宮肌瘤但子宮內(nèi)膜正常增殖的患者22例作為對(duì)照組。運(yùn)用免疫組化法檢測(cè)各個(gè)研究對(duì)象的神經(jīng)生長(zhǎng)因子表達(dá)水平。結(jié)果 對(duì)照組患者子宮內(nèi)膜的神經(jīng)生長(zhǎng)因子水平低于子宮內(nèi)異癥患者，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05); 子宮腺肌病患者中神經(jīng)生長(zhǎng)因子的表達(dá)高于在子宮內(nèi)異癥患者，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05); EMT中度疼痛組和輕度疼痛組的OD值和PGP 9.5的密度明顯低于重度疼痛組(P<0.01)。結(jié)論子宮內(nèi)膜中神經(jīng)生長(zhǎng)因子的含量可能可以作為檢測(cè)患者是否患有子宮內(nèi)異癥的理論依據(jù)，也可以作為分析子宮內(nèi)異癥患者的治療情況提供有利依據(jù)。

關(guān)鍵詞:子宮內(nèi)膜異位癥; 神經(jīng)生長(zhǎng)因子; 痛經(jīng)

子宮內(nèi)膜異位癥(EMT)簡(jiǎn)稱內(nèi)異癥，主要癥狀為不孕、持續(xù)性疼痛以及盆腔粘連等，發(fā)病率達(dá)到了10%～15%。該疾病使患者的生活質(zhì)量明顯下降，但病理上這種疾病呈現(xiàn)一種良性改變。目前認(rèn)為，子宮內(nèi)膜異位癥造成的疼痛與很多因素有關(guān)，但具體的影響因素目前尚無(wú)相關(guān)報(bào)道。就目前的研究而言，影響子宮內(nèi)膜異位癥患者疼痛程度的一個(gè)重要因素可能是神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)的異常表達(dá)，其有可能是引發(fā)子宮內(nèi)膜異位癥的原因之一。P物質(zhì)、神經(jīng)微絲蛋白以及降鈣素基因相關(guān)肽的表達(dá)與調(diào)控都與疼痛介質(zhì)神經(jīng)生長(zhǎng)因子有關(guān)，且神經(jīng)生長(zhǎng)因子還可以增加感覺(jué)神經(jīng)元的數(shù)量。此外，神經(jīng)生長(zhǎng)因子還是一種疼痛介質(zhì)，參與了炎癥性疼痛以及痛覺(jué)過(guò)敏的過(guò)程。本實(shí)驗(yàn)主要檢測(cè)了神經(jīng)生長(zhǎng)因子分布情況與疼痛的關(guān)系，根據(jù)疼痛以及子宮內(nèi)膜異位癥與神經(jīng)生長(zhǎng)因子分泌的關(guān)系。同時(shí)，比較正?；颊吲c子宮內(nèi)膜異位癥患者的神經(jīng)生長(zhǎng)因子含量，分析其與內(nèi)異癥以及其與疼痛的關(guān)系。

1資料與方法

選取2014年1月—12月本院非子宮內(nèi)膜疾病22例患者作為對(duì)照組，包括絕育手術(shù)者或者子宮肌瘤者，行子宮肌瘤切除術(shù)并且刮宮或者子宮全切患者，經(jīng)病理證實(shí)子宮內(nèi)膜正常的患者。選取同時(shí)期本院行經(jīng)腹腔鏡或者經(jīng)腹手術(shù)且刮宮，病理檢驗(yàn)證實(shí)為子宮內(nèi)膜異位癥的患者22例作為實(shí)驗(yàn)組。所有參與患者年齡30～60歲，月經(jīng)規(guī)律，臨床資料齊全。所有患者必須未經(jīng)過(guò)放療、化療以及服用過(guò)激素類藥物，無(wú)代謝性、炎癥型、免疫型以及內(nèi)分泌型疾病，沒(méi)有進(jìn)行過(guò)宮內(nèi)放置宮內(nèi)絕育器材，術(shù)前6個(gè)月內(nèi)無(wú)哺乳以及妊娠史。實(shí)驗(yàn)前已簽署同意書。

在手術(shù)過(guò)程中獲取的新鮮組織標(biāo)本，再用10%甲醛固定，進(jìn)行常規(guī)脫水，然后進(jìn)行石蠟包埋，再用切片機(jī)進(jìn)行連續(xù)切片，厚度均為4 pm, 小心放置，備用。各組使用免疫組化的方法測(cè)量各組研究對(duì)象中神經(jīng)生長(zhǎng)因子的含量，主要步驟按照試劑盒上的說(shuō)明進(jìn)行。

2結(jié)果

2.1　對(duì)照組與子宮內(nèi)膜異位癥組患者體內(nèi)NGF、PGP 9.5的表達(dá)水平比較

對(duì)照組患者與子宮內(nèi)膜異位癥組患者體內(nèi)NGF的表達(dá)水平比較結(jié)果顯示，NGF在2種情況下的表達(dá)是有差異的，且NGF在子宮內(nèi)膜異位癥組患者體內(nèi)的表達(dá)比在對(duì)照組患者體內(nèi)表達(dá)水平高(P<0.05)。對(duì)照組患者的神經(jīng)生長(zhǎng)因子水平略低于腺肌病在位內(nèi)膜組以及異位內(nèi)膜組患者，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。PGP 9.5在2種情況下的表達(dá)是有差異的，且PGP 9.5在子宮內(nèi)膜異位癥組患者體內(nèi)的表達(dá)高于對(duì)照組(P<0.01)。對(duì)照組PGP 9.5水平略低于腺肌病異位內(nèi)膜組以及在位內(nèi)膜組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)。見(jiàn)表1。

表1　對(duì)照組與子宮內(nèi)膜異位癥組患者體內(nèi)NGF、

2.2　神經(jīng)生長(zhǎng)因子與子宮內(nèi)膜異位癥患者的疼痛關(guān)系

EMT輕度和中度疼痛組的NGF的OD值明顯低于重癥疼痛組。NGF本身在子宮內(nèi)膜異位癥患者的體內(nèi)高度表達(dá)，且隨著痛經(jīng)評(píng)分的升高，NGF的表達(dá)量呈現(xiàn)更加明顯的增加趨勢(shì)。Pearson相關(guān)分析顯示，MoD值與痛經(jīng)評(píng)分之間存在著顯著的正相關(guān)關(guān)系(P<0.001)。

3討論

子宮內(nèi)膜異位癥目前在中國(guó)的發(fā)病率逐年上升，在普通婦科手術(shù)中占據(jù)30%以上[1]。子宮內(nèi)膜異位癥會(huì)引起很多不適癥狀，如下腹痛、痛經(jīng)以及性交痛等，極大地影響了女性的生活，且也已經(jīng)成為了不育癥的病因之一[2]。內(nèi)異癥目前的發(fā)病機(jī)制尚未研究清楚，它形態(tài)多樣，病情復(fù)雜，且常有復(fù)發(fā)，轉(zhuǎn)移以及浸潤(rùn)的可能性，已經(jīng)成為當(dāng)今婦科的一個(gè)難治之癥以及成為了研究的熱點(diǎn)[3]。目前來(lái)看，對(duì)內(nèi)異癥發(fā)病機(jī)制的說(shuō)法很多，其中的主導(dǎo)理論是內(nèi)膜細(xì)胞隨著經(jīng)血逆流種植，而其中的關(guān)鍵問(wèn)題在于對(duì)模型的建立以及科學(xué)的解釋。一種常見(jiàn)的生理現(xiàn)象其實(shí)就是經(jīng)血逆流，不過(guò)許多經(jīng)血逆流的人并沒(méi)有患上子宮內(nèi)膜異位癥[4]?，F(xiàn)在對(duì)于子宮內(nèi)膜異位癥新概念主要是內(nèi)異癥是指內(nèi)膜細(xì)胞異位發(fā)育、生長(zhǎng)和出血時(shí)引發(fā)的癥狀。其實(shí)，內(nèi)膜細(xì)胞的逆流也需要一定的條件，主要有以下4個(gè)方面[5]: ① 進(jìn)入腹腔的內(nèi)膜細(xì)胞需經(jīng)輸卵管; ② 細(xì)胞碎片在經(jīng)血中必須是活的; ③ 內(nèi)膜細(xì)胞被移植到盆腔組織后要有一定的貼服力，以便貼在腔壁上; ④ 內(nèi)異癥在盆腔的分布和脫落細(xì)胞的種植。因此，到達(dá)盆腔的內(nèi)膜細(xì)胞要經(jīng)過(guò)3道防線，在這一復(fù)雜的過(guò)程中，局部環(huán)境的多種酶、雌激素以及細(xì)胞因子都起到了非常重要的作用。非內(nèi)異癥患者與內(nèi)異癥患者的主要差異體現(xiàn)在在位內(nèi)膜的生物以及分子特質(zhì)的差異，這些差異都可以追溯到基因的差異上。這些理論可以很好的解釋內(nèi)異癥的遺傳性以及家族傾向的原因，可以作為內(nèi)異癥基因治療的基礎(chǔ)。

發(fā)病機(jī)制的新靶點(diǎn)是研究子宮在位內(nèi)膜的新靶點(diǎn)[6]。對(duì)逆流到異地內(nèi)膜的細(xì)胞的命運(yùn)起到?jīng)Q定作用的是在位內(nèi)膜的分子生物學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)等以及組織 病理學(xué)等特征，即在位內(nèi)膜決定論。它相對(duì)比較全面的詮釋、解釋以及修正了以往的學(xué)說(shuō)，提出了新的解決問(wèn)題的思路。以往的學(xué)說(shuō)，比如Sampson學(xué)說(shuō)，無(wú)法解釋某些重要部位的內(nèi)異癥的發(fā)生機(jī)制，如副中腎管或體腔上皮化生假說(shuō)則可以的解釋陰道直腸內(nèi)異癥、子宮腺肌癥、胸腔等部位的內(nèi)異癥發(fā)生機(jī)制。

內(nèi)異癥的臨床病變以及臨床病理分類具有廣泛性的特點(diǎn)，部位分布呈彌漫性，病理分類表現(xiàn)出多形性[7]。近年來(lái)的研究[8]表明，其可以分為4種類型: ① 深部浸潤(rùn)型(DIE); ② 腹膜型; ③ 卵巢型; ④ 特殊部位型。不同的組織其病理特征、治療發(fā)難都具有很大的差別。所以，內(nèi)異癥是一種可以再細(xì)分的疾病。腹膜內(nèi)異癥 (PEM)的表現(xiàn)具有明顯的階段性，從紅色、黑色到白色病變。這個(gè)步驟是內(nèi)異癥換雜合病理組織變換的生物活性變化結(jié)果以及病理組織學(xué)變化結(jié)果。深部浸潤(rùn)型(DIE)主要表現(xiàn)為苗勒管殘余性化生，已有活性的間質(zhì)以及內(nèi)膜腺體的基礎(chǔ)上，平滑肌纖維化或者增生后就成為子宮腺肌癥樣的結(jié)節(jié)，但其與腹膜內(nèi)異癥時(shí)累及子宮直腸窩是很不同的。對(duì)內(nèi)異癥的分期一直存在著爭(zhēng)議，內(nèi)異癥分期評(píng)分法 (R-AFS)分期具有潛在的觀察誤差以及主觀誤差且對(duì)生育的估計(jì)存在一定的局限性。所以，完善分期，對(duì)內(nèi)異癥的治療以及預(yù)后都是一個(gè)重要的問(wèn)題[9]。目前，比較權(quán)威的內(nèi)異癥診斷的金標(biāo)準(zhǔn)是腹腔鏡檢查，但是對(duì)所有可疑的內(nèi)異癥患者都實(shí)行也不是一個(gè)十分可取的方法。所以今后的主要方向就是尋找敏感性和特異性均好的標(biāo)志物[10]。加拿大對(duì)患者的子宮內(nèi)膜、血清等多種特異性因子進(jìn)行了綜合測(cè)評(píng)，推出了一種新的實(shí)驗(yàn)方式，通過(guò)這種方式測(cè)得的子宮內(nèi)膜異位癥的患者其陽(yáng)性率是95%，陰性率是75%。參照國(guó)外的情況，根據(jù)中國(guó)的情況，新的診斷模式可以是分析以下的5種檢驗(yàn)指標(biāo)[11]: ① 不育：繼發(fā)性或者是原發(fā)性不育，特別是繼發(fā)性; ② 有性交痛、痛經(jīng)、慢性盆腔疼痛或下腹痛; ③ B超聲掃描，結(jié)果中附件區(qū)不存在壁厚、內(nèi)部點(diǎn)狀增強(qiáng)回聲、附件區(qū)無(wú)回聲以及界限不清等情況; ④ 盆腔檢查無(wú)直腸窩結(jié)節(jié)、觸 痛、附件包塊等; ⑤ 血清CA125水平在50到80 kIU/L[12]。

子宮內(nèi)膜異位癥時(shí)疼痛也是本病的主要癥狀之一，但病灶大小不一定與經(jīng)期疼痛的程度呈正比[13]，卵巢異位囊腫、粘連嚴(yán)重的患者可能并不表現(xiàn)出疼痛[14], 但是散在于盆腔內(nèi)的小的病灶確可以引起劇烈疼痛。少數(shù)患者經(jīng)歷長(zhǎng)期的下腹痛，經(jīng)期疼痛異常加劇。今年來(lái)的研究還未對(duì)繼發(fā)性疼經(jīng)的發(fā)病機(jī)制研究明確，但是可以造成血管攣縮、子宮平滑肌過(guò)強(qiáng)收縮、繼發(fā)子宮缺血、缺氧的物質(zhì)是前列腺素含量的異常增高[15]。近年來(lái)的研究發(fā)現(xiàn)，正常患者的子宮內(nèi)膜和子宮內(nèi)膜異位癥的患者的子宮內(nèi)膜不一樣，其纖維分布尤其不同，EMT的發(fā)病很有可能就與這些纖維的不同有關(guān)。神經(jīng)生長(zhǎng)因子表達(dá)的異常增加被認(rèn)為與子 宮內(nèi)膜異位癥患者痛經(jīng)的發(fā)生有關(guān)，進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn)，非EMT患者與EMT患者的在位內(nèi)膜相比，神經(jīng)纖維稀疏，且高表達(dá)p75NTR以及TrkA。這些物質(zhì)在子宮內(nèi)膜異位癥患者的病灶處的表達(dá)異常升高，足以說(shuō)明痛覺(jué)過(guò)敏以及痛經(jīng)都與其有一定的關(guān)系。神經(jīng)生長(zhǎng)因子是一種靶源性的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子，支持神經(jīng)元的生長(zhǎng)分化、存活以及功能的維持，在調(diào)整神經(jīng)病理性疼痛的過(guò)程中起到了至關(guān)重要的作用。很多學(xué)者認(rèn)為，子宮內(nèi)膜異位癥患者的痛經(jīng)與神經(jīng)生長(zhǎng)因子的異常表達(dá)增加密切相關(guān)。本研究通過(guò)對(duì)腺肌病患者內(nèi)膜組織以及正常患者內(nèi)膜組織中神經(jīng)生長(zhǎng)因子的表達(dá)情況，以及它與痛經(jīng)的關(guān)系，揭示了神經(jīng)生長(zhǎng)因子在子宮內(nèi)膜異位癥的患者中與其痛經(jīng)的發(fā)生、發(fā)展以及結(jié)局有著密不可分的關(guān)系。結(jié)果顯示，對(duì)照組患者的神經(jīng)生長(zhǎng)因子水平略低于腺肌病異位內(nèi)膜組以及在位內(nèi)膜組患者(P<0.05)。Pearson相關(guān)分析顯示，MoD值與痛經(jīng)評(píng)分之間存在著顯著的正相關(guān)關(guān)系(P<0.001)。

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Research on the correlation between distribution of nerve growth factors and endometriosis pain

LI Yanbo, LI Xin, TAN Yuanli, WU Debing, HONG Li

(DepartmentofGynecologyandObstetrics,ThePeople′sHospitalofWuhanUniversity,Wuhan,Hubei, 430060)

ABSTRACT:ObjectiveTo analyze the influence of the level of nerve growth factor in uterine adenomyosis patients and normal patients, to research the difference between them and to explore its relation with dysmenorrhea. MethodsA total of 22 uterine adenomyosis patients from January 2014 to December 2014 were selected as the experimental group and 22 patients with normal intrauterine membrane were selected as control group. The content of their nerve growth factor of these patients were detected. ResultsNerve growth factor levels in endometriosis patients were higher than those with normal endometrium(P<0.05). And the expression of nerve growth factor was higher than those with normal endometrium (P<0.05). The OD value and PGP 9.5 density in EMT medium pain group and mild pain group were lower than that in the server pain group (P<0.01). ConclusionThe occurrence of endometriosis may be associated with nerve growth factor, which is powerful evidence for the treatment of endometriosis.

KEYWORDS:endometriosis; nerve growth factor; dysmenorrhea

基金項(xiàng)目:湖北省自然科學(xué)基金(ZRY1153)

收稿日期:2015-04-26

中圖分類號(hào):R 473.71

文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A

文章編號(hào):1672-2353(2015)17-045-03

DOI:10.7619/jcmp.201517014