張曉娟，呂勃川

(1.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)，黑龍江 哈爾濱 150040；2.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第一醫(yī)院，黑龍江 哈爾濱 150040)

黃芩研究新進(jìn)展

張曉娟1，呂勃川2*

(1.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)，黑龍江 哈爾濱 150040；2.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第一醫(yī)院，黑龍江 哈爾濱 150040)

黃芩為典型的寒涼藥，含有黃酮類、萜類、酚酸類、苯乙醇、氨基酸、甾醇、揮發(fā)油、多糖和微量元素等多種成分，在保肝、抗病毒、腦保護(hù)、抗癌等多方面發(fā)揮藥理作用?，F(xiàn)將黃芩近年來的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述，以期為黃芩的臨床應(yīng)用和研究方向提供參考。

黃芩；化學(xué)成分；藥理；藥代動(dòng)力學(xué)

黃芩(ScutellariabaicalensisGeorgi)，別名山茶根、土金茶根，是唇形科黃芩屬多年生草本植物。《神農(nóng)本草經(jīng)》中品，載其“味苦平。主諸熱黃疽，腸澼，泄利，逐水，下血閉，惡創(chuàng)恒蝕，火瘍。一名腐腸。生川谷。”《吳普》曰：“一名黃文，一名妒婦，一名虹勝，一名紅芩，一名印頭，一名內(nèi)虛，神農(nóng)桐君黃帝雷公扁鵲苦無毒。李氏小溫，二月生赤黃葉，兩兩四四相值，莖空中，或方員，高三四尺，四月花紫紅赤，五月實(shí)黑根黃，二月至九月采?！北酒沸晕犊?，寒，歸肺、脾、胃、肝、膽、大腸和膀胱經(jīng)，有清熱燥濕、瀉火、解毒、涼血止血的功效，偏于清上焦火，現(xiàn)代多用于濕溫、暑濕，胸悶嘔惡，肺熱咳嗽等證，為中醫(yī)臨床和中成藥中最為常用的中藥之一。黃芩為典型的寒涼藥，主要含有黃酮及其苷類、萜類化合物及揮發(fā)油等成分，在保肝、抗病毒、抗菌、抗氧化、消除自由基、抗過敏和保護(hù)神經(jīng)元等多方面發(fā)揮作用，尤其作為防治腫瘤和獲得性免疫缺陷綜合征藥物前景十分廣闊[1-3]。現(xiàn)將黃芩近年來研究的新進(jìn)展綜述如下。

1 化學(xué)成分

黃芩的化學(xué)成分有黃酮類、萜類、酚酸類、苯乙醇、氨基酸、甾醇、揮發(fā)油、多糖和微量元素等多種成分[4-5]。其中黃酮是其最主要的有效成分，鑒定出結(jié)構(gòu)的黃酮類成分已超過40種，主要為黃芩苷(baicalin)、黃芩素(baicalein)、漢黃芩苷(wogonoside)、漢黃芩素(wogonin)等，這四種主要的有效成分，約占10.11%、5.41%、3.55%和1.3%[6]，結(jié)構(gòu)式見圖1。黃芩不同采收期(2012年6月—9月底)根中黃芩苷總體呈降低趨勢；莖中野黃芩苷含量總體呈較平穩(wěn)趨勢；葉中野黃芩苷含量總體呈下降趨勢[7-8]。

圖1 黃芩中主要黃酮類成分化學(xué)結(jié)構(gòu)式

2 藥理作用

2.1 抗菌作用

近年來，因?yàn)榭股氐臑E用，耐藥菌株的產(chǎn)生已成為臨床治療的最棘手問題。但研發(fā)新型抗生素需要較長周期，故從中藥中挖掘具有抗菌活性的中藥或有效組分顯得尤為重要。黃芩及其有效組分具有很好的抗菌作用，尤其以細(xì)菌和真菌的效果最為顯著。對(duì)大腸埃希菌、葡萄球菌、銅綠假單胞菌、幽門螺桿菌、沙門氏菌、結(jié)核分枝桿菌、肺炎衣原體、肺炎支原體、沙眼衣原體、鮑曼不動(dòng)桿菌、腸球菌和白色念珠菌等具有抑制和殺滅作用[9-10]。

2.2 保護(hù)肝臟

子癇前期(pre-eclampsia，PE)是一種常見的妊娠中晚期特發(fā)性疾病，其發(fā)病機(jī)制至今不明。肝臟被認(rèn)為是子癇前期除了胎盤以外最常受損的器官，主要表現(xiàn)為肝細(xì)胞凋亡和血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的增加。高洪娟[11]探討不同劑量黃芩苷干預(yù)對(duì)子癇前期模型大鼠肝臟組織中XIAP、Bcl-2及Caspase-9表達(dá)及肝細(xì)胞凋亡率的影響。結(jié)果，黃芩苷干預(yù)后可以使子癇前期模型大鼠肝細(xì)胞中的XIAP、Bcl-2表達(dá)量增加，Caspase-9表達(dá)減少，同時(shí)肝細(xì)胞凋亡率下降；黃芩苷對(duì)子癇前期模型大鼠肝臟有保護(hù)作用，并呈現(xiàn)劑量依賴性的特點(diǎn)，驗(yàn)證了黃芩苷具有治療子癇前期潛在的臨床價(jià)值。

王秋紅等研究證實(shí)[12]，黃芩、黃柏及其配伍與黃藥子合用時(shí)，對(duì)黃藥子引起的肝毒性具有強(qiáng)大的保護(hù)作用，能使血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移(AST)、堿性磷酸酶(ALP)活性顯著降低(P<0.05或P<0.01)，肝組織MDA含量顯著降低(P<0.001)、GSH含量顯著提高(P<0.001)，肝組織細(xì)胞的病變程度得到明顯改善，從而減輕肝組織細(xì)胞的損傷，達(dá)到保肝的效果。

耿廣琴等[13]研究黃芩水煎液對(duì)CCl4致肝損傷模型小鼠肝細(xì)胞DNA及肝超微結(jié)構(gòu)的影響，探討黃芩莖葉保肝作用的效果。結(jié)果，給予黃芩水煎液后，小鼠肝細(xì)胞DNA尾長、尾矩、Olive尾矩均有所減少，其中黃芩根組與模型組相比，差異極顯著(P<0.01)；莖葉組與模型組相比，差異不顯著(P>0.05)；黃芩根組肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)基本正常，黃芩莖葉組肝細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)細(xì)胞器腫脹，部分線粒體空泡變性，對(duì)肝超微結(jié)構(gòu)的損傷緩解作用不顯著。可見黃芩根水煎液具有一定的保肝作用，與黃芩根相比，黃芩莖葉的作用較弱。

2.3 抗衰老

衰老是機(jī)體組織、器官功能隨年齡增長而發(fā)生的退行性變化，是基因、環(huán)境和生活方式等多種因素共同作用的結(jié)果。隨著年齡增長，一些疾病例如阿爾茨海默癥、心血管疾病、Ⅱ型糖尿病和癌癥等發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)會(huì)明顯增加，黃芩具有明顯的抗衰老作用。

常艷芬等[14]研究黃芩對(duì)D-半乳糖致衰老模型大鼠的影響，初步探討黃芩的抗衰老作用機(jī)制。將SD大鼠隨機(jī)分為5組，即空白組、模型組、黃芩低、中、高劑量組(分別為50、100和200 mg/kg)，采用皮下注射D-半乳糖(100 mg/kg)的方法，建立亞急性衰老大鼠模型，并分別評(píng)價(jià)衰老大鼠的空間學(xué)習(xí)記憶能力(Morris water maze)和自主活動(dòng)(open-field test)。采用代謝組學(xué)技術(shù)對(duì)模型大鼠尿液進(jìn)行NMR數(shù)據(jù)采集并結(jié)合多元統(tǒng)計(jì)分析，探討抗衰老機(jī)制。結(jié)果表明，黃芩三個(gè)劑量均能改善衰老大鼠的行為能力。多元統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果顯示，黃芩低中高劑量組能使衰老大鼠尿液中檸檬酸、丙酮酸、乳酸、泛酸、三甲胺和β-羥基丁酸等6個(gè)標(biāo)志物發(fā)生不同程度的回調(diào)，主要涉及能量代謝、糖代謝和腸菌代謝等代謝途徑的調(diào)節(jié)，表明黃芩發(fā)揮抗衰老作用與這些途徑相關(guān)。

2.4 抗病毒

黃芩性味苦寒，可清熱燥濕、瀉火解毒，涼血安胎，歷代醫(yī)籍中記載了黃芩及其配伍方劑治療肺疾病的功效，現(xiàn)代臨床治療流感的方劑和制劑中黃芩也是常用的一味中藥。為明確其抗病毒的作用機(jī)制，劉曉婷[15]選用人流感病毒亞甲型H1N1，A1/黔防/166/85株，感染人肺癌上皮細(xì)胞株A549建立模型，觀察中藥單體黃芩苷對(duì)H1N1感染A549細(xì)胞的治療作用以及其對(duì)免疫調(diào)節(jié)功能的影響。同時(shí)以固有免疫中的模式識(shí)別受體TLR(Toll樣受體)為研究切入點(diǎn)，探討黃芩苷體外抗病毒作用及發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用的分子作用機(jī)制；以及黃芩苷對(duì)流感病毒感染細(xì)胞產(chǎn)生炎性因子以及凋亡相關(guān)因子的調(diào)控作用。結(jié)果，黃芩苷可以通過調(diào)控Caspase-3、Caspase-6、Caspase-7、Caspase-9，以及多種抗凋亡蛋白Bax-x1，PLIP的活性和表達(dá)，抑制宿主細(xì)胞凋亡，發(fā)揮抗病毒作用。

高燕等研究發(fā)現(xiàn)[16]，黃芩藥材細(xì)胞毒性作用表現(xiàn)為細(xì)胞生長緩慢，細(xì)胞顆粒增多，細(xì)胞脹大、變圓，且毒性作用隨著藥物濃度的降低而降低，細(xì)胞存活率逐漸增加。黃芩對(duì)呼吸道合胞病毒作用明顯，實(shí)驗(yàn)顯示，顯微鏡下正常MA104細(xì)胞呈長橢圓形，排列緊密；病變MA104細(xì)胞變圓，胞內(nèi)顆粒增多，細(xì)胞脫落。

2.5 腦保護(hù)作用

缺血性腦血管疾病具有高發(fā)病率、高死亡率、高致殘率、高復(fù)發(fā)率的特點(diǎn)。目前，國內(nèi)外關(guān)于孕激素在缺血性腦血管疾病方面的基礎(chǔ)研究領(lǐng)域較為成熟，并已經(jīng)確定對(duì)腦缺血或者腦外傷的神經(jīng)保護(hù)作用，其中最有代表性的孕激素就是孕酮，但因其激素的副作用尚未在臨床上展開應(yīng)用。缺血性腦損傷屬于中醫(yī)的“中風(fēng)”的范疇。傳統(tǒng)中醫(yī)藥在治療缺血性腦血管疾病臨床有一定的療效，大量研究表明，中藥黃芩主要藥效成分之一的黃芩苷不僅能增加孕酮水平，而且對(duì)中風(fēng)有一定作用。劉錦林[17]研究在孕激素對(duì)缺血性腦損傷發(fā)揮保護(hù)作用的研究基礎(chǔ)上，結(jié)合中醫(yī)藥相關(guān)的理論指導(dǎo)，以中藥單體黃芩苷調(diào)節(jié)生物體內(nèi)的孕酮水平為切入點(diǎn)，在體實(shí)驗(yàn)研究黃芩苷通過對(duì)雌性pMCAO大鼠體內(nèi)孕酮的影響進(jìn)而發(fā)揮腦保護(hù)作用的可能機(jī)制。結(jié)果，黃芩苷對(duì)缺血性腦損傷大鼠模型發(fā)揮了降低神經(jīng)功能評(píng)分、改善前肢抓力和減少腦梗死體積等腦保護(hù)作用并且上調(diào)血清的PROG水平，應(yīng)用米非司酮對(duì)孕酮進(jìn)行阻斷后，黃芩苷的上述腦保護(hù)作用均顯著受到抑制，提示黃芩苷可能是通過上調(diào)血清PROG水平而發(fā)揮腦保護(hù)作用。

2.6 抗癌

前列腺癌(PCa)是西方國家男性最常見的惡性癌癥之一，一直嚴(yán)重威脅著中老年男性健康。黃芩素作為一種新型的蛋白酶體抑制劑，可在體外誘導(dǎo)前列腺癌細(xì)胞的凋亡、細(xì)胞周期阻滯等增殖抑制作用。潘虹潔等研究發(fā)現(xiàn)[18]，黃芩素可作用于PI3K/AKT/m TOR信號(hào)通路，抑制PI3K/AKT/m TOR信號(hào)通路，及其下游通路，如NF-κB、GSK-3β通路的活性的顯著變化，并引起自噬水平的上調(diào)。

肺癌在中醫(yī)中屬于肺積、咳嗽、咯血、胸痛等范疇，中醫(yī)治療肺癌的處方中多利用黃芩的瀉肺清熱之功效。黃芩對(duì)肺癌的藥理作用機(jī)制包括：誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡、抑制細(xì)胞增殖、化療增敏作用、阻止癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移等。李世武[19]通過TGF-β1誘導(dǎo)A549細(xì)胞發(fā)生EMT，并用黃芩總黃酮提取物對(duì)其進(jìn)行干預(yù)；采用MTT法、劃痕實(shí)驗(yàn)、Transwell小室和PT-PCR實(shí)驗(yàn)對(duì)其進(jìn)行研究；同時(shí)研究黃芩總黃酮提取物對(duì)肺癌A549細(xì)胞因EMT而可能產(chǎn)生順鉑耐藥、遷移和侵襲的影響。結(jié)果，黃芩總黃酮提取物對(duì)TGF-β1誘導(dǎo)肺癌549細(xì)胞發(fā)生EMT有一定的抑制作用，這可能與上調(diào)E-cadherin和下調(diào)Vimentin mRNA表達(dá)有關(guān)。此外，不管肺癌549細(xì)胞是否發(fā)生EMT，黃芩總黃酮提取物均抑制其細(xì)胞遷移、侵襲，并呈濃度依賴性，且在順鉑濃度2～4 μg/mL內(nèi)增加其對(duì)順鉑敏感性。

袁瑞娟等[20]將黃芩苷與醋酸鋅反應(yīng)得到黃芩苷鋅配合物,并采用紫外光譜法、紅外光譜法、質(zhì)譜法對(duì)配合物進(jìn)行表征;采用細(xì)胞毒性檢測CCK-8法檢測黃芩苷和黃芩苷鋅對(duì)HeLa細(xì)胞增殖的體外抑制作用。結(jié)果,鋅離子可能與黃芩苷分子中葡萄糖醛酸上的羧基結(jié)合形成1∶2配合物,黃芩苷鋅配合物和黃芩苷對(duì)He La細(xì)胞的半數(shù)抑制濃度(IC50)分別為12.03 mg/L和8.69 mg/L。可見黃芪苷和黃芩苷鋅配合物均具有體外抗腫瘤活性,但黃芩苷與鋅生成配合物后其抗宮頸癌腫瘤活性降低。

3 藥動(dòng)學(xué)研究

楊艷秋等[21]考察黃芩的主要成分對(duì)Caco-2細(xì)胞上P-gp表達(dá)的影響。結(jié)果，5～40 μmol/mL黃芩苷、黃芩素和5～20 μmol/mL漢黃芩素對(duì)Caco-2細(xì)胞無明顯毒性，可顯著誘導(dǎo)Caco-2細(xì)胞P-gp表達(dá)，降低羅丹明123在Caco-2細(xì)胞內(nèi)的累積量，呈濃度和時(shí)間依賴性關(guān)系。隨著黃芩苷、黃芩素和漢黃芩素濃度的升高，AP→BL和BL→AP的表觀滲透系數(shù)越大，在相同濃度下，黃芩苷、黃芩素和漢黃芩素AP→BL轉(zhuǎn)運(yùn)量顯著大于BL→AP轉(zhuǎn)運(yùn)量(P<0.05)，但兩者的比例趨向一個(gè)常數(shù)?？梢婞S芩苷、黃芩素及漢黃芩素可上調(diào)Caco-2細(xì)胞P-gp蛋白表達(dá)同時(shí)影響其轉(zhuǎn)運(yùn)活性，可能存在載體介導(dǎo)黃芩苷、黃芩素和漢黃芩素外排。黃芩在臨床應(yīng)用時(shí)生物利用度較低可能與黃芩苷、黃芩素和漢黃芩素均有誘導(dǎo)P-gp蛋白表達(dá)有關(guān)。

韓曉靜等[22]基于代謝組學(xué)技術(shù)研究黃芩對(duì)正常小鼠血清和肝臟內(nèi)源性代謝產(chǎn)物的影響。結(jié)果，給予黃芩后小鼠機(jī)體內(nèi)源性代謝物發(fā)生了明顯變化。與空白組相比，黃芩組小鼠血清中的10種代謝物含量發(fā)生變化，如3-羥基丁酸、檸檬酸、膽堿等含量升高，α-葡萄糖和β-葡萄糖含量下降；肝臟中19種代謝物含量發(fā)生變化，如谷氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、肝糖原和腺苷等含量升高，黃嘌呤等含量降低，這些內(nèi)源性代謝物的改變涉及機(jī)體的糖代謝、脂肪代謝、氨基酸代謝等途徑?？梢婞S芩對(duì)正常小鼠機(jī)體代謝的影響不僅與其寒性有關(guān)，而且可能與其抗氧化、保肝、降糖等藥理作用密切相關(guān)。

4 結(jié)語

黃芩作為一種具有悠久歷史的常用的中藥，在臨床上應(yīng)用非常廣泛，對(duì)于多種疾病均有良好的治療作用[23-24]。但中藥的成分復(fù)雜，多種有效成分均可作用于不同的靶點(diǎn)、不同環(huán)節(jié)產(chǎn)生多種藥理作用。目前，中藥的質(zhì)量評(píng)價(jià)全部以某一種或幾種有效成分的高低評(píng)價(jià)其優(yōu)劣，僅從化學(xué)的角度去分析。但中藥中起到藥效作用的有效組分并不是只有這一種或幾種成分，他作用于人體是一個(gè)多組分、多靶點(diǎn)的過程。單從某一種或幾種主要的有效成分含量并不能直接體現(xiàn)中藥藥理活性信息，也不能直觀地反應(yīng)中藥藥效的優(yōu)劣[25]。因此筆者認(rèn)為，黃芩的研究仍不夠深入，應(yīng)該從以下方面入手：1)建立黃芩藥效學(xué)和化學(xué)成分之間的“譜效相關(guān)”將黃芩指紋圖譜中的各個(gè)化學(xué)成分通過相應(yīng)的數(shù)學(xué)模型和藥效學(xué)直接聯(lián)系在一起。2)對(duì)已開發(fā)的具有明顯藥理活性的黃芩活性成分應(yīng)當(dāng)進(jìn)行藥代動(dòng)力學(xué)的研究，通過結(jié)構(gòu)修飾等手段得到活性更強(qiáng)的成分，開發(fā)成新藥。3)加強(qiáng)配伍研究，中藥并不是一個(gè)獨(dú)立的個(gè)體，講究“君臣佐使”“配伍應(yīng)用”，應(yīng)加強(qiáng)和其他中藥配伍之后成分、藥理、藥代動(dòng)力學(xué)的研究。

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2016-12-08

2016-12-26

黑龍江省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(No.H201479)

張曉娟(1980-)，女，副研究員，主要研究方向：中藥及其復(fù)方“譜效相關(guān)”研究。

*通訊作者：呂勃川(1982-)男，主治醫(yī)師，黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)博士后流動(dòng)站在站工作人員，主要從事中西醫(yī)結(jié)合臨床外科的臨床研究工作。

R28

A

1002-2392(2017)01-0096-03