鄧之榮++周世月++譚琳++王立++楊宏艷

摘 要：目的：研究五味子酚對血管性癡呆小鼠學習記憶能力的影響。方法：小鼠隨機分為假手術(shù)組、模型組、五味子酚藥物組（30、100 mg/kg，ip）。采用雙側(cè)頸總動脈結(jié)扎法建立血管性癡呆模型，給藥2周后用Morris水迷宮測試小鼠學習記憶能力。結(jié)果：五味子酚能明顯縮短癡呆小鼠找到平臺的潛伏期和游泳路程。結(jié)論：五味子酚可改善血管性癡呆小鼠的學習記憶能力。

關(guān)鍵詞：五味子酚 血管性癡呆 學習記憶

中圖分類號：R749.16 文獻標識碼：A 文章編號：1674-098X（2015）01（a）-0026-01

血管性癡呆（vascular dementia，VD）是腦部機能減退而導致的一種認知功能缺損的綜合征，主要與缺血性腦血管疾病有關(guān)。迄今為止，人類還未找到治療血管性癡呆癥的有效方法，且防治手段十分有限。雙側(cè)頸總動脈結(jié)扎能很好的模擬腦缺血過程，是制備血管性癡呆癥的常用模型。本實驗通過行為學實驗觀察五味子酚對癡呆模型小鼠的學習記憶的改善作用，觀察五味子酚對血管性癡呆的療效。

1 材料與方法

1.1 血管性癡呆模型復制方法

按文獻方法，將小鼠用水合氯醛（350 mg/kg，ip）麻醉，消毒，頸正中切口，分離雙側(cè)頸總動脈，各穿一絲線備用。用小鼠動脈夾夾住頸總動脈，阻斷血流15 min，并同時在距尾尖1 cm處剪斷放血約0.3 mL，熱凝止血。松開動脈夾灌注5 min后，再次阻斷血流，重復上述步驟2次，縫合皮膚，術(shù)后每日肌注青霉素0.2萬單位，連續(xù)3 d。假手術(shù)組只分離頸總動脈，穿絲線，但不阻斷血流，尾部不放血，觀察時間等與模型組相同。

1.2 動物分組與給藥

健康昆明小鼠，體重20～30 g，由齊齊哈爾醫(yī)學院實驗動物中心提供。隨機分為4組：假手術(shù)組、模型組、五味子酚藥物組（30、100 mg/kg），每組15只動物。小鼠適應性飼養(yǎng)2天，小鼠連續(xù)腹腔注射五味子酚7天后，開始造模。模型組（造模后腹腔注射生理鹽水，連續(xù)14 d）、五味子酚組（造模后五味子酚30 mg/（kg·d），100 mg/（kg·d），連續(xù)14 d）。造模2周后通過Morris水迷宮試驗對小鼠進行學習和記憶成績測試，觀察其行為學改變。

1.3 Morris水迷宮實驗

Morris水迷宮分兩部分，前五天進行定位航行試驗，第六天進行空間探索實驗。平臺放置于第二象限的中心，水面高出平臺1.0 cm。每只小鼠每天接受2次訓練，分別從兩個不同的入水點開始，兩次訓練間隔1 min，記錄小鼠找到平臺的時間（逃避潛伏期）和找到平臺的所經(jīng)路程。如果小鼠在120 s內(nèi)未找到平臺，則潛伏期以120 s計算?？臻g探索實驗中，移去平臺，將小鼠從平臺對角象限放入水中，自由游泳120 s，記錄小鼠在平臺所處象限停留的時間，用于測試小鼠對平臺空間位置的記憶能力。

2 結(jié)果

水迷宮實驗結(jié)果顯示，與假手術(shù)組相比，雙側(cè)頸總動脈結(jié)扎的小鼠找到平臺的潛伏期和游泳路程明顯延長，兩組相比，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.001），表明小鼠學習記憶功能明顯損傷。而五味子酚在100 mg·kg-1劑量時，可顯著縮短小鼠找到平臺的潛伏期和游泳路程（P<0.01，P<0.05），表明五味子酚具有改善小鼠學習記憶的作用。見圖1，A圖是五味子酚對小鼠到達平臺時間（s）的影響；B圖是五味子酚對小鼠到達平臺游泳路程（cm）的影響。模型組與對照組相比，###P<0.001；五味子酚藥物組與模型組相比，*P<0.05，**P<0.01

3 討論

血管性癡呆是發(fā)展中國家的人得癡呆癥的首要原因，慢性腦缺血是研究血管性癡呆發(fā)病機理的重要組成部分，可導致持久性認知損傷。學習記憶障礙是人類血管性癡呆早發(fā)癥狀之一，Morris水迷宮是檢測實驗動物學習記憶能力的重要指標。本實驗應用雙側(cè)頸總動脈結(jié)扎制備血管性癡呆的動物模型，用Morris水迷宮觀察了五味子酚對癡呆模型小鼠學習記憶的影響。實驗結(jié)果表明：與空白組相比，模型組動物找到平臺的潛伏期和游泳路程明顯延長，出現(xiàn)明顯的空間學習記憶障礙，提示模型制備成功。與模型組相比，五味子酚可明顯縮短小鼠找到平臺的潛伏期和游泳路程，顯著改善癡呆小鼠的學習記憶能力。

五味子酚是從中藥五味子中提取的木脂素類成分之一。文獻報道五味子酚具有顯著的抗氧化活性，對氧化低密度脂蛋白（ox- LDL）引起的神經(jīng)細胞損傷具有明顯的保護作用[1]。其機制包括維持細胞內(nèi)抗氧化成分谷胱甘肽水平、清除氧自由基、抑制凋亡信號通路的重要信號分子細胞色素C的釋放。五味子酚對血管性癡呆的治療作用可能與其抗氧化、清除氧自由基、減輕神經(jīng)元的氧化應激損傷和凋亡有關(guān)。

參考文獻

[1] YU L H，LIU G T.Schisanhenol attenuated ox-LDL-induced apoptosis and reactive oxygen species generation in bovine aorta endothelial cells in vitro[J].J Asian Nat Prod Res， 2008，10（7-8）：799-806.

[2] YU L H， LIU G T，SUN Y M， et al.Antioxidative effect of schisanhenol on human low density lipoprotein and its quantum chemical calculation[J].Acta Pharmacol Sin，2004，25（8）：1038-1044.

[3] Rincon F，Wright CB.Vascular cognitive impairment[J].Curr Opin Neurol，2013，26（1）：29-36.

[4] Dichgans M，Zietemann V.Prevention of vascular cognitive impairment[J].Stroke，2012，43（11）：3137-3146.