陳紅玲,段 紅,高貴珍,周珊珊
宿州學(xué)院生物與化學(xué)工程學(xué)院,安徽宿州,234000
宿椒1號(hào)中辣椒紅素的穩(wěn)定性及微量元素的測(cè)定
陳紅玲,段 紅,高貴珍,周珊珊
宿州學(xué)院生物與化學(xué)工程學(xué)院,安徽宿州,234000
以宿椒1號(hào)為原材料,利用超聲波破碎細(xì)胞,從辣椒中提取辣椒紅素,并探討辣椒紅素在不同溫度、光照、pH值、氧化劑、還原劑條件下的穩(wěn)定性。用HNO3-HClO4分解樣品,用火焰原子吸收光譜法測(cè)定辣椒制品中Cu、Zn、Ca、Se、Pb五種微量元素的含量。結(jié)果表明,辣椒紅色素對(duì)熱穩(wěn)定,對(duì)太陽(yáng)光敏感,在pH<2條件下不穩(wěn)定,色素耐氧化性較好,耐還原性較差。辣椒中Ca、Zn的含量較高。
辣椒紅素;穩(wěn)定性;火焰原子吸收法;微量元素
辣椒中含有很高的Vc和較豐富的賴氨酸,具有散寒、解郁、健胃、祛風(fēng)、形血、導(dǎo)滯之功。辣椒含高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值,具有保健養(yǎng)生作用和抗癌抗輻射等功能,有很好的發(fā)展前景和很大的消費(fèi)市場(chǎng)。辣椒紅素[1-3]是一種辣椒中的提取物,屬于類胡蘿卜素。其中極性較大的紅色組分主要是辣椒紅素和辣椒玉紅素[4],它們幾乎不溶于水,對(duì)熱較穩(wěn)定,耐光性差,一些金屬離子可使其褪色或沉淀。辣椒紅素著色力強(qiáng),色調(diào)可因濃度而異,呈淺黃至橙紅色,通常由成熟紅辣椒干粉碎后,以乙醇、丙醇、異丙醇或正己烷抽提精制而得。經(jīng)進(jìn)一步純化,可得到具有光澤的深紅色結(jié)晶。辣椒紅素可用于冷飲品、糕點(diǎn)、糖果、醬料、熟肉制品、人造蟹肉等多種食品,還可以有效延長(zhǎng)著色物品的保質(zhì)期。辣椒紅素是國(guó)際上目前銷量最大的天然色素,每年的需求量都超過千萬(wàn)噸,世界各地的銷售空間都非常大[5-6]。
辣椒中富含碳水化合物及Zn、Ca、Se、Cu等人體所需的微量元素。微量元素和大量Vc,在胃腸道內(nèi)可阻止致癌物質(zhì)——亞硝酸胺在體內(nèi)的形成,適當(dāng)食用一些辛辣食品對(duì)人體健康是有益的。微量元素對(duì)生物體內(nèi)的免疫系統(tǒng)有著不可或缺的調(diào)節(jié)作用[7],微量元素通過與蛋白質(zhì)和其他有機(jī)基團(tuán)結(jié)合,形成了酶、激素、維生素等生物大分子,微量元素首先構(gòu)成了體內(nèi)重要的載體與電子傳遞系統(tǒng)[8]。鈣對(duì)人體至關(guān)重要,不但關(guān)系到骨骼健康,而且可能與高血壓、經(jīng)前期緊張綜合癥等有關(guān)。鈣是人體不可或缺的微量元素,它既是身體的構(gòu)造者,又是身體的調(diào)節(jié)者,是人體的生命之源[9]。
目前,銅、鋅、鈣、硒元素的測(cè)定方法主要有火焰光度法、分光光度法、原子吸收光譜法[10-11]和電感耦合等離子體發(fā)射光譜法等。由于火焰光度法選擇性強(qiáng)、靈敏度高、分析范圍廣、抗干擾能力強(qiáng)、精密度高,故本研究用火焰原子吸收光譜法測(cè)定辣椒飲料中5 種不同微量元素的含量,為廣泛開發(fā)和研究辣椒資源提供理論依據(jù)。
1.1 試劑與儀器
1.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
宿椒1號(hào)(宿州學(xué)院生物與化學(xué)工程學(xué)院培育)。
1.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
碳酸鈣、銅、鋅、硒、鉛均為優(yōu)級(jí)純?cè)噭?,濃硝酸、高氯酸、雙氧水均為分析純?cè)噭?/p>
1.2 主要儀器設(shè)備
TAS-900原子吸收分光光度計(jì)(北京譜析),F(xiàn)A2004型電子天平(上海精科),粉碎機(jī);實(shí)驗(yàn)所用玻璃器皿均經(jīng)5%稀硝酸浸泡處理,用二次蒸餾水沖凈,烘干。
1.3 實(shí)驗(yàn)方法
1.3.1 提取過程
優(yōu)質(zhì)辣椒粉→預(yù)處理→溶劑浸提→提取液→減壓蒸餾→辣椒紅素粗品→重結(jié)晶—→高純度的辣椒紅素。
1.3.2 辣椒紅色素的吸收光譜特性
取少許已提取的辣椒紅素,用丙酮溶解后定容至100 mL容量瓶,以丙酮作為參比液,用722型分光光度計(jì)測(cè)辣椒紅色素的最大吸收波長(zhǎng)。
1.3.3 光照對(duì)辣椒紅色素穩(wěn)定性的影響
取25 mL辣椒紅色素溶液3份于100 mL容量瓶中,分別放置于室外日光照射處、室內(nèi)自然光照射處及室內(nèi)陰暗處,每隔1 h取樣一次,測(cè)定吸光值并觀察其顏色變化情況。
1.3.4 溫度對(duì)辣椒紅色素穩(wěn)定性的影響
取等量溶液(25 mL)分別于25、40、60、80、100℃的恒溫水浴鍋中保持恒溫,其中80℃與100℃的要加回流裝置,防止高溫使溶液蒸發(fā)。每隔1 h取樣一次,冷卻至室溫后,用722分光光度計(jì)在其最大吸收波長(zhǎng)處測(cè)定吸光值,并觀察其顏色變化情況。
1.3.5 pH值對(duì)辣椒紅色素穩(wěn)定性的影響
采用檸檬酸-磷酸氫二鈉配制pH 值為1~11的緩沖液,分別量取1 mL辣椒紅色素溶液與9 mL緩沖液充分混合,配制成不同pH值的辣椒紅色素溶液。對(duì)照為1 mL辣椒紅色素溶液與9 mL蒸餾水的混合液,在室溫陰暗處放置。每隔1 h取樣一次,測(cè)定其吸光值,并觀察其顏色變化情況。
1.3.6 氧化劑、還原劑對(duì)色素色度的影響
分別配制不同濃度的H2O2和Na2SO3溶液,按1∶1的比例取辣椒紅色素丙酮溶液分別與其混合,在最大吸收波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度并觀察其顏色,對(duì)照液中加入相同體積的二次蒸餾水。
1.4 辣椒中微量元素的測(cè)定
1.4.1 樣品處理
挑選外觀規(guī)則、色澤亮麗的辣椒,將其用粉碎機(jī)粉碎。取錐形瓶,稱取1.000 5 g辣椒粉于錐形瓶中,再加入20 mL HNO3-HClO4(4∶1),小火加熱至溶液呈淺白色——消化完全。取下冷卻,加30% H2O25.0 mL,繼續(xù)小火加熱至近干,冷卻,用0.1 mol/L硝酸洗滌,定容至100 mL容量瓶,得到樣品液??瞻讟悠返闹苽浒赐瑯拥姆椒?。
1.4.2 標(biāo)準(zhǔn)液配制
銅、硒、鉛標(biāo)準(zhǔn)液:稱取純金屬0.500 0 g置于小燒杯中,用稀硝酸并小火加熱至溶解,再轉(zhuǎn)移至500 mL容量瓶并定容制成1 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液,再逐級(jí)稀釋成2、4、6、8、10 μg/mL。
鋅標(biāo)準(zhǔn)液:稱取純金屬0.500 0 g置于小燒杯中,用稀硝酸并小火加熱至溶解,再轉(zhuǎn)移至500 mL容量瓶并定容制成1 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液,再逐級(jí)稀釋成1、2、3、4、5 μg/mL。
鈣標(biāo)準(zhǔn)液:稱取碳酸鈣1.250 0 g,用稀硝酸并小火加熱至溶解,再轉(zhuǎn)移至500 mL容量瓶并定容制成1 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液,再逐級(jí)稀釋成2、4、6、8、10 μg/mL。
1.4.3 測(cè)定條件
選擇強(qiáng)度高、干擾少、背景低的譜線作為被測(cè)元素的分析譜線,選擇結(jié)果見表1。
表1 火焰原子吸收法測(cè)定條件
2.1 辣椒紅色素的光譜特性
由圖1可知,辣椒紅色素在420~480 nm之間有最大吸收峰,進(jìn)一步測(cè)得最大吸收波長(zhǎng)為460 nm,故以下實(shí)驗(yàn)的測(cè)定波長(zhǎng)選擇為460 nm。
2.2 光照對(duì)辣椒紅色素穩(wěn)定性的影響
從表2可以看出,室內(nèi)暗光對(duì)辣椒紅色素的影響小,吸光值基本沒變化;室內(nèi)自然光的影響也較小,顏色無明顯變化;但在室外太陽(yáng)光下不穩(wěn)定,吸光值下降較快,顏色變化明顯,由橙紅色變?yōu)槿榘咨?,故辣椒紅色素在太陽(yáng)光下不穩(wěn)定。
2.3 溫度對(duì)辣椒紅色素穩(wěn)定性的影響
從表3可以看出,辣椒紅色素在25℃~60℃時(shí)吸光度變化較小,溶液顏色無明顯變化,仍為橙紅色,較穩(wěn)定;當(dāng)溫度升高到80℃~100℃時(shí),吸光度下降程度明顯,顏色由橙紅色變?yōu)槌赛S色,說明在此溫度范圍內(nèi),色素不穩(wěn)定,易分解。另外,80℃~100℃高溫時(shí)短時(shí)間內(nèi)色素較穩(wěn)定,1~2 h內(nèi)色素快速分解。
表2 光照對(duì)辣椒紅色素穩(wěn)定性的影響
表3 溫度對(duì)辣椒紅色素穩(wěn)定性的影響
2.4 pH值對(duì)辣椒紅色素穩(wěn)定性的影響
從表4可以看出,當(dāng)pH值在1~2范圍內(nèi)時(shí),吸光值在前2個(gè)小時(shí)內(nèi)下降較為明顯。顏色逐漸由橙紅色變?yōu)槌赛S色;在pH值在3~11范圍內(nèi)時(shí),其吸光值無明顯變化,顏色變化也不大,說明在pH為3~11時(shí)較穩(wěn)定。
表4 pH值對(duì)辣椒紅色素穩(wěn)定性的影響
2.5 氧化劑、還原劑對(duì)色素色度的影響
由表5可以看出,加入氧化劑H2O2后,色素溶液的吸光度值和顏色明顯變化,說明辣椒紅色素色度有較好的耐氧化性。加入還原劑Na2SO3后,色素溶液的吸光度值隨Na2SO3濃度的增大逐漸減小,溶液顏色也逐漸變淺,并且在Na2SO3濃度增大為3%時(shí)有沉淀生成,說明辣椒紅色素色度耐還原性較差。
表5 氧化劑、還原劑對(duì)色素色度的影響
2.6 標(biāo)準(zhǔn)曲線
表6 元素標(biāo)準(zhǔn)液線性回歸方程
2.7 元素含量
計(jì)算公式:C=AV/M,式中,C為辣椒中元素含量(mg/kg),A為樣品液元素質(zhì)量濃度(μg/mL),V為樣品液的體積(mL);M為稱取的樣品質(zhì)量(g)。
表7 辣椒中各元素含量測(cè)定結(jié)果 單位:(mg/kg)
(1)當(dāng)溫度升高到80℃~100℃時(shí),辣椒紅素吸光度下降程度明顯,顏色由橙紅色變?yōu)槌赛S色,說明在此溫度范圍內(nèi),色素不穩(wěn)定,易分解,耐高溫性差。在室外太陽(yáng)光下不穩(wěn)定,吸光值下降較快,顏色變化明顯,由橙紅色變?yōu)槿榘咨什灰吮┞对陉?yáng)光下保存。在pH值在3~11范圍內(nèi)時(shí),其吸光值無明顯變化,顏色變化也不大,pH值在1~2范圍內(nèi)極不穩(wěn)定,色素耐氧化性較好, 耐還原性較差。此研究結(jié)果對(duì)辣椒紅素的儲(chǔ)運(yùn)具有一定的參考價(jià)值。
(2)經(jīng)過對(duì)辣椒中微量元素的測(cè)定,可知辣椒是人體補(bǔ)鈣、硒等營(yíng)養(yǎng)元素的較好食材或調(diào)味品。
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10.3969/j.issn.1673-2006.2015.01.025
2014-09-11
宿州學(xué)院特色種植業(yè)苗種生產(chǎn)工程技術(shù)研究中心開放課題“辣椒土傳染病害防治技術(shù)研究”(2013YKF13);“何首烏多配體選育”(2013YKF11)。
陳紅玲(1972-),女,安徽宿州人,實(shí)驗(yàn)師,主要研究方向:植物病害防治。
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1673-2006(2015)01-0088-04