李井泉梁杰雄

全身化療聯(lián)合DC-CIK過(guò)繼免疫治療中晚期胃癌的臨床研究

李井泉梁杰雄

【摘要】目的研究全身化療聯(lián)合DC-CIK過(guò)繼免疫對(duì)中晚期胃癌的治療效果。方法中晚期胃癌患者66例，隨機(jī)分為生物治療組(n=34)和常規(guī)治療組(n=32)。生物治療組Ⅱ、Ⅲ期患者行手術(shù)治療，術(shù)后給以全身化療聯(lián)合DC-CIK過(guò)繼免疫治療，Ⅳ期患者直接給以全身化療聯(lián)合DC-CIK過(guò)繼免疫治療;常規(guī)治療組Ⅱ、Ⅲ期患者行手術(shù)治療，術(shù)后給以全身化療，Ⅳ期患者直接給以全身化療。以臨床受益反應(yīng)［包括視覺(jué)模擬評(píng)分法(VAS)、鎮(zhèn)痛藥物、全身狀況評(píng)分(KPS)和體重以及生存期為觀察指標(biāo)。結(jié)果治療前2組VAS評(píng)分、KPS及體重之間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹥0.05) ;治療后2組疼痛減輕，全身狀況改善，體重增加，在臨床受益反應(yīng)各指標(biāo)及臨床獲益率方面比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹥0.05) ;生物治療組1年生存率為85.3%，常規(guī)治療組1年生存率為71.2%，2組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹤0.05)。結(jié)論全身化療聯(lián)合DC-CIK過(guò)繼免疫治療能夠改善患者的生活質(zhì)量，延長(zhǎng)患者的生存時(shí)間，可以作為中晚期胃癌的綜合治療手段。

【關(guān)鍵詞】過(guò)繼免疫;胃腫瘤;治療效果;臨床受益反應(yīng);綜合治療

作者單位: 100029北京市，首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京安貞醫(yī)院普通外科

隨著經(jīng)濟(jì)和社會(huì)的不斷發(fā)展，腫瘤已經(jīng)成為威脅人類健康的最主要疾病之一，其中以消化道惡性腫瘤尤為突出。據(jù)估計(jì)，胃癌在全球范圍內(nèi)已經(jīng)成為發(fā)病率占第4位的惡性腫瘤［1］。大部分胃癌患者在確診時(shí)已屬于進(jìn)展期，能夠施行根治性切除的患者少于50%［2］。全身化療是中晚期胃癌的主要輔助治療手段，近年來(lái)，隨著新的化療藥物、新的化療方案的應(yīng)用，以手術(shù)為主的胃腸道惡性腫瘤的綜合治療效果有了一定程度的提高，但中晚期胃癌的生存期仍然有限。綜合文獻(xiàn)報(bào)道，進(jìn)展期胃癌5年生存率隨著腫瘤期別的升高而降低［3，4］。因此，采用新的治療手段和方法應(yīng)用于中晚期胃癌的綜合治療，最大限度地提高患者的生存率非常必要。本課題研究目的是了解全身化療聯(lián)合DC-CIK過(guò)繼免疫對(duì)中晚期胃癌的治療效果，通過(guò)評(píng)估臨床受益反應(yīng)以及生存狀況，為DC-CIK細(xì)胞生物免疫治療在中晚期胃癌的臨床應(yīng)用提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1　資料與方法

1.1一般資料2011年2月至2013年10月入選的66例中晚期胃癌患者作為研究對(duì)象，所有患者經(jīng)病理學(xué)檢查證實(shí)，腫瘤分期按照國(guó)際抗癌聯(lián)盟(UICC2009 版)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行。隨機(jī)分為生物治療組(n=34)和常規(guī)治療組(n=32)。生物治療組中，男18例，女16例;年齡38～72歲，平均年齡(62±3)歲;病程1.5～3個(gè)月，平均(1.4±0.5)個(gè)月;全身狀況評(píng)分(KPS)均＞70; 16例患者合并基礎(chǔ)疾病，其中高血壓9例，2型糖尿病3例，冠心病4例;其中Ⅱ期5例，Ⅲ期25例，Ⅳ期4例，Ⅳ期4例患者均發(fā)生肝轉(zhuǎn)移。常規(guī)治療組中，男17例，女15例;年齡41～69歲，平均年齡(60±4) 歲;病程2～3個(gè)月，平均(1.6±0.4)個(gè)月; KPS均＞70; 14例患者合并基礎(chǔ)疾病，其中高血壓7例，2型糖尿病5例，同時(shí)合并高血壓和冠心病2例;其中Ⅱ期3例，Ⅲ期26例，Ⅳ期3例，Ⅳ期3例患者中2例發(fā)生肝轉(zhuǎn)移，1例同時(shí)發(fā)生肝和肺轉(zhuǎn)移。入組所有患者治療前均經(jīng)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，患者及家屬均簽署知情同意書(shū)。2組患者的一般資料見(jiàn)表1。

表1　2組患者一般資料比較　例

1.2入選與排除標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1入選標(biāo)準(zhǔn):①性別不限，年齡＞18歲;②KPS≥70;③細(xì)胞學(xué)或組織病理學(xué)檢查確診;④預(yù)期壽命大于6個(gè)月;⑤血紅蛋白≥12 g/dl，白細(xì)胞≥4.0×109/L，血小板≥100×109/L;⑥無(wú)心、肝、肺、腎等重要臟器功能障礙或衰竭，能夠耐受手術(shù)或其他治療。

1.2.2排除標(biāo)準(zhǔn):①6個(gè)月內(nèi)行放化療;②自體免疫系統(tǒng)疾病;③其他部位原發(fā)性惡性腫瘤;④孕婦以及哺乳期女性;⑤無(wú)病理學(xué)診斷;⑥因各種原因不能完成治療方案。

1.3治療方法

1.3.1生物治療組:Ⅱ、Ⅲ期患者行手術(shù)切除，術(shù)后1月給以全身化療及DC-CIK過(guò)繼免疫治療;Ⅳ期患者給以全身化療及DC-CIK過(guò)繼免疫治療。①化療方案:所有患者均采用CapeOx方案(奧沙利鉑:江蘇恒瑞藥業(yè)股份有限公司，批號(hào): 13010112;卡培他濱:上海羅氏，批號(hào): SH0922-SH0928)。②化療方案實(shí)施方法:奧沙利鉑130 mg/m2輸注2 h (d1) ;卡培他濱1 000 mg/m2分2次口服(d1～d14)，每3周重復(fù)，共6次。DC-CIK過(guò)繼免疫治療實(shí)施方案:化療前2 d使用COBE血細(xì)胞分離機(jī)采集患者自身的外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)，采血量約50 ml，用0.9%氯化鈉溶液洗滌4次，使細(xì)胞數(shù)量達(dá)到(1～3)×108個(gè)/ml，然后使用RPMI1640培養(yǎng)基(加拿大維森特公司)調(diào)整PBMC細(xì)胞濃度至2.5×106～3.0×106個(gè)/ml。將細(xì)胞接種于6孔培養(yǎng)板，置37℃、5% CO2培養(yǎng)箱孵育，依次加入重組人IFN-g、CD3單克隆抗體、重組人IL-2刺激CIK細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖，在培養(yǎng)的第7天，收獲CIK細(xì)胞。加入含重組人GM-CSF和重組人IL-4的無(wú)血清培養(yǎng)液，37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，誘導(dǎo)單核細(xì)胞向DC細(xì)胞分化;每3天半量換液1次，并補(bǔ)足細(xì)胞因子。CIK培養(yǎng)至第7天，將細(xì)胞合并至1瓶，將收獲的mDC加入CIK細(xì)胞懸液中，DC細(xì)胞和CIK細(xì)胞按1∶10的個(gè)數(shù)比共培養(yǎng)，無(wú)血清培養(yǎng)液中添加重組人IL-2(300 U/ml) ;每3天半量換液1次，并補(bǔ)加重組人IL-2(300 U/ml)。在第7天收集細(xì)胞，細(xì)胞數(shù)量應(yīng)達(dá)到1×1010個(gè)以上。③DC-CIK質(zhì)量控制:每次治療前24 h和治療前2 h，對(duì)DC-CIK細(xì)胞取樣，臺(tái)盼藍(lán)染色檢測(cè)活細(xì)胞數(shù)目;流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞表面CD3、CD8、CD56等分子的表達(dá);以DC-CIK細(xì)胞為效應(yīng)細(xì)胞使用乳酸脫氫酶(LDH)試劑盒檢測(cè)效應(yīng)細(xì)胞對(duì)靶細(xì)胞的殺傷率;取少量培養(yǎng)物進(jìn)行細(xì)菌、真菌培養(yǎng)，并檢測(cè)支原體、衣原體及內(nèi)毒素。待檢測(cè)結(jié)果合格后收集9～13 d誘導(dǎo)擴(kuò)增后獲得的DC-CIK細(xì)胞，0.9%氯化鈉溶液洗滌3次后配成100 ml液體靜脈回輸，每天輸1次，每次回輸細(xì)胞(5.0±0.5)×108個(gè)/次，連續(xù)5次為1個(gè)療程。

1.3.2常規(guī)治療組:Ⅱ、Ⅲ期患者行手術(shù)切除，術(shù)后1個(gè)月給以全身化療;Ⅳ期患者給以全身化療。所有患者均采用CapeOx方案，實(shí)施方法同生物治療組。

1.4觀察指標(biāo)(1)臨床受益反應(yīng)(CBR) :根據(jù)患者視覺(jué)模擬評(píng)分法(VAS評(píng)分)、鎮(zhèn)痛藥物、KPS評(píng)分以及體質(zhì)量變化，評(píng)價(jià)患者綜合治療后臨床受益情況。①疼痛評(píng)分:采用VAS(0～10分，0代表無(wú)疼痛，10代表疼痛難以忍受)進(jìn)行疼痛評(píng)分，計(jì)算鎮(zhèn)痛藥物的消耗量，由2位指定醫(yī)師分別評(píng)價(jià)，每周1次。止痛有效: VAS評(píng)分降低50%以上和(或)鎮(zhèn)痛藥物用量減少50%以上，至少持續(xù)4周;止痛無(wú)效:疼痛程度加重，止痛劑用量增加，穩(wěn)定:疼痛程度及止痛劑用量無(wú)變化。②全身狀況評(píng)分:采用KPS方法進(jìn)行全身狀況評(píng)分(0～100分，0代表死亡，100代表無(wú)疾病的癥狀)。有效: KPS改善至少20分以上，持續(xù)4周;穩(wěn)定:化療前后無(wú)變化;無(wú)效: KPS比化療前減少20分以上。③CBR評(píng)估: VAS評(píng)分、鎮(zhèn)痛藥物用量、KPS中至少1項(xiàng)有效，其他2項(xiàng)穩(wěn)定者為有效;其中1項(xiàng)無(wú)效，即為無(wú)效; 3項(xiàng)全部穩(wěn)定者為穩(wěn)定，體重增加超過(guò)7%，且持續(xù)4周，也視為有效。(2)生存期觀察:隨訪時(shí)間為1年。1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)分析應(yīng)用SAS 8.2統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量資料以±s表示，采用t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)，P﹤0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1治療情況生物治療組5例Ⅱ期患者及25例Ⅲ期患者接受外科手術(shù)治療，術(shù)后1個(gè)月給以全身化療聯(lián)合DC-CIK過(guò)繼免疫治療，4例Ⅳ期患者接受全身化療聯(lián)合DC-CIK過(guò)繼免疫治療，生物治療組在行生物治療過(guò)程中共發(fā)生副反應(yīng)13例，其中發(fā)熱9例(26.5%)，其他包括乏力、惡心、局部疼痛等4例(11.8%)，經(jīng)對(duì)癥治療后均緩解。常規(guī)治療組3例Ⅱ期患者及26例Ⅲ期患者接受外科手術(shù)治療，外科手術(shù)治療后1月給以全身化療，3例Ⅳ期患者給以全身化療。

2.22組CBR各項(xiàng)指標(biāo)比較(1) VAS評(píng)分:生物治療組和常規(guī)治療組在治療前后均未使用止痛劑。生物治療組術(shù)前有8例出現(xiàn)疼痛，包括Ⅲ期患者4例，Ⅳ期患者4例(23.5%)，其中腹部疼痛6例，腰背部疼痛2 例;常規(guī)治療組術(shù)前有10例出現(xiàn)疼痛，包括Ⅲ期患者7例，Ⅳ期患者3例(31.4%)，其中腹部疼痛8例，腰背部疼痛2例。治療前2組VAS評(píng)分比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹥0.05)。治療后2組VAS評(píng)分均呈降低趨勢(shì)，治療后1年2組VAS評(píng)分比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹥0.05)。(2) KPS:治療前2組KPS比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹥0.05) ;治療后2組KPS均呈增加趨勢(shì)，治療后1年2組KPS比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹥0.05)。(3)體重變化:治療前2組體重比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05) ;治療后2組體重均呈增加趨勢(shì)，術(shù)后1年2組體重比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹥0.05)。見(jiàn)表2。

2.3臨床獲益率生物治療組和常規(guī)治療治療組在臨床獲益率方面比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。見(jiàn)表3。

表2　2組CBR各項(xiàng)指標(biāo)比較　±s

表2　2組CBR各項(xiàng)指標(biāo)比較　±s

注:治療前為術(shù)前觀察結(jié)果，治療后為術(shù)后1年觀察結(jié)果

組別　VAS評(píng)分(分)治療前　治療后KPS(分)治療前　治療后體重(kg)治療前　治療后生物治療組(n=34)5.3±0.4 1.1±0.3　70.1±2.3　93.5±4.1　65±5　69±5常規(guī)治療組(n=32)　5.5±0.2 1.8±0.1　72.3±3.8　95.3±5.2　67±6　70±4 P值　﹥0.05　﹥0.05　﹥0.05　﹥0.05　﹥0.05　﹥0.05

表3　2組臨床獲益率比較　例(%)

2.4生存情況隨訪時(shí)間為1年，生物治療組死亡5例，其中Ⅲ期患者2例，Ⅳ期患者3例，1年生存率為85.3%;常規(guī)治療組死亡9例，其中Ⅲ期患者6例，Ⅳ期患者3例，1年生存率為71.2%。2組患者死因均為腫瘤復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移及腫瘤惡病質(zhì)導(dǎo)致的多臟器功能衰竭。2組1年生存率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹤0.05)。見(jiàn)表4。

表4　2組病例生存情況

3　討論

隨著腫瘤學(xué)、免疫學(xué)以及分子生物學(xué)等相關(guān)學(xué)科的迅速發(fā)展和交叉滲透，腫瘤免疫治療的研究突飛猛進(jìn)，以免疫學(xué)原理為基礎(chǔ)、免疫學(xué)技術(shù)為方法而建立起來(lái)的腫瘤免疫治療，已經(jīng)從實(shí)驗(yàn)室研究逐漸向有效、安全的臨床應(yīng)用過(guò)渡［5］。生物免疫治療已經(jīng)成為腫瘤綜合治療的第四種模式，并受到了越來(lái)越多的關(guān)注。

腫瘤生物免疫治療是利用各種生物治療制劑及手段，以增強(qiáng)人體的免疫機(jī)能，達(dá)到控制和消滅腫瘤的目的。過(guò)繼性細(xì)胞免疫治療是腫瘤免疫治療的一種手段，通過(guò)輸注自身或同種特異性或非特異性抗腫瘤免疫效應(yīng)細(xì)胞，直接殺傷腫瘤細(xì)胞或糾正機(jī)體低下的細(xì)胞免疫功能來(lái)達(dá)到治療腫瘤的目的。它不僅可以糾正細(xì)胞免疫功能低下，促進(jìn)宿主抗腫瘤免疫功能，并且可直接發(fā)揮抗腫瘤作用。目前根據(jù)輸注細(xì)胞的抗原特異性將過(guò)繼性免疫細(xì)胞治療分為以下兩大類:非特異性過(guò)繼性細(xì)胞治療，包括淋巴因子活化的殺傷細(xì)胞(LAK)，細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞(CIK)，自然殺傷細(xì)胞;特異性過(guò)繼性細(xì)胞治療，主要是細(xì)胞毒性T細(xì)胞(CTL) ;根據(jù)輸注細(xì)胞的來(lái)源可以分為自體淋巴細(xì)胞治療和異體造血干細(xì)胞治療等。樹(shù)突狀細(xì)胞(dendritic cell，DC)是人體內(nèi)功能最強(qiáng)大的專職抗原提呈細(xì)胞，其細(xì)胞膜表面高表達(dá)主要組織相容性復(fù)合物(major histocompatibility complex，MHC)Ⅱ類分子，能夠攝取、加工及提呈抗原，DC可誘導(dǎo)抗原特異性細(xì)胞毒性CTL反應(yīng)，啟動(dòng)效應(yīng)性T細(xì)胞遷移至腫瘤部位［6］。CIK是用細(xì)胞因子誘導(dǎo)外周血或臍帶血單核細(xì)胞而得到的一群異質(zhì)細(xì)胞(NK樣T細(xì)胞)，可通過(guò)多種機(jī)制直接或間接殺傷腫瘤細(xì)胞，同時(shí)具備T細(xì)胞殺瘤活性高、NK細(xì)胞殺瘤譜廣等優(yōu)勢(shì)［7］。體外研究表明，DC 和CIK細(xì)胞共同培養(yǎng)可提高細(xì)胞的增殖速度、殺傷活性及特異性，DC-CIK共培養(yǎng)的抗腫瘤效應(yīng)明顯高于單純CIK細(xì)胞或DC［8］。目前，國(guó)內(nèi)外對(duì)DC-CIK細(xì)胞生物免疫在腎癌及淋巴造血系統(tǒng)腫瘤治療方面進(jìn)行了廣泛的研究，但DC-CIK細(xì)胞生物免疫治療在中晚期胃癌的臨床研究報(bào)道較少。

DC是目前所知人體內(nèi)抗原遞呈功能最強(qiáng)大的抗原遞呈細(xì)胞，是初次免疫應(yīng)答的始動(dòng)者。除了誘導(dǎo)抗原特異性細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞，還可以直接或間接方式影響B(tài)細(xì)胞的增殖，活化體液的免疫反應(yīng)，有效抵制腫瘤細(xì)胞的逃逸［9］。有研究發(fā)現(xiàn)DC能夠與NK細(xì)胞相互促進(jìn)，從而增強(qiáng)對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷能力［10］。由DC激活的細(xì)胞免疫應(yīng)答在機(jī)體抗腫瘤中起著主導(dǎo)作用。DC的數(shù)量和功能與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后密切相關(guān)。CIK是用細(xì)胞因子在體外誘導(dǎo)外周血或臍帶血單個(gè)核細(xì)胞而得到的一群異質(zhì)細(xì)胞(NK樣T細(xì)胞)，該細(xì)胞兼具T淋巴細(xì)胞的抗瘤活性和自然殺傷細(xì)胞(NK)的非MHC限制性殺瘤等優(yōu)點(diǎn)，可通過(guò)多種機(jī)制直接、間接殺傷腫瘤細(xì)胞［7］。CIK細(xì)胞主要以CD+3CD8+、CD3+CD56+為效應(yīng)細(xì)胞，是目前臨床過(guò)繼免疫治療中最為有效的效應(yīng)細(xì)胞，其對(duì)腫瘤的微轉(zhuǎn)移及殘留病灶的清除方面具有顯著的療效［11］。DC、CIK細(xì)胞是抗腫瘤免疫中兩個(gè)重要的組成部分，DC識(shí)別腫瘤抗原、激活免疫系統(tǒng)的作用與CIK高效殺傷腫瘤的作用聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同作用，可產(chǎn)生更強(qiáng)大且更完善的抗腫瘤免疫效應(yīng)。DC與CIK細(xì)胞共培養(yǎng)使得DC和CIK之間相互作用，可促進(jìn)CIK的體外增殖和成熟，增強(qiáng)CIK的細(xì)胞毒活性，同時(shí)CIK也能促進(jìn)DC的成熟，兩者相互作用［6］。共培養(yǎng)可引起DC和CIK細(xì)胞表面分子表達(dá)和細(xì)胞因子分泌的變化，共培養(yǎng)DC和CIK細(xì)胞可在體外擴(kuò)增出大量的特異性的CD3+CD56+細(xì)胞，并具有殺瘤活性強(qiáng)、殺瘤譜廣泛、非MHC限制性的特點(diǎn)，具有較強(qiáng)的體內(nèi)外殺瘤活性［12］。Marten等［13］研究發(fā)現(xiàn)CIK可以使DC高表達(dá)CD80、CD86和MHC-，促使DC分泌大量IL-2，DC可以促進(jìn)CIK高表達(dá)CD28和CD40。Schmidt等［14］研究發(fā)現(xiàn)DC-CIK可降低CIK細(xì)胞群中的免疫抑制T細(xì)胞(Treg)而增強(qiáng)抗腫瘤活性。

有學(xué)者對(duì)DC-CIK細(xì)胞生物免疫治療聯(lián)合全身化療對(duì)進(jìn)展期胃癌的治療效果進(jìn)行了研究，全身化療采用TP方案(紫杉醇)，結(jié)果顯示研究組1年累計(jì)生存率為62.2%，而對(duì)照組為46.7%［15］。蔡俊霞等［6］研究了DC-CIK細(xì)胞生物免疫治療對(duì)晚期胃癌的近期療效，全身化療采用OF方案(奧沙利鉑+氟尿嘧啶)，結(jié)果表明與對(duì)照組比較，DC-CIK細(xì)胞生物免疫治療聯(lián)合全身化療后疼痛改善、KPS顯著提高;研究組對(duì)腫瘤的控制率為78.6%，而對(duì)照組為53.6%。仁愛(ài)軍［16］觀察了術(shù)后全身化療聯(lián)合DC-CIK生物免疫治療對(duì)胃癌患者的臨床應(yīng)用效果，化療方案為FOLFOX(奧沙利鉑+氟尿嘧啶+亞葉酸)，結(jié)果顯示研究組患者治療后臨床療效優(yōu)于對(duì)照組，研究組生存質(zhì)量評(píng)分明顯高于對(duì)照組。本課題以中晚期胃癌為研究對(duì)象，以臨床受益反應(yīng)(包括疼痛、止痛藥物使用、全身狀況以及體質(zhì)量)、臨床獲益率以及生存期為觀察指標(biāo)。結(jié)果表明全身化療聯(lián)合DC-CIK過(guò)繼免疫治療和全身化療均能夠改善患者的生存狀況，生物治療組和常規(guī)治療組在治療后疼痛及全身狀況改善，體重呈增加趨勢(shì);本課題隨訪時(shí)間為1年，結(jié)果表明全身化療聯(lián)合DC-CIK過(guò)繼免疫治療的1年生存率為85.3%，全身化療的1年生存率為71.2%，研究結(jié)果與上述文獻(xiàn)報(bào)道相一致，提示DC-CIK細(xì)胞生物免疫治療聯(lián)合全身化療對(duì)中晚期胃癌具有確切的治療效果，能夠提高中晚期胃癌患者的生存率，改善中晚期胃癌的生存狀況，具有很好的臨床應(yīng)用前景。本研究結(jié)果顯示在DC-CIK過(guò)繼免疫治療過(guò)程中出現(xiàn)的主要副作用是發(fā)熱(發(fā)生率41.2%)，其余為惡心、乏力以及注射部位疼痛等(發(fā)生率17.6%)，經(jīng)對(duì)癥治療后均緩解。這一結(jié)果與文獻(xiàn)報(bào)道［6，15］相一致，表明DC-CIK過(guò)繼免疫治療是安全的。

隨著抗腫瘤免疫研究的進(jìn)一步深入，腫瘤過(guò)繼免疫治療不斷取得進(jìn)展。在DC細(xì)胞研究方面，有實(shí)驗(yàn)表明，經(jīng)不同細(xì)胞因子分別誘導(dǎo)出DC和CIK細(xì)胞，熱休克方法處理胃癌MKN-28細(xì)胞株并制備腫瘤抗原用于負(fù)載DC，與CIK細(xì)胞共培養(yǎng)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)效靶比為20∶1時(shí)，負(fù)載MKN-28抗原的DC-CIK(Ag-DC-CIK)組對(duì)MKN-28的殺傷活性遠(yuǎn)大于未負(fù)載MKN-28抗原的DC-CIK組和單純CIK組，說(shuō)明以熱休克凋亡腫瘤細(xì)胞抗原負(fù)載的DC能促進(jìn)CIK細(xì)胞增殖分化，并提高其對(duì)胃癌細(xì)胞的殺傷活性［17］。有實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明將腫瘤細(xì)胞與DC相融合所形成的腫瘤細(xì)胞/DC疫苗能夠表達(dá)源于這兩種細(xì)胞的特征性抗原，能夠有效地增強(qiáng)腫瘤抗原呈遞給宿主T細(xì)胞識(shí)別的能力，可產(chǎn)生明顯刺激T細(xì)胞增殖和CTL對(duì)腫瘤的特異性殺傷作用，從而打破腫瘤的免疫耐受［18］。龐沖等［19］采用腎癌干細(xì)胞(KSC)和肺癌干細(xì)胞(LSC)制備腫瘤抗原(CSC)，健康產(chǎn)婦臍帶血體外誘導(dǎo)擴(kuò)增制備DC和CIK細(xì)胞，將CSC抗原負(fù)載DC，與CIK細(xì)胞共培養(yǎng)，結(jié)果提示CSC抗原負(fù)載DC活化CIK(CSC-DC-CIK)對(duì)同源腫瘤細(xì)胞有更好的殺傷作用。唐家平等［20］探討了胃癌干細(xì)胞抗原負(fù)載DC聯(lián)合CIK對(duì)胃癌細(xì)胞的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)經(jīng)胃癌干細(xì)胞抗原刺激的DC，DC表面成熟標(biāo)志CD83和CD86表達(dá)明顯增加，CD83和CD86表達(dá)率為80.4%，高于DC組、DC-CIK組和胃癌細(xì)胞抗原組;四甲基偶氮唑鹽(MTT)法檢測(cè)不同組別對(duì)胃癌細(xì)胞的殺傷作用，發(fā)現(xiàn)胃癌干細(xì)胞抗原對(duì)胃癌細(xì)胞的殺傷率高于胃癌細(xì)胞抗原組、DC-CIK組以及DC組，作者認(rèn)為胃癌干細(xì)胞作為抗原刺激DC，可增強(qiáng)DC的免疫表達(dá)，促進(jìn)細(xì)胞增殖，提高對(duì)胃癌細(xì)胞的殺傷作用。

本研究觀察了全身化療聯(lián)合DC-CIK過(guò)繼免疫治療對(duì)中晚期胃癌的近期療效，未能對(duì)這種治療方法在中晚期胃癌的遠(yuǎn)期療效方面進(jìn)行分析，是本研究的不足之處。本研究結(jié)果顯示全身化療聯(lián)合DC-CIK過(guò)繼免疫治療能夠提高對(duì)中晚期胃癌患者的近期治療效果，能夠提高中晚期胃癌患者的生存率，改善中晚期胃癌的生存狀況，值得在臨床上推廣使用。腫瘤干細(xì)胞抗原負(fù)載的DC和CIK共培養(yǎng)的抗瘤作用及其分子機(jī)制是目前的研究熱點(diǎn)，今后應(yīng)在這方面進(jìn)行深入研究。相信隨著腫瘤分子生物學(xué)、腫瘤免疫學(xué)以及基因工程的發(fā)展，腫瘤的免疫治療也將會(huì)取得更大的進(jìn)步，在惡性腫瘤的綜合治療中能夠發(fā)揮更大的作用，具有很好的應(yīng)用前景。

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(收稿日期:2014－10－16)

doi:10.3969/j.issn.1002－7386.2015.10.018

【文章編號(hào)】1002－7386(2015) 10－1498－05

【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A

【中圖分類號(hào)】R 735.2