劉麗穎

哈藥集團制藥六廠 150000

高效液相色譜法測定小兒氨酚黃那敏顆粒中馬來酸氯苯那敏含量

劉麗穎

哈藥集團制藥六廠 150000

目的：通過高效液相色譜法對小兒氨酚黃那敏顆粒中馬來酸氯苯那敏的含量進行精準測定。方法：在（200mm×4.6nm，5μm）標準色譜柱條件下，以乙腈-0.5%十二烷基硫酸鈉溶液-磷酸作為流動相，其比例為 60:40:1，流速為 1.0mL/min，檢測波長為210nm。結(jié)果：實驗研究顯示，馬來酸氯苯那敏進樣質(zhì)量濃度現(xiàn)行范圍在6.37-42.50μg/mL之間，其測定條件為r=0.9995，n=5。此種實驗條件下的RSD值為1.19%（n=9)，測定可知平均回收率為100.18%。結(jié)論：在小兒氨酚黃那敏顆粒中，馬來酸氯苯那敏的含量測定過程中，以高效液相色譜法對其進行精準測定，測定方式簡便、高效，且具有良好的重現(xiàn)性，值得加以推廣應用。

小兒氨酚黃那敏；馬來酸氯苯那敏；含量測定；高效液相色譜法

小兒氨酚黃那敏顆粒是當前醫(yī)藥領域內(nèi)比較常見的復方制劑，以對乙酰氨基酚、馬來酸氯苯那敏以及人工牛黃等作為主要組分，在小兒感冒引起的頭痛及發(fā)熱等方面具有良好的應用效果。就小兒氨酚黃那敏中馬來酸氯苯那敏含量測定情況來看，當前國家藥品標準中僅僅是對乙酰氨基酚進行含量測定，而在馬來酸氯苯那敏含量測定上存在一定不足。為準確把握馬來酸氯苯那敏在小兒氨酚黃那敏中的含量，保證臨床用藥安全性，本文以高效液相色譜法對馬來酸氯苯那敏進行含量測定，并開展相關分析，從而對小兒氨酚黃那敏藥品質(zhì)量進行科學化控制。

1 儀器與試藥

在本次含量測定實驗研究中，以德國生產(chǎn)的KNAUER型高效液相色譜儀作為主要測定儀器，并選用 LAC-214電子天平對藥品進行稱量。就本次實驗研究中的藥品情況來看，乙腈為色譜純，實驗用水為注射用水，磷酸及十二烷基硫酸鈉為分析純。選取中國藥品生物制品檢定所的馬來酸氯苯那敏作為對照品，以促進含量測定實驗操作的順利進行。選用黃石飛云制藥有限公司生產(chǎn)的小兒氨酚黃那敏顆粒進行試驗。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

在本次實驗研究中，在標準色譜柱條件下，其規(guī)格為（200mm ×4.6nm，5μm），以乙腈-0.5%十二烷基硫酸鈉溶液-磷酸作為流動相，其比例為60:40:1，流速為1.0mL/min，實際進樣量為20 μL，檢測波長為 210nm。依照氯苯那敏峰對理論板數(shù)進行計算后，其實際結(jié)果為3000或在3000以上。

2.2 溶液制備

在本次實驗研究中，溶液制備質(zhì)量在一定程度上影響著含量測定的精準性和有效性。實驗研究人員稱取適量馬來酸氯苯那敏對照品，待精密稱定后，在其中加入適量流動相進行稀釋處理，得到對照品溶液，其質(zhì)量濃度為10μg/mL。在此基礎上，取出小兒氨酚黃那敏可力量10袋，以電子天平對藥品進行質(zhì)量稱定后，將其混合均勻并研磨成細粉末，在精密稱取適量后，將其置于標準規(guī)格的容量瓶內(nèi)，加入 40mL流動相，并在 250W 功率以及33kHz頻率下對其進行規(guī)范的超聲處理，待處理半小時后，以流動相對處理后的藥品進行稀釋，并緩慢搖勻，待濾過后，去除續(xù)濾液作為供試品溶液。

2.3 方法學考察

在本次實驗研究中，分別以專屬性試驗、線性關系考察、精密度試驗以及穩(wěn)定性試驗等方式對供試品溶液進行考察，以下進行具體分析：

一是專屬性試驗。在這一環(huán)節(jié)，取適量馬來酸氯苯那敏的陰性對照品，基于供試品溶液制備方式制備出相關的陰性對照品溶液，并依照色譜條件對馬來酸氯苯那敏進行進樣測定，實驗結(jié)果顯示陰性對照品溶液在馬來酸氯苯那敏峰位置處無明顯的吸收峰，該色譜條件下馬來酸氯苯那敏吸收情況色譜圖如圖1所示。

圖1 高效液相色譜圖

二是線性關系考察。在這一過程中，精密稱取馬來酸氯苯那敏對照品適量，并置于標準規(guī)格的容量瓶內(nèi)，加入流動相稀釋至刻度，搖勻后分五次精密吸取不同量，進而分別加入流動相稀釋至刻度，搖勻后，在進樣量為20μL的條件下，對其峰面積進行準確測定，并以峰面積和質(zhì)量濃度作為基本要素建立線性回歸，得出標準的回歸方程。實驗結(jié)果顯示，當質(zhì)量濃度在6.37-42.50 μg/mL之間時，馬來酸氯苯那敏與峰面積之間呈現(xiàn)良好的線性相關關系。

三是精密度試驗。取同一對照品溶液，連續(xù)進樣6次，測定氯苯那敏峰面積。結(jié)果的RSD為0.32%(n =6)，表明儀器精密度良好。

四是穩(wěn)定性試驗。取同一供試品溶液，在室溫下放置0，2，4，8，12，24 h后分別進樣，測定氯苯那敏的峰面積。結(jié)果的RSD為0.31%(n=6)，表明供試品溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

五是重復性試驗。取同一批(批號為20120801)樣品，依法測定6次。結(jié)果馬來酸氯苯那敏含量為標示量的98.01%，RSD為0.33%(n=6)，表明方法重復性良好。

六是加樣回收試驗。精密稱取已測定含量的樣品 9份(批號為20120801，含量161.2μg/g)，精密加入對照品溶液2，3，4mL(質(zhì)量濃度為152.92μg/mL)，按供試品溶液制備方法進行處理，測定含量，并計算回收率。結(jié)果見表1。

表1 馬來酸氯苯那敏加樣回收試驗結(jié)果(n=9)

2.4 樣品含量測定

取樣品3批，按擬訂方法測定樣品含量。結(jié)果批號 20120801，20120802，20120803的3批樣品中，馬來酸氯苯那敏的含量(標示量)分別為97.99%，97.82%，97.48%，RSd分別為0.68%，0.75%，0.72%。

3 討論

采用乙腈-0．5%十二烷基硫酸鈉溶液-磷酸(60∶40∶0.1)流動相體系所得色譜圖，馬來酸氯苯那敏的峰形優(yōu)，分離效果好，保留時間適中。供試品溶液和對照品溶液中，馬來酸氯苯那敏呈解離狀態(tài)存在，故在色譜圖中出現(xiàn)有馬來酸峰。因此，在馬來酸氯苯那敏含量測定時以氯苯那敏峰面積來計算。在預試驗中，分別采用了加熱回流和超聲波提取的方法，以正交試驗的方法對小兒氨酚黃那敏顆粒中馬來酸氯苯那敏含量進行測定。結(jié)果加熱回流和超聲波提取在含量上基本一致，為簡化操作，選擇超聲波提取，根據(jù)正交試驗結(jié)果確定了小兒氨酚黃那敏顆粒供試品溶液的制備方法。

馬來酸氯苯那敏制劑有片劑、注射劑，又名撲爾敏，抗組胺類藥，本品通過對H1受體的拮抗起到抗過敏作用。主要用于鼻炎、皮膚黏膜過敏及緩解流淚、打噴嚏、流涕等感冒癥狀。在含量測定方面，取本品約0.15g，精密稱定，加冰醋酸10ml溶解后，加結(jié)晶紫指示液1滴，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，至溶液顯藍綠色，并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正。每1ml的高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當于 19.54mg的 C16H19ClN2.C4H4O4。本品除有較強的競爭性阻斷變態(tài)反應靶細胞上組胺H1受體的作用，通過對H1受體的拮抗起到抗過敏作用外，還具有抗M膽堿受體作用，故服藥后可出現(xiàn)口干、便秘、痰液變稠、鼻黏膜干燥等癥狀。另外該藥還具有一定的抑制中樞的作用，因此可出現(xiàn)服藥后的困倦不良反應。

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1672-5018（2016）09-005-02