馬青松　張云芬

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·論著·

急性膽囊炎患者手術(shù)前后血清炎性因子水平變化的臨床意義

馬青松張云芬

064400河北省遷安市中醫(yī)醫(yī)院檢驗科(馬青松)，特需病區(qū)(張云芬)

【摘要】目的檢測急性膽囊炎患者血清白介素-8(IL-8)、白介素-15(IL-15)、超敏C-反應(yīng)蛋白(hs-CRP)、內(nèi)毒素、超氧化物歧化酶(SOD)手術(shù)前后水平的變化情況，并分析其意義。方法選取經(jīng)臨床和影像學(xué)(B超，CT)診斷確診急性膽囊炎并行膽囊切除手術(shù)的患者300例為病例組，同時選取年齡性別相匹配的健康體檢人100例為對照組。檢測病例組患者術(shù)前、術(shù)后第7天及對照組血清膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、總膽紅素(TBIL)、間接膽紅素(IBIL)、鈣(CA)等指標(biāo)的水平；酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)方法檢測各組血清IL-8、IL-15、hs-CRP、內(nèi)毒素、SOD的水平。結(jié)果與對照組比較，病例組患者TC、TG、TBIL、IBIL、CA的水平明顯高于正常對照組(P<0.05)。病例組患者術(shù)前血清IL-8、IL-15、hs-CRP、內(nèi)毒素水平明顯高于對照組(P<0.05)；術(shù)后第7天血清IL-8、IL-15、hs-CRP、內(nèi)毒素水平逐漸下降，但仍高于正常對照組(P<0.05)；血清SOD水平術(shù)前則明顯低于正常對照組(P<0.05)，術(shù)后第7天血清SOD水平逐漸升高，但仍低于正常對照組(P<0.05)。結(jié)論急性膽囊炎患者有明顯的應(yīng)激反應(yīng)存在，持續(xù)時間較長。動態(tài)監(jiān)測IL-8、IL-15、hs-CRP、內(nèi)毒素、SOD水平變化有助于急性膽囊炎的嚴(yán)重程度的判斷及臨床治療。

【關(guān)鍵詞】急性膽囊炎；炎癥因子；應(yīng)激；手術(shù)

膽囊炎有急慢性之分，膽囊炎多數(shù)為慢性，急性膽囊炎多是慢性膽囊炎的急性發(fā)作。慢性膽囊炎起病緩慢，癥狀多樣，輕重程度各異，反復(fù)發(fā)作、容易誤診為胃炎或消化不良而延誤治療[1-3]。目前用于膽囊炎病情評價的外周血指標(biāo)還不確定，如果能找到一種或幾種炎性因子或指標(biāo)用于提示膽囊炎的病情、治療效果等，可以為臨床治療提供依據(jù)。超敏C-反應(yīng)蛋白(hypersensitive C-reactive protein,hs-CRP)[4]、白介素-8(interleukin-8, IL-8)[5]、IL-15[6]是急性時相反應(yīng)因子，炎癥早期即開始升高，炎癥消除則迅速下降。內(nèi)毒素是感染細(xì)菌死亡溶解釋放出來的脂多糖，是毒性物質(zhì)的總稱，炎癥發(fā)生時會明顯上升[7]。超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)能消除生物體在新陳代謝過程中產(chǎn)生的有害物質(zhì)，抑制炎癥的發(fā)生發(fā)展[8]。已有研究證實炎癥時這些因子的變化情況，但這些指標(biāo)在膽囊炎中的報道很少。本研究以及性膽囊炎患者為研究對象，檢測了急性膽囊炎患者術(shù)前、術(shù)后第7天血清膽固醇(total cholesterol, TC)、三酰甘油(triglyceride, TG)、總膽紅素(total bilirubin, TBIL)、間接膽紅素(indirect bilirubin, IBIL)、鈣(calcium, CA)等生化指標(biāo)的水平，還檢測了IL-8、IL-15、hs-CRP、內(nèi)毒素、SOD的水平，對其意義進(jìn)行分析。

1資料與方法

1.1一般資料選取2012年1月至2015年12月于我院行手術(shù)治療的急性膽囊炎患者300例(病例組)，其中男171例，女129例；年齡34～72歲，平均年齡(57±14)歲;患者術(shù)前均經(jīng)臨床和影像學(xué)(B超，CT)診斷為急性膽囊炎，行膽囊切除術(shù)，術(shù)后病理確診為急性膽囊炎。同時選取性別比、年齡相匹配的正常體檢者100例作為正常對照(對照組)。所有入選者均自愿簽署知情同意書，并得到本院醫(yī)學(xué)倫理委員會的批準(zhǔn)。

1.2主要試劑及儀器瑞士Roche公司E601型全自動電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀、美國Beckman公司AU5800全自動生化分析儀、酶免之星全自動免疫分析儀。IL-8 ，IL-15、內(nèi)毒素試劑盒為美國R&D公司產(chǎn)品，hs-CRP檢測試劑盒為德國DiaSys公司產(chǎn)品，SOD試劑盒為美國Biovision 公司 (貨號：K335-100)產(chǎn)品。

1.3標(biāo)本采集所有入選者晨起空腹抽取靜脈血8 ml，室溫靜置30 min后，3 500 r/min離心15 min，分離血清。手術(shù)組在術(shù)前1 d、術(shù)后第7天各采血1次。對照組采血1次。

1.4生化指標(biāo)及hs-CRP濃度的檢測嚴(yán)格遵守儀器操作規(guī)程，用酶法檢測血清TC、TG、用法檢測CA、用法檢測總膽紅素(TBIL)、用速率散射比濁法檢測hs-CRP，采用的儀器為美國BEKMAN公司的AU5800全自動生化分析儀。

1.5ELISA法檢測外周血中IL-8、IL-15、內(nèi)毒素、SOD的表達(dá)操作步驟嚴(yán)格依據(jù)試劑盒的說明書操作，檢測IL-8 ，IL-15、內(nèi)毒素、SOD表達(dá)水平。IL-8、IL-15、內(nèi)毒素試劑盒購自美國R&D公司，SOD試劑盒購自美國Biovision 公司，板內(nèi)CV均<5%、板間CV均<10%,用德國酶免之星全自動酶免分析儀上檢測吸光度(A450)。

2結(jié)果

2.12組血清生化指標(biāo)比較病例組術(shù)前、術(shù)后第7天組與正常組比較，血清生化指標(biāo)TC、TG、TBIL、IBIL、CA的水平明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。病例組術(shù)前與病例組術(shù)后第7天的結(jié)果相比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1　病例組術(shù)前、術(shù)后7天與對照組生化指標(biāo)的變化情況　±s

注：與對照組比較，*P<0.05

2.22組血清hs-CRP、IL-8、IL-15、內(nèi)毒素、SOD水平比較病例組術(shù)前患者血清hs-CRP、IL-8 ，IL-15、內(nèi)毒素的水平明顯高于正常對照組(P<0.05)，術(shù)后第7天患者血清hs-CRP、IL-8 ，IL-15、內(nèi)毒素的水平較術(shù)前水平有明顯的下降(P<0.05)，但仍高于正常對照組(P<0.05)。病例組術(shù)前患者SOD水平明顯低于正常對照組(P<0.05)，術(shù)后第7天患者血清SOD水平較手術(shù)前有明顯的回升(P<0.05)，但仍然低于正常對照組(P<0.05)。見表2。

組別IL-8(pg/ml)內(nèi)毒素(EU/ml)IL-15(ng/L)hs-CRP(mg/L)SOD(U/ml)對照組(n=100)1.1±0.30.4±0.16.2±1.24.7±0.6195±37病例組(n=300) 術(shù)前4.8±0.4*1.7±0.5*28.0±2.0*75.6±11.1*108±20* 術(shù)后第7天2.0±0.4*#0.9±0.3*#11.5±1.7*#11.5±2.8*#75±17*#

注：與對照組比較，*P<0.05；與術(shù)前比較，#P<0.05

3討論

手術(shù)是目前急性膽囊炎的主要解決方法，但手術(shù)只能處理局部病變，全身狀況的評價還需要綜合分析并根據(jù)情況進(jìn)行干預(yù)。因此通過檢測一些炎性因子預(yù)測急性膽囊炎的發(fā)生發(fā)展可為患者提供選擇的機(jī)會，較少手術(shù)和后遺癥的風(fēng)險。

在我們的研究中，病例組患者血清中TC、TG、TBIL、IBIL、CA的水平明顯升高，這可能與飲食、運動有很大關(guān)系。近年來，人們的生活水平逐步上升，高糖、高脂、高膽固醇飲食的比例非常高，飲食結(jié)構(gòu)不合理，而且暴飲暴食、酗酒、運動和體力活動減少，導(dǎo)致TC、TG水平不斷增高，超重、肥胖人數(shù)逐年增加，而超重、肥胖是患膽囊炎的重要基礎(chǔ)[9]。肥胖人群膽囊的收縮功能日漸下降，膽汁排空延遲，容易造成膽汁淤積，結(jié)晶析出；血脂升高，肝臟負(fù)擔(dān)加重，肝內(nèi)葡萄糖醛酸膽紅素的形成減少，非結(jié)合膽紅素增高，總膽紅素水平增高，影響膽囊排空，導(dǎo)致膽汁淤積，促進(jìn)炎癥發(fā)生；同時飲食習(xí)慣不正確，使膽汁濃度增加，有利于細(xì)菌繁殖，容易促進(jìn)膽囊炎的形成。長期大量補(bǔ)鈣，破壞體內(nèi)鈣離子的動態(tài)平衡，容易產(chǎn)生結(jié)石，刺激膽囊發(fā)生炎癥[10]。本研究結(jié)果也證實了上述理論。

Hs-CRP是由肝細(xì)胞合成的急性相蛋白，當(dāng)機(jī)體在受到微生物入侵或組織損傷等炎性刺激時，數(shù)小時內(nèi)血清中hs-CRP就升高，48 h即可達(dá)峰值，隨著病變消退、組織、結(jié)構(gòu)和功能的逐漸恢復(fù)降至正常水平[11]。在感染性疾病、血液病、風(fēng)濕性疾病、器官移植、化療等多種情況下hs-CRP均會升高，并隨著病情的變化有所變化。本研究中病例組術(shù)前的hs-CRP濃度明顯高于正常對照組(P<0.05)，手術(shù)后第7天患者血清中hs-CRP濃度明顯下降，但仍高于正常水平(P<0.05)。提示在術(shù)后較長的時間內(nèi)患者仍處于應(yīng)激狀態(tài)，這應(yīng)引起臨床醫(yī)師的重視，必要時應(yīng)給與處理措施。

IL-8水平在感染、自身免疫性疾病如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、潰瘍性結(jié)腸炎、SLE等、呼吸系統(tǒng)疾病如慢性支氣管炎、肺纖維化、支氣管擴(kuò)張、潰瘍性結(jié)腸炎、甚至惡性腫瘤如乳腺癌、腸癌中高表達(dá)；IL-8還與感染、腫瘤的預(yù)后關(guān)系密切[12]。在我們的研究中，病例組術(shù)前患者血清IL-8素的水平明顯高于正常對照組，術(shù)后第7患者血清IL-8的水平較術(shù)前水平有明顯的下降，但仍高于正常對照組，這也反映了機(jī)體的免疫和炎癥狀態(tài)，應(yīng)引起重視。

IL-15是一種促炎因子，由多種細(xì)胞產(chǎn)生，促進(jìn)Th0和CTL的增殖，促進(jìn)NK細(xì)胞增殖，增強(qiáng)T細(xì)胞殺傷活性，促進(jìn)B細(xì)胞增殖產(chǎn)生免疫球蛋白，刺激巨噬細(xì)胞，提高其吞噬能力，共同調(diào)控免疫應(yīng)答，也參與抗體反應(yīng)、造血和腫瘤監(jiān)視，生物活性廣泛[13]。研究證實IL-15在子癇前期孕婦血漿中升高，且濃度高低隨病情變化[14]。還有研究證實，血清IL-15濃度在過敏性紫癜、2型糖尿病及SLE患者體內(nèi)均明顯升高，明顯高于正常對照組，但重癥胰腺炎的患者體內(nèi)血清IL-15水平反而降低[15]。在我們的研究中，病例組血清IL-15的濃度術(shù)前明顯升高，術(shù)后第7下降，但均高于正常對照組的水平。這與大多數(shù)人的研究結(jié)果是一致的。我們推測IL-15的水平變化與炎癥的嚴(yán)重程度密切相關(guān)，隨著炎癥的發(fā)展，IL-15的濃度逐漸升高，當(dāng)炎癥因素去除后，IL-15的濃度會逐漸下降至正常水平，但當(dāng)炎癥持續(xù)性發(fā)展并惡化，免疫細(xì)胞大量破壞，炎性因子大量消耗，IL-15的濃度反而下降了。

與此同時本研究還檢測了內(nèi)毒素、SOD在急性膽囊炎患者中水平的變化。內(nèi)毒素是革蘭氏陰性桿菌細(xì)胞壁上的脂多糖，位于細(xì)胞壁的最外層、覆蓋于細(xì)胞壁的黏肽上。膽囊炎的致病菌多為革蘭性陰性桿菌，當(dāng)機(jī)體受到嚴(yán)重創(chuàng)傷或出現(xiàn)嚴(yán)重感染時，全身的網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)功能障礙，免疫機(jī)能下降，內(nèi)毒素產(chǎn)生過多，并通過消化道吸收入血，而機(jī)體無法全部清除，同時黏膜出血壞死，屏障破壞，血清內(nèi)毒素的水平就會明顯上升[7]。SOD是一種含有金屬元素的活性蛋白酶，具有抗氧化的作用，是生物體內(nèi)清除自由基的首要物質(zhì)[16]。它能夠減少、對抗甚至阻斷氧自由基對機(jī)體細(xì)胞造成的損害，及時將受損細(xì)胞進(jìn)行修復(fù)，盡可能恢復(fù)細(xì)胞功能，同時它也能消除生物體在新陳代謝過程中產(chǎn)生的有害物質(zhì)，在減輕炎性反應(yīng)，緩解應(yīng)激狀態(tài)、恢復(fù)機(jī)體穩(wěn)態(tài)方面有十分重要的作用，在我們的研究結(jié)果中顯示病例組患者術(shù)前血清內(nèi)毒素的水平明顯高于正常對照組，術(shù)后第7患者血清內(nèi)毒素的水平較術(shù)前水平有明顯的下降(P<0.05)，但仍高于正常對照組(P<0.05)。病例組患者術(shù)前SOD水平明顯低于正常對照組(P<0.05)，術(shù)后第7天患者血清SOD水平較手術(shù)前有明顯的回升，但仍然低于正常對照組(P<0.05)。因此，在手術(shù)后采取措施減輕患者應(yīng)激反應(yīng)是必要的。

在研究中我們發(fā)現(xiàn)，與正常對照組相比，急性膽囊炎發(fā)生時hs-CRP、IL-8、IL-15、內(nèi)毒素明顯升高、SOD的水平明顯下降，手術(shù)后，血清hs-CRP、IL-8、IL-15、內(nèi)毒素的水平逐漸下降，SOD的水平逐漸回升，術(shù)后第7天均接近正常水平，但仍然高于或低于正常對照組水平。提示患者還需要進(jìn)一步的治療。監(jiān)測他們水平的動態(tài)變化對于預(yù)測膽囊炎發(fā)展程度有重要的參考價值，同時可以為膽囊炎術(shù)后的治療提供依據(jù)。

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【中圖分類號】R 657.41

【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A

【文章編號】1002-7386(2016)14-2167-03

(收稿日期：2016-01-12)