孟　欣，張樹峰，吳金洋，張　穎，宋素英△

（1.華北理工大學中醫(yī)學院，河北唐山 063000；2.河北省中藥研究與開發(fā)重點實驗室/承德醫(yī)學院中藥研究所）

中醫(yī)中藥

中藥生殖毒性的研究概況

孟欣1，張樹峰2，吳金洋1，張穎2，宋素英1△

（1.華北理工大學中醫(yī)學院，河北唐山 063000；2.河北省中藥研究與開發(fā)重點實驗室/承德醫(yī)學院中藥研究所）

中藥；生殖毒性；研究概況

中藥在中醫(yī)臨床實踐已有數(shù)千年的歷史，傳統(tǒng)上認為中藥作用相對溫和，且按照理法方藥的原則進行配伍，不良反應較少。但隨著中藥現(xiàn)代研究的進一步深入，中藥毒性逐漸被實驗所發(fā)現(xiàn)，而一些中藥在體內(nèi)外的動物實驗也顯示出對生殖功能有一定的損害。隨著現(xiàn)代藥學的發(fā)展，藥物的用法用量及配伍發(fā)生變化，中藥新藥的安全評價已經(jīng)把生殖毒性列入其中。本研究對近年來有關(guān)中藥生殖毒性的研究進行整理歸納，并重點從中藥對兩性生殖毒性損害及胚胎毒性等方面進行論述。

1　對生殖系統(tǒng)的損傷

1.1對雌性生殖系統(tǒng)的損傷

1.1.1虎眼萬年青：虎眼萬年青含有多種皂苷，在治療肝病及免疫系統(tǒng)疾病方面有重要功效。Tamura等［1］用虎眼萬年青分離得到新型甾體皂苷OSW-1，在發(fā)情前期每日給予雌鼠皮下注射9μg/kg后，大鼠的雌二醇濃度顯著降低，并且發(fā)情間期延長；大鼠的促黃體生成素濃度在給藥4天后也顯著降低。表明虎眼萬年青擾亂了大鼠的動情周期并且抑制其生殖功能。

1.1.2土荊皮：土荊皮在醫(yī)治疥癬、神經(jīng)性皮炎、濕疹方面療效顯著。黃江明［2］用5μg/ml的土荊皮酸培養(yǎng)液測試卵子，僅對除去卵丘的卵子有影響；用大于50μg/ml 的土荊皮酸培養(yǎng)液測試卵子，不管卵丘保存與否，卵子的受精率都明顯下降；在雌鼠交配前4天每日灌胃20mg/kg土荊皮酸，具有一定的抗精子效果。

1.2對雄性生殖系統(tǒng)的損傷

1.2.1合歡皮：合歡皮是豆科植物合歡的干燥樹皮，具有安神解郁、活血消腫、生肌續(xù)骨的功效。Gupta等［3］用其皂苷提取物木脂素苷類對雄性Wistar大鼠每日灌胃50mg/ kg，持續(xù)60天，導致大鼠睪丸、附睪、精囊和前列腺指數(shù)均顯著下降；同時精子產(chǎn)生減少，睪丸間質(zhì)細胞異常，生育率顯著降低。初步表明合歡皮皂苷通過損傷睪丸細胞對雄性大鼠產(chǎn)生生殖毒性。

1.2.2昆明山海棠：昆明山海棠為衛(wèi)矛科植物昆明山海棠的根。昆明山海棠的生殖毒性在臨床已得到證實，多種酶被研究并作為其生殖毒性的評價指標［4］。黃思行等［5］給SD大鼠灌胃昆明山海棠，分三個劑量（5.0，10.0，20.0 ）g/ kg持續(xù)3個月，均可引起大鼠睪丸明顯萎縮，表現(xiàn)為精曲小管內(nèi)生精細胞損傷和破壞，提示昆明山海棠能明顯降低大鼠的生精功能。

1.3對雌雄生殖系統(tǒng)均有損傷

1.3.1雷公藤：雷公藤在治療免疫性疾病、慢性腎炎、糖尿病腎病等方面療效顯著［6］。但是，雷公藤較大的生殖毒性副作用卻妨礙了其在臨床上的使用。戴文平等［7］在精子成熟的過程中將DNA與精核蛋白結(jié)合，形成了特殊結(jié)構(gòu)的精子核內(nèi)染色質(zhì)。精核蛋白的生物合成可能受雷公藤甲素抑制，同時精核蛋白轉(zhuǎn)型受阻，從而影響精子成熟，生育力喪失。顧江紅等［8］給予12周齡雌性大鼠連續(xù)10周灌胃12mg/kg/d雷公藤，造成大鼠子宮和卵巢的重量均顯著降低，子宮內(nèi)膜、肌層厚度顯著變薄，卵泡總數(shù)和黃體計數(shù)明顯減少。

1.3.2豆科植物：豆科植物主要含有大豆皂苷。大豆皂苷具有提高免疫能力、預防腫瘤及預防糖尿病等功能。Cho等［9］將大豆皂苷以一定的比例混合于飼料中喂養(yǎng)雌雄大鼠13周，觀察發(fā)現(xiàn)雄鼠的前列腺腹側(cè)上皮萎縮，并伴隨有細胞液化及細胞分泌作用下降；雌鼠的陰道上皮黏液化并呈萎縮狀態(tài)，卵巢退化，卵泡閉鎖。胡華剛等［10］進一步的研究證明，大豆皂苷通過類似性激素樣作用使大鼠生殖功能受損。

1.3.3大黃：蒽醌類為大黃發(fā)揮藥效的重要成分之一［11］。胡曉丞等［12］連續(xù)30天給3組昆明小鼠灌胃大黃水提物（0.5、1、2 g/kg），大、中、小劑量組小鼠生精小管基膜均出現(xiàn)斷裂，中劑量組小鼠間質(zhì)細胞部分消失，大劑量組小鼠間質(zhì)細胞完全消失，生精細胞部分消失。睪丸有明顯毒性變化，機制在于其能促使間質(zhì)細胞凋亡，影響睪酮合成，減少精子形成，從而對機體產(chǎn)生生殖毒性，損傷程度有劑量依賴性。盧寧［13-14］用大黃水提取物2g/kg，分別連續(xù)灌胃雌性大鼠30、40、50天，均可致雌性大鼠卵巢和子宮重量減輕，中、大卵泡數(shù)和黃體數(shù)明顯減少，血清E2濃度下降，LH和FSH濃度上升，并隨給藥時間的延長、給藥劑量的增加，E2水平逐漸降低，LH和FSH水平逐漸升高。結(jié)果顯示，長時間服用大黃可導致雌性大鼠生殖功能和性激素水平的異常，且有劑量及時間依賴性。

1.3.4僵蠶：僵蠶為傳統(tǒng)的動物藥，功效為祛風解痙，化痰散結(jié)［15］。毛曉健等［16］在一項藥理研究中，每日以0.5、1g/ml僵蠶藥液灌胃小鼠，結(jié)果顯示僵蠶能夠顯著降低雌性小鼠卵巢、子宮臟器指數(shù)并增加了不孕率；顯著增加雄性小鼠睪丸、貯精囊的臟器指數(shù)；使毛細血管的開放數(shù)增多，微血管直徑擴大；凝血時間增長。高劑量組的作用更為明顯。

2　對胚胎的毒性

2.1天花粉 天花粉是栝樓的干燥根，含有蛋白質(zhì)、多糖等成分。天花粉蛋白應用廣泛，在臨床上多用于引產(chǎn)，治療婦科疾病，如異位妊娠、葡萄胎、絨癌等。趙云利等［17］在實驗中給妊娠11-12天的小鼠單次腹腔注射天花粉蛋白0.5mg/kg，引產(chǎn)率可達88%。妊娠母鼠子宮內(nèi)的前列腺素E2和F2在天花粉蛋白的刺激下升高，促進子宮收縮；在天花粉蛋白的作用下垂體后葉素敏感性升高，增強動物子宮的收縮力，使子宮平滑肌興奮而導致流產(chǎn)。

2.2牡丹皮 袁金偉等［18］給妊娠6d的小鼠單次腹腔注射丹皮酚23mg，第3天解剖檢查，流產(chǎn)率為88.76%，受孕率為11.74%。病理組織學觀察發(fā)現(xiàn)，卵巢內(nèi)的黃體變小，提示牡丹酚會使Ⅱ級黃體退變，使胚胎失去營養(yǎng)保證。

2.3金銀花 金銀花為忍冬的花蕾，為常用中藥，有清熱解毒、抗炎、補虛療風功效。龐瑞［19］在一項實驗研究中，制備金銀花提取物，給孕鼠單次腹腔注射0.6g/kg，終止妊娠的效果顯著，任一期妊娠都能終止。

2.4藜蘆 臨床多用于治療高血壓、中風、癲癇等［20-21］。主要成分為藜蘆甾體生物堿，在降血壓、抗腫瘤、抗血栓等方面有良好的應用前景。彭克美等［22］用0.5g/kg的藜蘆鼻飼妊娠母牛，染毒后表現(xiàn)出不同程度的中毒反應。妊娠期15-16天中毒，易流產(chǎn)；17-18天中毒，胚胎極易畸形；19 天后中毒，易出現(xiàn)死胎。連續(xù)2周，藜蘆堿1.5g/kg灌胃孕小鼠，對胚胎有致畸作用，還可引起孕期高血糖，抑制胚胎對葡萄糖的利用。胚胎細胞對葡萄糖利用降低十分敏感，可通過導致胚胎能量的有效利用率降低而表現(xiàn)出生殖毒性［23］。

2.5千里光 千里光具有清熱解毒、殺蟲明目的功效，應用廣泛。千柏鼻炎片為千里光的代表藥物之一。每日給孕10-21天的大鼠腹腔注射100mg/kg的野百合堿或40 mg/kg倒千里光堿，可導致死胎［24-25］。

3　結(jié)語與展望

動物生殖是一個的復雜過程，中藥可以從多方面影響生殖，如精子、卵子的發(fā)生，受精，受精卵著床，胚胎發(fā)育，分娩，泌乳等。目前，中藥生殖毒性研究仍然不夠廣泛和深入，尤其是致毒機理和成分不夠明確。除了目前常規(guī)的動物實驗外，還需要進行體外培養(yǎng)實驗研究，如胚胎培養(yǎng)、組織培養(yǎng)、細胞培養(yǎng)等可能是未來檢測中藥生殖毒性快速、簡便的方法之一，也必將推動中藥生殖毒性研究的深化發(fā)展。因人類和動物存在生理等方面的差異，藥物對人體的毒性仍難以做出準確評定，在確定藥物的安全性前仍需要進一步的研究和臨床觀察。

［1］王志標，王偉，孔建強，等.虎眼萬年青皂苷OSW-1構(gòu)效關(guān)系研究進展［J］.中國醫(yī)藥生物技術(shù)，2013，8（5）：368-375.

［2］黃江明.硫酸亞鐵銨光度法測定土槿皮浸取液中鞣質(zhì)的含量［J］.廣東醫(yī)藥學院學報，1989，5（1）：33-35.

［3］Gupta RS，Chaudhary R，Yadav RK，et a1. Effect of saponins of Albizia lebbeck（L.） Benth bark on the reproductive system of male albino rats［J］.J Ethnopharmacol，2005，96（1-2）:31-36.

［4］林本成，襲著革.環(huán)境化學物對雄（男）性生殖損傷的評價指標及檢測技術(shù)［J］.生態(tài)毒理學報，2007，2（4）：38l-389.

［5］黃思行，劉劍毅，黃文濤，等.昆明山海棠片所致大鼠睪丸損傷的病理學研究［J］.生殖與避孕，2011，31（8）：514-519.

［6］Krakauer T， Chen X， Howard OM，et al. Triptolide attenuares endotoxin and staphylococcal exotoxin-induced T-cell proliferation and production of cytokines and chemokines［J］. Immunopharmacol Immunotoxicol， 2005，27（1）:53-66.

［7］戴文平，劉平，韓玉華，等.雷公藤單體T4、T7、T15及雷公藤內(nèi)酯醇對大鼠精子核蛋白組型的影響［J］.中國醫(yī)學科學院學報，1994，16（1）：20-22.

［8］顧江紅，金愛紅，龔智勇，等.口服避孕藥拮抗雷公藤多甙致SD大鼠性腺毒性作用的研究［J］.國際生殖健康/計劃生育雜志，2014，33（1）：11-13，77.

［9］Cho YM， Imai T， lto Y， t al. A 13-week subchronic toxicity study of dietary administered saponin-rich and isoflavones-containing soybean extract in F344 rats［J］.Food Chem Toxicol， 2009，47（8）:2150-2156.

［10］胡華剛，胡巧玲，劉慶山，等.天然藥物中皂苷類成分對雄性生殖的影響［J］.生殖與避孕，2010，30（8）：560-566.

［11］張村，李麗，肖永慶，等.大黃不同飲片中2個蒽醌苷類成分的比較研究［J］.中國中藥雜志，2009，34（22）：2872-2875.

［12］胡曉丞，李亞洲，高沖，等.大黃水提物對雄性小鼠睪丸影響的實驗研究［J］.時珍國醫(yī)國藥，2013，24（5）：1132-1134.

［13］盧寧，張樹峰，佟繼銘.大黃水提物對成年大鼠子宮及卵巢的影響［J］中國實驗方劑學雜志，2013，19（21）：258-261.

［14］盧寧，佟繼銘，張樹峰.大黃水提物對雌性大鼠血清E2、LH和FSH水平的影響［J］.承德醫(yī)學院學報，2013，30（5）：374-376.

［15］華應熊，楊海琴，楊菁華.中華本草（精選本） ［M］.上海：上?？茖W技術(shù)出版社，1997.904.

［16］毛曉健，毛小平，肖慶慈，等.僵蠶抗生育的藥理研究［J］.云南中醫(yī)學院學報，2002，25（3）：26-28.

［17］趙云利，戎隆富，戴敏，等.聚乙二醇化天花粉蛋白抗生育活性及其過敏反應試驗［J］.生殖與避孕，2005，25（10）：588-592.

［18］袁金偉，屈凌波，白云亮，等.丹皮酚結(jié)構(gòu)改造研究進展［J］.河南工業(yè)大學學報（自然科學版），2011，32（3）：88-94.

［19］龐瑞.金銀花有效成分的藥理學研究進展［J］.陜西中醫(yī)學院學報，2011，34（3）：77-78.

［20］徐暾海，徐雅紅.藜蘆屬植物化學成分和藥理作用［J］.國外醫(yī)藥植物藥分冊，2002，17（5）：185-189.

［21］徐國鈞，徐珞珊，王崢濤.常用中藥材品種整理和質(zhì)量研究（第4冊）［M］.福州：福建科學技術(shù)出版社，2001.121-178.

［22］彭克美，馮悅平，程圍富.三江地區(qū)藜蘆和狼毒對牛胚胎發(fā)育的影響［J］.中國農(nóng)業(yè)科學，2002，35（8）：1002-1006.

［23］趙瑜，陸國才，張衛(wèi)東，等.藜蘆生物堿藥理和毒理學研究進展［J］.中藥新藥與臨床藥理，2008，19（3）：240-242.

［24］Yan J，Xia Q，Chou MW，et al.Metabolic activation of retronecine and retmnecine N-oxide-formation of DHP-derived DNA adducts［J］.Toxicol Ind Health，2008， 24（3）:181-188.

［25］韓佳寅，梁愛華，高雙榮.含吡咯里西啶生物堿植物的特殊毒性及致毒機制研究進展［J］.中國中藥雜志，2011，5（36）：1397-1401.

R285.5

A

1004-6879（2016）01-035-03

2015-05-08）