李楠，趙陽(yáng)，魏菲，高晨光，曹波，高穎，陳虹

（1.天津醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，天津市臨床藥物關(guān)鍵技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，天津300070；2.天津中醫(yī)藥大學(xué)研究生院，天津300193；3.中國(guó)人民武裝警察部隊(duì)后勤學(xué)院生藥與藥劑學(xué)教研室，天津300309）

論著

鬼臼毒素脲類(lèi)衍生物的合成和體外抗癌活性的研究

李楠1，3，趙陽(yáng)1,3，魏菲2，高晨光3，曹波3，高穎3，陳虹1,3

（1.天津醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，天津市臨床藥物關(guān)鍵技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，天津300070；2.天津中醫(yī)藥大學(xué)研究生院，天津300193；3.中國(guó)人民武裝警察部隊(duì)后勤學(xué)院生藥與藥劑學(xué)教研室，天津300309）

目的：為了得到抗癌活性更高的抗腫瘤藥物，設(shè)計(jì)、合成新型脲類(lèi)鬼臼毒素衍生物。方法：以鬼臼毒素或4’-去甲基鬼臼毒素為起始原料經(jīng)N，N’-羰基二咪唑（CDI）活化其C-4位氨基，并與仲胺類(lèi)化合物進(jìn)行縮合反應(yīng)，得到鬼臼毒素脲類(lèi)衍生物，經(jīng)氫譜和高分辨質(zhì)譜對(duì)其進(jìn)行結(jié)構(gòu)表征。采用噻唑藍(lán)（MTT）法測(cè)試目標(biāo)化合物對(duì)人白血?。↘562）和人宮頸癌（Hela）細(xì)胞的體外抗腫瘤活性。結(jié)果：合成8個(gè)新的目標(biāo)化合物，其中化合物6a增殖抑制活性較強(qiáng)。結(jié)論：在鬼臼毒素C-4位引入哌嗪環(huán)脲類(lèi)結(jié)構(gòu)可提高其體外抗腫瘤活性。

鬼臼毒素；脲；N,N’-羰基二咪唑；抗腫瘤活性

鬼臼毒素存在于小檗科（Berberidaceae）多年生草本類(lèi)群鬼臼亞科（Podophylloideae）、山荷葉屬（Diphylleia Michx）、八角蓮屬（Dysosma Woodson）、足葉草屬（Podophyllum L.）和桃兒七屬（Sinopodophyllum Ying）植物的根和莖中[1]。鬼臼毒素的抗腫瘤作用得到廣泛關(guān)注，研究者對(duì)鬼臼毒素進(jìn)行結(jié)構(gòu)改造并研制出依托泊苷和替尼泊苷等臨床一線(xiàn)抗腫瘤藥物，其它衍生物如NK-611、GL331等也進(jìn)入藥物臨床前研究[2]。鬼臼毒素類(lèi)衍生物抗腫瘤作用機(jī)制分為兩種：一是抑制微管蛋白的組裝并妨礙中期相細(xì)胞分裂，二是通過(guò)抑制拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ抑制癌癥細(xì)胞DNA復(fù)制[3-4]。臨床中依托泊苷和替尼泊苷等鬼臼毒素衍生物用于治療睪丸癌、小細(xì)胞肺癌和白血病等腫瘤疾病[5]。雖然已合成鬼臼毒素類(lèi)衍生物具有一定的抗腫瘤活性，卻存在骨髓抑制、胃腸道反應(yīng)、水溶性差等問(wèn)題[6]。本文在對(duì)鬼臼毒素類(lèi)衍生物活性構(gòu)效關(guān)系研究的基礎(chǔ)上，結(jié)合文獻(xiàn)中對(duì)鬼臼毒素的C-4位改造的抗癌活性較好的報(bào)道[7-10]，運(yùn)用藥物拼合原理，將結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、水溶性好的脲類(lèi)結(jié)構(gòu)與鬼臼毒素結(jié)合，設(shè)計(jì)合成了8個(gè)衍生物，對(duì)其抗腫瘤作用進(jìn)行初步探討。

1 材料與方法

1.1 儀器和試劑 XT顯微熔點(diǎn)儀；高分辨質(zhì)譜儀：maXis ESI-Q-TOF (Bruker Daltonics)；核磁共振儀: BrukerAdvance2B/400M；酶標(biāo)儀：美國(guó)，BIORAD550；98%純度的鬼臼毒素購(gòu)自上海金和生物技術(shù)有限公司；CDI和所用仲胺均從百靈威科技有限公司訂購(gòu)；所用化學(xué)合成溶劑均為市售的分析純或化學(xué)純。VP-16:江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司，產(chǎn)品批號(hào)：09090731；RPMI1640培養(yǎng)基（Gibco公司產(chǎn)品）；MTT、胰蛋白酶（均為Sigma公司產(chǎn)品）；細(xì)胞株：人宮頸癌細(xì)胞Hela由中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院協(xié)和醫(yī)科大學(xué)藥物研究所藥理室陳曉光教授組傳代保種。人慢性髓性白血病急變期細(xì)胞K562購(gòu)于中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院血液學(xué)研究所。

1.2 合成方法

1.2.1 合成路線(xiàn) 見(jiàn)圖1。

圖1 化合物5a-5g，6a的合成路線(xiàn)Fig 1 Schematic route of 5a-5g,6a compounds

1.2.2 中間體化合物3的合成 將鬼臼毒素（414 mg，1 mmol）或4’-去甲基鬼臼毒素（400 mg，1 mmol）溶于20 mL無(wú)水二氯甲烷中，小心加入NaN3（260 mg，4 mmol）攪拌使其溶解，冰浴下將1 mL CF3COOH緩慢滴加到反應(yīng)液中，冰浴下反應(yīng)1 h，常溫反應(yīng)4 h。用NaHCO3調(diào)節(jié)pH為中性，分出有機(jī)層，無(wú)水Na2SO4干燥，減壓蒸干，溶于10 mL乙酸乙酯中，加入10%Pd/C(100 mg)，HCOONH4(252 mg，4 mmol)，加熱回流攪拌5 h，用漏斗抽濾，取濾液并用飽和氯化鈉水溶液洗3遍，減壓蒸干得白色固體即化合物3，其中R1=CH3或H。

1.2.3 化合物5a的合成 取化合物3，其中R1= CH3，即4β-氨基-4-脫氧表鬼臼毒素（103.5 mg，0.25 mmol）溶于無(wú)水二氯甲烷（10 mL）中，滴加少量無(wú)水三乙胺（0.20 mL），待鬼臼毒素全部溶解后加入N,N’-羰基二咪唑（59.0 mg，0.36 mmol）常溫?cái)嚢? h，得到化合物4，其中R1=CH3，加入無(wú)水二乙胺（80.0 mg，1.10 mmol）常溫?cái)嚢柽^(guò)夜。依次用體積分?jǐn)?shù)13%鹽酸水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液、飽和氯化鈉水溶液洗滌反應(yīng)所得液，無(wú)水硫酸鈉干燥過(guò)夜，過(guò)濾，濾液減壓蒸干，經(jīng)硅膠柱層析分離提純，減壓蒸干得化合物5a。

1.2.4 化合物5b的合成 取化合物4（126.8 mg, 0.25 mmol），其中R1=CH3，溶解于二氯甲烷（10 mL）中，加入無(wú)水二正丙胺（111.1 mg，1.10 mmol）常溫?cái)嚢柽^(guò)夜。依次用體積分?jǐn)?shù)13%鹽酸水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液、飽和氯化鈉水溶液洗滌反應(yīng)所得液，無(wú)水硫酸鈉干燥過(guò)夜，過(guò)濾，濾液減壓蒸干，經(jīng)硅膠柱層析分離提純，減壓蒸干得化合物5b。

1.2.5 化合物5c的合成 取化合物4（126.8 mg, 0.25 mmol），其中R1=CH3，溶解于二氯甲烷（10 mL）中，加入無(wú)水N-甲基哌嗪（110.1 mg，1.10 mmol）常溫?cái)嚢柽^(guò)夜。依次用體積分?jǐn)?shù)13%鹽酸水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液、飽和氯化鈉水溶液洗滌反應(yīng)所得液，無(wú)水硫酸鈉干燥過(guò)夜，過(guò)濾，濾液減壓蒸干，經(jīng)硅膠柱層析分離提純，減壓蒸干得化合物5c。

1.2.6 化合物5d的合成 取化合物4（126.8 mg, 0.25 mmol），其中R1=CH3，溶解于二氯甲烷（10 mL）中，加入無(wú)水N-乙基哌嗪（125.5 mg，1.10 mmol）常溫?cái)嚢柽^(guò)夜。依次用體積分?jǐn)?shù)13%鹽酸水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液、飽和氯化鈉水溶液洗滌反應(yīng)所得液，無(wú)水硫酸鈉干燥過(guò)夜，過(guò)濾，濾液減壓蒸干，經(jīng)硅膠柱層析分離提純，減壓蒸干得化合物5d。

1.2.7 化合物5e的合成 取化合物4（126.8 mg, 0.25 mmol），其中R1=CH3，溶解于二氯甲烷（10 mL）中，加入無(wú)水1-（2-吡啶基）哌嗪（179.4 mg，1.10 mmol）常溫?cái)嚢柽^(guò)夜。依次用體積分?jǐn)?shù)13%鹽酸水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液、飽和氯化鈉水溶液洗滌反應(yīng)所得液，無(wú)水硫酸鈉干燥過(guò)夜，過(guò)濾，濾液減壓蒸干，經(jīng)硅膠柱層析分離提純，減壓蒸干得化合物5e。

1.2.8 化合物5f的合成 取化合物4（126.8 mg, 0.25 mmol），其中R1=CH3，溶解于二氯甲烷（10 mL）中，加入無(wú)水N-苯基哌嗪（178.3 mg，1.10 mmol）常溫?cái)嚢柽^(guò)夜。依次用體積分?jǐn)?shù)13%鹽酸水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液、飽和氯化鈉水溶液洗滌反應(yīng)所得液，無(wú)水硫酸鈉干燥過(guò)夜，過(guò)濾，濾液減壓蒸干，經(jīng)硅膠柱層析分離提純，減壓蒸干得化合物5f。

1.2.9 化合物5g的合成 取化合物4（126.8 mg, 0.25 mmol），其中R1=CH3，溶解于二氯甲烷（10 mL）中，加入無(wú)水1-（4-甲氧基苯基）哌嗪（211.3 mg，1.10 mmol）常溫?cái)嚢柽^(guò)夜。依次用體積分?jǐn)?shù)13%鹽酸水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液、飽和氯化鈉水溶液洗滌反應(yīng)所得液，無(wú)水硫酸鈉干燥過(guò)夜，過(guò)濾，濾液減壓蒸干，經(jīng)硅膠柱層析分離提純，減壓蒸干得化合物5 g。

1.2.10 化合物6a的合成 取化合物3，其中R1= H，即4β-氨基-4’-去甲基-4-脫氧表鬼臼毒素（100.0 mg，0.25 mmol）溶于無(wú)水二氯甲烷（10 mL）中，滴加少量無(wú)水三乙胺（0.20 mL），待鬼臼毒素全部溶解后加入N，N’-羰基二咪唑（59.0 mg，0.36 mmol）常溫?cái)嚢?h，加入無(wú)水N-甲基哌嗪（80.0mg，1.10mmol）常溫?cái)嚢柽^(guò)夜。依次用體積分?jǐn)?shù)13%鹽酸水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液、飽和氯化鈉水溶液洗滌反應(yīng)所得液，無(wú)水硫酸鈉干燥過(guò)夜，過(guò)濾，濾液減壓蒸干，經(jīng)硅膠柱層析分離提純，減壓蒸干得化合物6a。

1.3 MTT法檢測(cè)化合物體外抗腫瘤活性 取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的Hela及K562細(xì)胞接種于96孔培養(yǎng)板內(nèi)，每孔約含4 000個(gè)細(xì)胞，置37℃，5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。24 h后給藥組加入待測(cè)藥物，每組設(shè)3個(gè)平行孔，陰性對(duì)照組加入與給藥組等體積的溶劑，共孵育48 h后棄培養(yǎng)液，每孔加50 μL 1 mg/mL MTT的磷酸鹽緩沖液（PBS）溶液，37℃孵育4 h，棄上清，每孔加入150 μL DMSO溶解甲臜顆粒，輕度振蕩溶解。以酶標(biāo)儀490 nm下測(cè)定光密度值，用下面公式計(jì)算化合物對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制率，并以SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件計(jì)算IC50值，試驗(yàn)平行3次。

抑制率=（陰性對(duì)照組OD值-加藥組OD值）/（陰性對(duì)照組OD值-空白對(duì)照組OD值）×100%

2 結(jié)果

2.1 化合物的表征數(shù)據(jù)

5a：白色固體，產(chǎn)量455.9 mg，產(chǎn)率89%，m.p. 156℃-157℃;1H NMR (300 MHz,CDCl3)δ 6.81(s, 1H,H-5),6.47 (s,1H,H-8),6.28 (s,2H,H-2′,6′), 5.96(d,J=2.4 Hz,2H,H-OCH2O),5.12 (d,J=3.4 Hz,1H,H-4),4.54(s,2H,H-1,H-NH),4.45-4.36(m, 1H,H-11),3.89(t,J=9.9 Hz,1H,H-11),3.78(s,3H, H-4′),3.74(s,6H,H-3′,5′),3.26(ddt,J=31.9,14.6, 7.3 Hz,4H,H-N′CH2),2.92(d,J=3.3 Hz,2H,H-2, 3),1.14(t,J=7.1 Hz,6H,H-N′CH2CH3);HRESI-MS:m/z 535.204 8 for [M+Na]+(calcd for C27H32N2NaO8+,535.205 1)。

5b：白色固體，產(chǎn)量470.0 mg，產(chǎn)率87%，m.p. 158℃-159℃;1H NMR (400 MHz,CDCl3)δ 6.80(s, 1H,H-5),6.49(s,1H,H-8),6.29(s,2H,H-2′,6′), 5.97(s,2H,H-OCH2O),5.14(d,J=1.8 Hz,1H,H-4), 4.59-4.53(m,1H,H-NH),4.47(d,J=5.8 Hz,1H, H-1),4.45-4.38(m,1H,H-11),3.93-3.84(m,1H,H-11),3.79(s,3H,H-4′),3.75(s,6H,H-3′,5′),3.30-3.04(m,4H,H-N′CH2),2.91(d,J=2.0 Hz,2H,H-2, 3),1.63-1.48(m,4H,H-N′CH2CH2),0.90(t,J=7.4 Hz,6H,H-N″CH2CH2CH3);HR-ESI-MS:m/z 541.2558 for[M+H]+(calcd for C29H37N2O8+,541．254 4)。

5c：白色固體，產(chǎn)量485．3 mg，產(chǎn)率90%，m．p．161℃-162℃;1H NMR (400 MHz,CDCl3)δ 6．81(s, 1H,H-5),6．51(s,1H,H-8),6．28(s,2H,H-2′,6′), 5．98(d,J=2．6 Hz,2H,H-OCH2O),5．15(dd,J=5．9, 4．4 Hz,1H,H-4),4．74(s,1H,H-NH),4．57(d,J=4．8 Hz,1H,H-1),4．43 (dd,J=9．1,7．3 Hz,1H,H-11), 3．97-3．84(m,1H,H-11),3．80(s,3H,H-4′),3．75(s, 6H,H-3′,5′),3．61-3．44(m,4H,H-N′CH2),3．05-2．88(m,2H,H-2,3),2．57(s,4H,H-N″CH2),2．43(s, 3H,H-N″CH3);HR-ESI-MS:m/z 562．215 6 for[M+ Na]+(calcd for C28H33N3NaO8+,562．216 0)。

5d：白色固體，產(chǎn)量459．2 mg，產(chǎn)率83%，m．p．163℃-164℃；1H NMR (300 MHz,CDCl3)δ 6．79(s, 1H,H-5),6．49(s,1H,H-8),6．26(s,2H,H-2′,6′), 5．96(d,J=3．3 Hz,2H,H-OCH2O),5．14(d,J=2．2 Hz,1H,H-4),4．57(t,J=5．3 Hz,2H,H-1,NH),4．48-4．36(m,1H,H-11),3．95-3．85(m,1H,H-11),3．79(s, 3H,H-4′),3．74(s,6H,H-3′,5′),3．50-3．30(m,4H, H-N′CH2),2．92 (d,J=2．1 Hz,2H,H-2,3),2．53-2．38(m,6H,H-N″CH2),1．11(t,J=7．2 Hz,3H,N″-CH2CH3);HR-ESI-MS:m/z 576．231 5 for[M+Na]+(calcd for C29H35N3NaO8+,576．231 6)。

5e：白色固體，產(chǎn)量481．8 mg，產(chǎn)率80%，m．p．166℃-167℃；1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ 8．16(dd, J=4．9,1．6 Hz,1H,H-3″),7．52(ddd,J=8．8,7．3,1．9 Hz,1H,H-5″),6．83(s,1H,H-5),6．71-6．59(m,2H, H-5″),6．49(s,1H,H-8),6．28(s,2H,H-2′,6′),5．97 (d,J=3．4 Hz,2H,H-OCH2O),5．18(dd,J=5．9,3．5 Hz,1H,H-4),4．79(d,J=6．1 Hz,1H,H-NH),4．55(d, J=3．8 Hz,1H,H-1),4．47-4．37(m,1H,H-11),3．91 (dd,J=12．3,7．6 Hz,1H,H-11),3．78 (s,3H,H-4′), 3．74(s,6H,H-3′,5′),3．59(d,J=5．3 Hz,4H,H-N″H2),3．56-3．47(m,4H,H-N′H2),2．95(d,J=3．3 Hz, 2H,H-2,3);HR-ESI-MS:m/z 603．246 1 for[M+Na]+(calcd for C32H35N4O8+,603．244 9)。

5f：白色固體，產(chǎn)量511．1 mg，產(chǎn)率85%，m．p．167℃-168℃；1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ 7．28(dd, J=8．7,7．3 Hz,2H,H-3″,5″-Ar),6．91(d,J=8．7 Hz, 3H,H-2″,4″,5″-Ar),6．84(s,1H,H-5),6．50(s,1H, H-8),6．28(s,2H,H-2′,6′),5．96(dd,J=6．3,1．1 Hz, 2H,H-OCH2O),5．18(dd,J=6．0,3．6 Hz,1H,H-4), 4．84(d,J=6．2 Hz,1H,H-NH),4．56(d,J=4．0 Hz, 1H,H-1),4．49-4．37(m,1H,H-11),3．97-3．87(m,1H, H-11),3．78(s,3H,H-4′),3．74(s,6H,H-3′,5′),3．54 (d,J=5．1 Hz,4H,H-N′CH2),3．17(t,J=5．1 Hz,4H, H-N″CH2),2．95(d,J=4．0 Hz,2H,H-2,3);HR-ESIMS:m/z 624．231 4 for[M+Na]+(calcd for C33H35N3NaO8+, 624．231 6)。

5g：白色固體，產(chǎn)量530．3 mg，產(chǎn)率87%，m．p．164℃-165℃；1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ 7．82(d,J =8．9 Hz,2H,H-3″-Ar),6．89-6．76(m,3H,H-5,2″-Ar),6．44(s,1H,H-8),6．27(s,2H,H-2′,6′),5．93(dd, J=14．3,0．9 Hz,2H,H-OCH2O),5．29(d,J=6．5 Hz, 1H,H-4),5．21(dd,J=6．3,4．4 Hz,1H,H-NH),4．48 (d,J=4．8 Hz,1H,H-1),4．43(dd,J=9．0,7．4 Hz,1H, H-11),3．97-3．89(m,1H,H-11),3．76(s,3H,H-4′), 3．73(s,6H,H-3′,5′),3．64-3．56(m,4H,H-N′CH2), 3．43-3．32(m,4H,H-N″CH2),3．07-2．83(m,2H,H-2, 3),2．46(s,3H,H-COCH3);HR-ESI-MS:m/z 644．284 9 for[M+H]+(calcd for C33H38N3O9+,644．260 3)。

6a：白色固體，產(chǎn)量472．7 mg，產(chǎn)率90%，m．p．153℃-154℃；1H NMR (400 MHz,CDCl3)δ 6．81(s, 1H,H-5),6．50(s,1H,H-8),6．29(s,2H,H-2′,6′), 5．97(d,J=4．6 Hz,2H,H-OCH2O),5．15(d,J=2．4 Hz,1H,H-4),4．71(d,J=6．0 Hz,1H,H-NH),4．54(d, J=3．5 Hz,1H,H-1),4．45-4．37(m,1H,H-11),3．96-3．85(m,1H,H-11),3．77(s,6H,H-3′,5′),3．52-3．33 (m,4H,H-N′CH2),2．92(d,J=1．9 Hz,2H,H-2,3), 2．44(t,J=5．0 Hz,4H,H-N″CH2),2．34(s,3H,H-N″CH3);HR-ESI-MS:m/z 548．201 0 for[M+Na]+(calcd for C27H31N3NaO8+，548．200 3)。

2．2 化合物體外抗腫瘤活性測(cè)定 表1是合成化合物與陽(yáng)性對(duì)照藥依托泊苷（VP-16)對(duì)K562和Hela細(xì)胞株的藥理活性結(jié)果，可以初步看出8個(gè)目標(biāo)化合物顯示出不同程度的對(duì)兩種腫瘤細(xì)胞株生長(zhǎng)抑制作用，且部分化合物活性?xún)?yōu)于VP-16活性。

表1 測(cè)試化合物對(duì)Hela和K562細(xì)胞增殖的抑制活性（s,n=3）Tab 1 Inhibitory activity of target compounds against Hela cell and K562 proliferation（s,n=3）

表1 測(cè)試化合物對(duì)Hela和K562細(xì)胞增殖的抑制活性（s,n=3）Tab 1 Inhibitory activity of target compounds against Hela cell and K562 proliferation（s,n=3）

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3 討論

3.1 合成方法 本文采用CDI縮合法合成脲類(lèi)鬼臼毒素衍生物，相比于其他脲類(lèi)化合物的合成方法，如異氰酸酯法、三光氣法、氯甲酸酯法，CDI縮合法合成步驟少、處理反應(yīng)簡(jiǎn)單、合成產(chǎn)率相對(duì)較高。缺點(diǎn)是對(duì)試劑和反應(yīng)底物的無(wú)水要求較高，CDI自身在空氣中容易吸潮失效，不易把握用量標(biāo)準(zhǔn)。反應(yīng)中所接基團(tuán)不宜太大，否則空間位阻影響產(chǎn)率和產(chǎn)物純度；中間體化合物4不穩(wěn)定容易分解，應(yīng)及時(shí)監(jiān)測(cè)反應(yīng)進(jìn)度。

3.2 構(gòu)效關(guān)系 VP-16又名依托泊苷，拓?fù)洚悩?gòu)酶II抑制劑，臨床上應(yīng)用于小細(xì)胞肺癌的一線(xiàn)化療藥物，以VP-16作為陽(yáng)性藥是由于其在臨床上的廣泛應(yīng)用，以及其基本母核與鬼臼毒素相關(guān)，能夠說(shuō)明改造后的效果是否顯著。根據(jù)表1所示藥理結(jié)果可以看出，化合物5 b和化合物5 g抑制腫瘤細(xì)胞增殖作用較差，推測(cè)是正丙胺基和甲氧基的引入降低了抗腫瘤活性。其中6 a和5 f的體外抗腫瘤活性較好，提示哌嗪環(huán)的引入利于提高鬼臼毒素抗腫瘤活性，且其位阻相對(duì)適當(dāng)，引入苯環(huán)等芳香環(huán)狀結(jié)構(gòu)將降低衍生物的抗腫瘤活性，化合物6 a活性最好，具有進(jìn)一步研究前景。

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（2015-10-08收稿）

Synthesis and biological evaluation of 4-ureido podophyllotoxin derivatives as anticancer agents

LI Nan1,3,ZHAO Yang1,3,WEI Fei2,GAO Chen-guang3,CAO Bo3,GAO Ying3,CHEN Hong1,3
（1.School of Pharmacy,Tianjin Medical University,Tianjin Key Laboratory on Technologies Enabling Development of Clinical Therapeutics and Diagnostics,Tianjin 300070,China;2.Graduate School，Tianjin University of Traditional Chinese Medicine,Tianjin 300193,China;3.Department of Pharmacognosy,Logistic University of PAP,Tianjin 300309,China）

Objective：To obtain anticancer agents with higher efficiency through a novel series of 4-ureido podophyllotoxin derivatives.Methods：The novel target compounds were synthesized by reacting podophyllotoxin or 4’-demethylepipodophyllotoxin with secondary amines under catalytic agent N,N’-carbonyldiimidazole(CDI).All the compounds were characterized by1H-NMR and HR-MS. Meanwhile,MTT assay was used to test their cytotoxicity against K562 and Hela cell lines.Results：Eight novel target compounds were synthesized.Among them,compound 6a exhibits was identified to have stronger inhibition effect.Conclusion：The anticancer activity of podophyllotoxin could be improved when its C-4 is combined with the structure of ureido and piperazidine.

podophyllotoxins;urea;N,N’-carbonyldiimidazole;antitumor activity

R9

A

1006－8147（2016）03-0199-05

國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（30873363）；天津市應(yīng)用基礎(chǔ)項(xiàng)目資助（08JCYBJC070000）

李楠（1990-），男，碩士在讀，研究方向：天然產(chǎn)物結(jié)構(gòu)改造；通信作者：陳虹，E-mail:chenhongtian06@163.com。