吳芳蘭，李倩，陳立華，李寧沙，徐丹，危德利

（湖南省長(zhǎng)沙市第一醫(yī)院檢驗(yàn)科，湖南 長(zhǎng)沙 410005）

急性腦梗死患者血漿抗凝血酶Ⅲ和P-選擇素水平檢測(cè)的臨床意義*

吳芳蘭，李倩，陳立華，李寧沙，徐丹，危德利

（湖南省長(zhǎng)沙市第一醫(yī)院檢驗(yàn)科，湖南 長(zhǎng)沙 410005）

目的探討抗凝血酶Ⅲ(ATⅢ)和P-選擇素在急性腦梗死診療中的臨床意義。方法選擇2013年7月-2014年1月收治的急性腦梗死患者40例，選擇同期健康體檢人員32例為對(duì)照組，分別于入院第1和7天檢測(cè)兩組人員的血漿ATⅢ和P-選擇素。結(jié)果治療前腦梗組患者血清ATⅢ[（72.7±18.9）%]、P-選擇素[（4226.35± 954.23）pg/ml]顯著高于對(duì)照組；治療3 d后，仍顯著高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。治療7 d后，ATⅢ和P-選擇素較治療前顯著降低，但仍高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論AT-Ⅲ和P-選擇素水平是一種較為敏感的急性腦梗死診斷和轉(zhuǎn)歸指標(biāo)。

抗凝血酶Ⅲ，P-選擇素，急性腦梗死

腦梗死又稱缺血性卒中，是發(fā)生在腦部血管因顱內(nèi)血液循環(huán)障礙造成腦組織損害的一種疾病[1]。腦梗死的病理生理過程存在凝血和纖溶的異常變化[2]。本研究擬檢測(cè)抗凝血酶Ⅲ（antithrombinⅢ，ATⅢ）和P-選擇素在腦梗死患者急性期和治療后體內(nèi)的變化及與健康對(duì)照者間的差異，探討其在腦梗死發(fā)病與轉(zhuǎn)歸中的作用。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象

選擇2013年7月-2014年1月在湖南省長(zhǎng)沙市第一醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科住院診斷為急性腦梗死患者40例。所有患者符合1996年第四屆全國(guó)腦血管病會(huì)議制定的診斷標(biāo)準(zhǔn)。通過CT或MRI證實(shí)為腦梗死，排除顱內(nèi)出血，均為急性腦梗死發(fā)病6～24 h內(nèi)入院治療。對(duì)患者的治療嚴(yán)格遵循《中國(guó)急性缺血性腦卒中診治指南（2010年版）》進(jìn)行。排除標(biāo)準(zhǔn)：①腦血管畸形、風(fēng)心病、房顫等心臟疾病，自身免疫性疾病，肝、腎疾病及惡性腫瘤患者；②發(fā)病前2周內(nèi)應(yīng)用過抗血小板藥物；③發(fā)病2周內(nèi)患感染性疾病或有明顯感染跡象者或外周血WBC＞10×106/L。選取同時(shí)期本院體檢中心的健康查體者32例作為對(duì)照組，排除腦血管病、血液病、糖尿病、高血壓、冠心病、肝腎疾病、腫瘤、炎癥等疾病，對(duì)照組未進(jìn)行任何臨床治療。本研究經(jīng)本院倫理委員會(huì)通過，研究對(duì)象知情同意并簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集和制備所有入選者空腹8 h后，早上抽取肘靜脈血4 ml置于含有0.2 ml 2%乙二胺四乙酸鉀的塑料試管中，3000 r/min離心10 min，分離血清，置入-20℃冰箱冷凍保存待測(cè)，血液標(biāo)本在采血后2 h內(nèi)完成分析。治療1周后兩組再次采血測(cè)樣，方法同前。

1.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器和試劑多功能酶標(biāo)儀（鄭州安圖生物工程有限公司），全自動(dòng)血凝儀（法國(guó)Stago公司），酶聯(lián)免疫分析法試劑盒（上海江萊生物技術(shù)有限公司）。

1.2.3 實(shí)驗(yàn)方法ATⅢ的測(cè)定采用發(fā)色底物法。將受檢血漿加入過量抗凝血酶，使ATⅢ與抗凝血酶形成1∶1的復(fù)合物，剩余的抗凝血酶作用于發(fā)色底物S-2238，使其釋放出顯色基團(tuán)對(duì)硝基苯胺，顯色深淺與剩余抗凝血酶呈正相關(guān)，與ATⅢ呈負(fù)相關(guān)。根據(jù)受檢者吸光度A值從標(biāo)準(zhǔn)曲線中計(jì)算出ATⅢ水平含量。ATⅢ正常參考值為80.00%～130.00%。P-選擇素的測(cè)定采用酶聯(lián)免疫分析法，嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行操作。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，用t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

治療前，腦梗組ATⅢ水平明顯低于對(duì)照組，而P-選擇素水平顯著高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。治療1周后，腦梗組ATⅢ水平仍低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；但較治療前顯著升高（P＜0.05）。同時(shí)腦梗組P-選擇素水平仍高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；但較治療前顯著降低（P＜0.05）。見附表。

附表 兩組ATⅢ和P-選擇素水平比較（±s）

附表 兩組ATⅢ和P-選擇素水平比較（±s）

注：1）與對(duì)照組比較，P＜0.05；2）與治療前腦梗組比較，P＜0.05

組別ATⅢ/%t值P值P-選擇素（pg/ml）t值P值治療前腦梗組72.7±18.91）對(duì)照組98.6±20.3716.58±129.26治療后腦梗組94.7±19.61）2）6.358 0.0004226.35±954.231）35.265 0.000 9.4870.000對(duì)照組99.8±20.1733.91±130.16 2.092 0.0431907.18±376.851）2）

3 討論

由于腦部血管血栓形成，腦部供血中斷，并且無充分側(cè)支循環(huán)代償供血，從而導(dǎo)致腦組織缺血、缺氧性壞死和腦軟化，臨床上出現(xiàn)的神經(jīng)系統(tǒng)癥狀群，即為腦梗死[3]?？鼓浮⒗w維蛋白原及血小板的共同作用，促使血栓形成[4]。

ATⅢ是血漿中重要的生理性抗凝血因子，正常血漿中的含量為0.4 mg/dl?？鼓涪髮?gòu)V譜絲氨酸蛋白酶抑制物，由425個(gè)氨基酸組成，分子量為58000D，在肝臟細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞和巨核細(xì)胞中合成，屬于α2球蛋白[5]。正常情況下，ATⅢ能抑制血液中70%～80%的抗凝血酶活力，在肝素的協(xié)同作用下可使激活的凝血因子Ⅹa、Ⅻa、Ⅸa等滅活[6]。

本研究結(jié)果表明，腦梗死患者血漿ATⅢ水平明顯減低。這是由于腦梗死患者自身存在多重危險(xiǎn)因素，當(dāng)血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷時(shí)，暴露出內(nèi)皮下的膠原，活化血小板及凝血因子Ⅻ，激活內(nèi)源性凝血系統(tǒng)，并釋放組織因子激活外源性凝血系統(tǒng)。同時(shí)血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷作用使血液處于高凝狀態(tài)，致血小板產(chǎn)生黏附和聚集效應(yīng)，促使血栓形成，抗凝物質(zhì)被消耗，ATⅢ水平顯著降低與急性腦梗死血液高凝狀態(tài)的形成密切相關(guān)。

血小板活化是血栓性疾病的一個(gè)重要病理、生理過程，在缺血性腦血管病的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用[7-8]。P-選擇素具有多種生物學(xué)功能，是一種重要的黏附分子，是目前所知反映血小板活化與釋放反應(yīng)最特異性的標(biāo)志物[9]。本研究結(jié)果顯示，健康體檢者與腦梗死患者的P-選擇素水平比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），這說明腦梗死患者存在血小板活化反應(yīng)。治療7 d后，P-選擇素較治療前顯著降低，且與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），說明隨著治療的進(jìn)行，血小板活化狀態(tài)已得到初步控制，但仍是血栓形成的高危人群。有學(xué)者在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，P-選擇素水平升高可增加大腦中動(dòng)脈線栓小鼠腦梗死的面積，使神經(jīng)功能缺損程度加重[10]，P-選擇素水平可作為判定急性腦梗死病情和療效的指標(biāo)[11]，與本研究結(jié)果一致。

總之，AT-Ⅲ和P-選擇素是一種較為敏感的急性腦梗死診斷和轉(zhuǎn)歸指標(biāo)。動(dòng)態(tài)觀察ATⅢ和P-選擇素水平有助于疾病的早期診斷及預(yù)后判斷。

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（童穎丹 編輯）

Clinical significance of serum antithrombinⅢand P-selectin in patients with acute cerebral infarction*

Fang-lan WU,Qian LI,Li-hua CHEN,Ning-sha LI,Dan XU,De-li WEI
(Department of Clinical Laboratory,the First Hospital of Changsha, Changsha,Hunan 410005,P.R.China)

【Objective】To detect the levels of serum antithrombin(AT)Ⅲand P-selectin in patients with cerebrovascular disease and discuss the change and clinical significance.【Methods】From July 2013 to January 2014,40 patients with acute cerebral infarction(ACI group)and 32 healthy people(control group) were selected.The concentrations of ATⅢand P-selectin were detected in both groups before and 7 days after treatment.【Results】The concentrations of ATⅢ[(72.7±18.9)%]and P-selectin[(4,226.35±954.23) pg/ml]in the ACI group were statistically higher than those of the control group before treatment and on the 3rd day after treatment(P＜0.05).The concentrations of ATⅢand P-selectin obviously decreased on the 7th day after treatment compare to those before treatment,but they were still higher than those of the control group,the differences were statistically significant(P＜0.05).【Conclusion】ATⅢand P-selectin may be sensitive markers for diagnosis and prognosis prediction of acute cerebral infarction.

antithrombinⅢ；P-selectin；acute cerebral infarction

R743.33

B

1005-8982（2015）29-0098-03

2015-02-26

湖南省科技計(jì)劃項(xiàng)目（No：2014FJ6050）