程立子，方小武，吳日然，霍駿業(yè)

(中山市博愛醫(yī)院生殖中心，廣東中山 528403)

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·論著·

精液指標與體外受精助孕后孕早期自發(fā)性流產的相關分析*

程立子，方小武，吳日然，霍駿業(yè)

(中山市博愛醫(yī)院生殖中心，廣東中山 528403)

摘要:目的探討男方精液指標與體外受精助孕患者孕早期自發(fā)性流產的相關性。方法回顧性分析該院接受體外受精助孕的夫妻251對，根據女方是否發(fā)生早期自發(fā)性流產分為研究組(98對)及對照組(153對)，分析2組中男方的精子DNA碎片率、精子核蛋白不成熟率、正常形態(tài)精子百分率等指標。結果研究組男方的精子DNA碎片率、正常形態(tài)精子百分率、精子濃度、精子活力、前向精子活力等與對照組比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；研究組男方的精子核蛋白不成熟率大于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；精子核蛋白不成熟率與早期自發(fā)性流產呈弱正相關(P<0.05)。結論精子成熟障礙與孕早期自發(fā)性流產相關，精子核蛋白不成熟率可用于評估體外受精助孕者孕早期自發(fā)性流產風險。

關鍵詞:精液指標；體外受精；自發(fā)性流產；相關性

孕早期自發(fā)性流產是指妊娠12周內自行終止或自發(fā)流產。早期流產常見的原因可能與胚胎染色體異常、孕婦內分泌異常、生殖器官畸形、生殖道感染、生殖道局部或全身免疫異常等有關，但具體機制尚未完全探明。過往研究多關注女性因素，對男性因素，尤其是男性非遺傳性因素與自發(fā)性流產關系的研究甚少。精液指標多應用于男性生育力的評估，對于男性精液因素是否可影響孕早期自發(fā)性流產尚存較大爭議。本研究通過分析在本院生殖中心接受體外受精(IVF)男方的精液指標，探討各指標與女性孕早期自發(fā)性流產的關系。

1資料與方法

1.1一般資料回顧性分析2014年1～12月在本院生殖中心進行IVF助孕的患者病歷資料，根據女方受孕后是否發(fā)生孕早期自發(fā)性流產分為2組，研究組為女方發(fā)生早期流產者，共98對夫妻，對照組為女方未發(fā)生早期流產者，共153對夫妻。其中研究組中女方年齡(32.47±5.00)歲；對照組中女方年齡(32.11±5.35)歲。2組女方一般資料比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。納入標準：接受IVF者，男女雙方染色體、性激素均正常，無明顯解剖異常和免疫因素異常，孕早期無疾病和服藥史。

1.2方法男方禁欲2～7 d，以手淫法采集精液于取精杯內，待完全液化后混勻，按表1中方法檢測各精液指標，操作嚴格按照試劑和儀器說明書進行。比較2組間男方精液指標的差異，分析男方年齡、各項精子指標與孕早期自發(fā)性流產的相關性，對相關的指標進一步作受試者工作特征(ROC)曲線分析，分析其對早期自發(fā)性流產的診斷價值。

表1　　精液指標檢測方法及試劑、儀器廠家

2結果

2.12組間男方年齡及精液指標比較除精子核蛋白不成熟率外，2組間男方年齡及其他精液指標比較，差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表2。

2.2男方年齡及各精液指標與自發(fā)性流產的相關性精子核蛋白不成熟率與早期自發(fā)性流產呈弱相關，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，其余各指標與自發(fā)性流產間無顯著相關(P>0.05)。見表3。

±s)

*:P<0.05,與對照組比較。

表3　　男方年齡及各精液指標與自發(fā)性流產的相關性

2.3精子核蛋白不成熟率的ROC曲線分析精子核蛋白不成熟率與早期自發(fā)性流產的ROC曲線分析結果顯示，當精子核蛋白不成熟率大于35.5%時，預測發(fā)生早期自發(fā)性流產的靈敏度為40.8%，特異度為81.0%，ROC曲線下面積(AUC)為0.648。

3討論

導致孕早期自發(fā)性流產的原因有很多，包括胚胎染色體異常、孕婦內分泌紊亂、感染、免疫異常、環(huán)境因素等，但仍有50%以上的病例原因不明[1]。過往針對流產原因的分析多集中在女性方面，對男性因素與自發(fā)性流產關系的研究較少見，且多集中于探討父系染色體異常與流產的關系。精子功能及形態(tài)檢查，則多應用于對男性不育及胚胎質量評價上[2-3]，對于男性精液因素是否與孕早期自發(fā)性流產相關尚存較大爭議。有學者發(fā)現(xiàn)流產組精子濃度、精子活力、正常形態(tài)精子百分率明顯低于對照組[4-5]；有的研究者則認為精子DNA損傷是胚胎早期流產或復發(fā)性流產的重要風險因素[6-7]。也有研究者持有不同的觀點，如程錦娥等[8]認為，精子核蛋白不成熟率與孕早期自發(fā)性流產有關，其他精液指標均無明顯相關。男性精液因素是否對接受IVF助孕者孕早期自發(fā)性流產有影響，目前鮮有報道。

本研究顯示，研究組的男方年齡、精子DNA碎片率、精子濃度、精子活力、前向精子活力等指標與對照組比較，差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，但2組間精子核蛋白不成熟率比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，精子核蛋白不成熟率與孕早期自發(fā)性流產呈弱正相關(P<0.05)，這與劉瑜等[9]的研究基本一致。

精子DNA碎片率常被認為與早期自發(fā)性流產密切相關，但在本研究中，精子DNA碎片率與自發(fā)性流產不存在相關性，其可能原因為：(1)在一定范圍內，卵母細胞和受精卵可對受損的精子DNA進行修復[10]；(2)精子DNA碎片率主要影響受精能力、胚胎分裂功能，而對受精后胚胎生長、妊娠等影響較小[11]；(3)精子之間存在競爭與優(yōu)勝劣汰過程[12]，最后成功受精者往往是質量較好的精子。

在精子成熟過程中，精子核內組蛋白被富含魚精蛋白逐漸取代[13]，成熟精子精核內主要成分為魚精蛋白，魚精蛋白可中和DNA鏈上負電荷，使精子核染色質緊密結合而高度壓縮，形成特殊雙環(huán)結構而保護精子DNA免受破壞；精子成熟障礙時，蛋白轉換過程受阻，精核內蛋白成分主要為組蛋白，其對精子DNA無保護作用，精子DNA易遭到破壞，導致胚胎異常發(fā)育而流產[14]。本研究中顯示，精子核蛋白成熟障礙為導致IVF受孕后自發(fā)性流產的重要危險因素，AUC為0.648，其臨界值為35.5%，明顯高于方小武等[15]以流產者男性配偶及健康男性為研究對象得出的27%的結論，這可能是由于兩項研究中研究對象不同所致，本文所選的研究對象為接受IVF助孕者，精子經過優(yōu)選處理，精子優(yōu)選過程有助于降低精子核蛋白不成熟率，從而減少流產的風險。

綜上所述，精子成熟障礙與孕早期自發(fā)性流產密切相關，精子核蛋白不成熟率可用于IVF助孕者發(fā)生早期自發(fā)性流產風險評估。對于接受輔助生殖助孕者，應先通過治療或適宜的精子優(yōu)選處理來降低精子核蛋白不成熟率，以降低早期自發(fā)性流產風險。

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Analysis of correlation between sperm indicators and early spontaneous abortion after in vitro fertilization*

ChengLizi,FangXiaowu,WuRiran,HuoJunye

(ReproductiveMedicalCenter,BoaiHospital,Zhongshan,Guangdong528403,China)

Abstract:ObjectiveTo explore the correlation between the sperm indicators and early spontaneous abortion after in vitro fertilization(IVF).Methods251 couples receiving IVF,were retrospectively analyzed and divided into the research group (98 couples) and control group (153 couples) according to whether spontaneous abortion occurring.The male′s indicators of sperm DNA fragmentation index (DFI),sperm nucleoprotein immaturity rate,percentage of normally morphologic sperms,etc.in the two groups were analyzed.ResultsDFI,percentage of normally morphologic sperms,sperm concentration,motility and forward motile sperm had no statistical differences between the research group and the control group(P>0.05);while the sperm nucleoprotein immaturity rate of the research group was significantly higher than that of control group,the difference was statistically significant (P<0.05);the sperm nucleoprotein immaturity rate had weak correlation with spontaneous abortion in early pregnancy (P<0.05).ConclusionThe sperm nucleoprotein dysmaturity is correlated with the spontaneous abortion in early pregnancy.The sperm nucleoprotein immaturity rate could be used to evaluate the risk of spontaneous abortion in early pregnancy after IVF.

Key words:semen parameters;in vitro fertilization;spontaneous abortion;correlation

(收稿日期：2015-09-25)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.03.014

文獻標識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)03-0324-03

作者簡介：程立子，女，主管技師，從事輔助生殖及生殖醫(yī)學實驗研究。

*基金項目：2013年中山市科技局醫(yī)學科研基金項目(20132A027)。