孟祥娟，許靜，程愛娟

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藥物臨床觀察

急性冠脈綜合征患者血清高遷移率族蛋白B1的表達及阿托伐他汀干預治療的影響

孟祥娟1，2，許靜2，程愛娟2

摘要：目的探討急性冠脈綜合征（ACS）患者血清高遷移率族蛋白B1（HMGB1）及超敏C反應蛋白（hs-CRP）的表達及阿托伐他汀干預治療對其影響。方法選擇臨床確診為ACS的患者90例和對照組90例，所有患者均于治療前抽取空腹肘正中靜脈血，檢測HMGB1及hs-CRP；將ACS組患者按隨機數(shù)字表法分為標準組（45例）和強化組（45例），分別給予阿托伐他汀20 mg每天1次和40 mg每天1次，治療1周后再次抽取空腹肘正中靜脈血，檢測HMGB1及hs-CRP。結果ACS組患者血清HMGB1及hs-CRP水平高于對照組（P＜0.01）。ACS組患者血清HMGB1水平與hs-CRP水平呈正相關（r=0.389，P＜0.01）。治療前，標準組與強化組患者血清HMGB1及hs-CRP基線水平差異無統(tǒng)計學意義；治療后1周，2組患者血清HMGB1及hs-CRP水平較治療前均降低，且強化組較標準組降低更明顯（均P＜0.05）。結論HMGB1和hs-CRP相互影響，在動脈粥樣硬化的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮重要作用。強化阿托伐他汀治療能顯著降低HMGB1表達，減輕ACS患者的炎癥反應，穩(wěn)定冠脈粥樣硬化斑塊。

關鍵詞：急性冠狀動脈綜合征；高遷移率族蛋白質(zhì)類；C反應蛋白質(zhì)；阿托伐他?。桓哌w移率族蛋白B1；超敏C反應蛋白

急性冠脈綜合征（ACS）是一組包含不同臨床表現(xiàn)、危險性及預后的急性血管綜合征，其共同的主要致病機制是不穩(wěn)定斑塊的纖維帽破裂和內(nèi)膜的淺表糜爛［1］。有研究指出，炎癥反應在易損斑塊的形成中發(fā)揮著關鍵作用［2］，并可導致不穩(wěn)定斑塊破裂［3］。高遷移率族蛋白B1（HMGB1）是新近發(fā)現(xiàn)的一種非特異性的炎癥因子［4］，其在動脈粥樣硬化病變的壞死核心區(qū)高表達［5］。長期應用他汀類藥物可抗動脈粥樣硬化、穩(wěn)定粥樣斑塊。但他汀類藥物能否通過影響HMGB1水平發(fā)揮其抗炎、穩(wěn)定粥樣斑塊的研究尚少見。本研究通過觀察阿托伐他汀對ACS患者血清HMGB1及超敏C反應蛋白（hs-CRP）表達的影響，進一步探討阿托伐他汀抗炎、穩(wěn)定粥樣斑塊的作用。

1　對象與方法

1.1研究對象參照2014美國心臟病學會（ACC）/美國心臟協(xié)會（AHA）非ST段抬高型急性冠脈綜合征診治指南或2013美國心臟病學會基金會（ACCF）/AHA ST段抬高心肌梗死指南，選取2014年10月—2015年6月就診于本院的ACS患者90例，其中不穩(wěn)定型心絞痛（UA）患者29例，非ST段抬高型心肌梗死（NSTEMI）患者26例，ST段抬高型心肌梗死（STEMI）患者35例，男69例，女21例，年齡30～81歲，平均（59.03±9.84）歲。排除標準：既往有嚴重肝腎功能不全及心衰者；伴嚴重感染性疾病、風濕免疫性疾病及惡性腫瘤者；對他汀類藥物過敏者；入院前3個月內(nèi)曾服用過他汀類或非他汀類調(diào)脂藥物者。所有入選者均簽署知情同意書。將入選的ACS患者按隨機數(shù)字表法分為標準組和強化組。另外入選同一時段因胸痛原因待查入住我院，心電圖、心肌壞死標志物、生化全項及影像學檢查均正常，并經(jīng)冠脈造影檢查除外冠心病的患者90例，作為對照組。

1.2研究方法所有入選的ACS患者在抗血小板聚集、抗凝、抗心絞痛等常規(guī)治療的基礎上，標準組和強化組分別給予阿托伐他?。ㄝx瑞制藥）20 mg每天1次和40 mg每天1次治療；所有入組患者于治療前采集空腹肘正中靜脈血5 mL，置促凝管內(nèi)，于4℃、3 000 r/min離心10 min，分離上層血清，應用全自動生化分析儀檢測同型半胱氨酸（Hcy）和血脂，其余血清標本置于-80℃冰凍保存待檢；ACS組患者于治療后1周再次采集清晨空腹肘正中靜脈血5 mL，操作方法同上。血清HMGB1、hs-CRP檢測采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA），兩種試劑盒均同批購自上海藍基生物科技有限公司，并嚴格按照說明書進行操作。

1.3統(tǒng)計學方法應用SPSS 20.0軟件包進行統(tǒng)計學處理。符合正態(tài)分布的計量資料以均數(shù)±標準差（x±s）表示，組間比較采用兩獨立樣本資料t檢驗，方差不齊的組間比較采用t′檢驗，組內(nèi)治療前后指標的比較采用配對t檢驗；不符合正態(tài)分布的計量資料以M（P25，P75）表示，組間比較采用Wilcoxon秩和檢驗；計數(shù)資料以例（%）表示，組間比較采用Χ2檢驗。雙變量正態(tài)資料的線性相關采用Pearson分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2　結果

2.1臨床資料比較ACS組有糖尿病病史、吸煙史的比例和Hcy水平高于對照組，HDL-C低于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義（均P＜0.01），見表1。治療前，標準組與強化組臨床資料比較差異均無統(tǒng)計學意義，見表2。

2.2ACS組與對照組血清HMBG1與hs-CRP基線水平比較ACS組血清HMBG1與hs-CRP水平高于對照組（P＜0.01），見表3。

2.3HMBG1與hs-CRP相關性治療前，ACS組患者血清HMBG1與hs-CRP水平呈正相關（r=0.389，P＜0.01）。

Tab.1　Comparison of general clinical date between ACS group and control group表1　ACS組與對照組臨床基本資料比較?。╪=90）

Tab.2　Comparison of general clinical date between standard group and intensive group表2　標準組與強化組臨床基本資料比較　（n=45）

Tab.3　Comparison of serum HMBG1 and hs-CRP baseline concentrations between ACS group and control group表3　ACS組與對照組血清HMBG1與hs-CRP基線水平比較?。é蘥/L，x±s）

2.4治療前后標準組與強化組血清HMGB1及hs-CRP水平變化治療前標準組與強化組血清HMGB1及hs-CRP水平差異無統(tǒng)計學意義。治療后1周2組患者血清HMGB1及hs-CRP較治療前均降低，且強化組較標準組降低更明顯（均P＜0.05），見表4。

Tab.4　Comparison of HMBG1 and hs-CRP before and after treatment between two groups表4　2組患者治療前后HMBG1與hs-CRP比較?。é蘥/L，x±s）

3　討論

有研究證據(jù)指出，炎癥可通過減薄纖維帽、增強脂質(zhì)的涌入、擴大脂質(zhì)核心以及刺激新血管的生成，在促使易損斑塊形成中發(fā)揮關鍵作用［2］。炎癥反應可導致不穩(wěn)定斑塊破裂并誘發(fā)血栓形成，導致隨后的急性缺血事件的發(fā)生［3］。ACS是急性心肌缺血事件中最常見的一組臨床疾病，其共同的主要致病機制是冠脈不穩(wěn)定斑塊的纖維帽破裂和內(nèi)膜的淺表糜爛［1］。

炎癥因子在冠狀動脈狹窄的過程中產(chǎn)生并釋放，它們可以反過來促進冠狀動脈狹窄的進一步發(fā)展，形成一種惡性的循環(huán)。高遷移率族蛋白（HMG）是一種低分子非組蛋白染色體核蛋白，其富含電荷，在聚丙烯酰胺凝膠電泳中具有快速的遷移率。HMGB1則是HMG家族中含量最豐富且唯一能夠被釋放到細胞外，發(fā)揮其生物學活性的蛋白質(zhì)，其幾乎存在于所有真核細胞中。既往有研究顯示HMGB1是一種新型的敏感性、非特異性的炎癥因子［4］，HMGB1作為一種促炎癥因子，在動脈粥樣硬化炎癥反應中發(fā)揮著重要作用［6］。HMGB1高表達于動脈粥樣硬化斑塊病變的壞死核心中，并由壞死細胞釋放，誘發(fā)局部炎癥［5］。在多種非特異性炎癥反應中，組織細胞的壞死、損傷可引起活化的巨噬細胞和平滑肌細胞主動分泌HMGB1，其在細胞外可直接刺激炎癥細胞產(chǎn)生hs-CRP、腫瘤壞死因子（TNF）和干擾素（IFN）等炎癥因子，而這些炎癥因子同樣可以反過來促進HMGB1的生成，形成級聯(lián)放大的炎癥反應［7］，從而促進動脈粥樣硬化及不穩(wěn)定斑塊的形成，甚至導致不穩(wěn)定型斑塊的破裂，引發(fā)冠狀動脈嚴重的完全性或不完全性阻塞，導致ACS及其他急性心血管事件的發(fā)生。近年來，Kohno等［8］研究發(fā)現(xiàn)急性心肌梗死（AMI）后HMGB1可迅速釋放到細胞外，并在梗死發(fā)生后12 h達高峰，這種高水平的狀態(tài)可維持至梗死后1周。Hashimoto等［9］研究顯示，ACS患者血清HMGB1水平高于對照組，高水平的HMGB1可能是UA或NSTEMI發(fā)病1 d內(nèi)預測心血管死亡率潛在的獨立危險炎癥因子。

hs-CRP可促進冠狀動脈粥樣斑塊內(nèi)巨噬細胞對內(nèi)源性LDL-C的攝取，誘導泡沫細胞的產(chǎn)生，在冠脈粥樣硬化的發(fā)生、發(fā)展中起著關鍵作用；還可以促使白細胞釋放蛋白酶，加速降解粥樣硬化斑塊纖維帽，導致斑塊纖維帽變薄、破裂，繼發(fā)血栓形成，是心血管事件的重要炎癥標志物之一［10］。近年來研究顯示，hs-CRP水平在ACS患者中明顯升高，可反映冠脈斑塊內(nèi)炎癥強度的大小及冠心病的嚴重程度［10-11］。

Hashimoto等［9］和 Seo等［12］的研究顯示血清HMGB1及hs-CRP水平在ACS患者中均較對照組患者升高。本研究與之相符，提示HMGB1水平可能與冠脈斑塊的穩(wěn)定性有關。ACS患者冠脈內(nèi)的易損斑塊破裂、血管內(nèi)皮受損，導致血小板激活并黏附聚集，從而形成血栓，導致冠脈管腔嚴重狹窄或閉塞，引發(fā)心肌缺血。在急性缺血階段，HMGB1由受損或壞死的心肌細胞、血管內(nèi)皮細胞、泡沫細胞和活化的巨噬細胞等釋放，增加炎癥或組織的損傷［13］。本研究還顯示ACS患者血清HMBG1與hs-CRP呈正相關，和Yao等［14］研究相近，提示HMGB1和hs-CRP作為炎癥因子可相互促進，在冠狀動脈粥樣硬化的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮重要作用。

近年來，有研究顯示他汀類藥物在降脂的同時還具有抗炎、抗氧化、改善內(nèi)皮功能及抗動脈粥樣硬化的作用［15］，長期應用可阻止冠脈粥樣硬化斑塊的進展。短期強化阿托伐他汀治療具有抗炎、穩(wěn)定斑塊的作用［16］。但阿托伐他汀能否通過影響HMGB1水平發(fā)揮其抗炎及穩(wěn)定粥樣硬化斑塊的研究報道尚少見。本研究顯示強化阿托伐他汀治療能降低ACS患者HMGB1的表達，穩(wěn)定冠脈粥樣硬化斑塊，發(fā)揮其抗炎、抗氧化作用。本研究時間短、樣本量小，未能對長期大劑量阿托伐他汀治療對冠脈斑塊的穩(wěn)定性及安全性作進一步觀察，有待于進一步證實。

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（2015-08-23收稿2015-12-08修回）

（本文編輯李國琪）

The expression of high mobility group box-1 in patients with acute coronary syndrome and the treatment of atorvastatin

MENG Xiangjuan1，2，XU Jing2，CHENG Aijuan2
1 Graduate School of Tianjin Medical University，Tianjin 300070，China；2 Department of Cardiology，Tianjin Chest Hospital Corresponding AuthorE-mail:tjxkyyjuan@sina.com

Abstract：ObjectiveTo investigate the expressions of high mobility group box-1（HMGB1）and high sensitivity C-reactive protein（hs-CRP）in patients with acute coronary syndrome（ACS）and the effects of atorvastatin on the two inflammatory cytokines.MethodsA total of 90 patients with ACS and 90 cases of normal control subjects were selected in this study.The serum concentrations of HMGB1 and hs-CRP were measured before treatment in patients of ACS.Patients were randomly divided into two groups:control group（n=45）and atorvastatin group（n=45）.Atorvastatin was given 20 mg/24 h and 40 mg/24 h.Blood samples were obtained from the patients for detection of HMGB1 and hs-CRP one week after treatment with atorvastatin.ResultsThere were significantly higher serum levels of HMGB1 and hs-CRP in patients with ACS than those of control subjects（P＜0.01）.The level of HMGB1 was positively correlated with the level of hs-CRP in patients of ACS（r=0.389，P＜0.01）.Before treatment，there were no significant diffferences in level of HMGB1 and hs-CRP in patients with ACS between the two groups.After treatment with atorvastatin，the levels of HMGB1 and hs-CRP were decreased in the two groups of ACS，and those were significantly lower in the intensive group than the standard group（P＜0.05）.ConclusionHMGB1 could stimulate the secretion of hs-CRP and other inflammatory cytokines，playing an important role in the process of occurrence and development of atherosclerosis.High loading dose of atorvastatin may reduce the expression of HMGB1 and decrease the inflammation，and stabilize the plaques in patients with acute coronary syndrome.

Key words：acute coronary syndrome；high mobility group proteins；C-reactive protein；atorvastatin；high mobility group box-1；hs-CRP

中圖分類號：R541.4

文獻標志碼：A

DOI：10.11958/20150127

基金項目：天津市衛(wèi)生行業(yè)重點攻關項目（12KG126）；天津市衛(wèi)生局科技基金（2011KZ61）

作者單位：1天津醫(yī)科大學研究生院（郵編300070）；2天津市胸科醫(yī)院心內(nèi)科

作者簡介：孟祥娟（1988），女，碩士在讀，主要從事心血管疾病基礎與臨床研究

通訊作者E-mail:tjxkyyjuan@sina.com